SSI沙门氏诊断血清

StatensSerumInstitut丹麦国家血清研究院沙门氏菌血清分型StatensSerumInstitut•丹麦国家血清研究院(StatensSerumInstitut,简称SSI)是丹麦内务与卫生部下属的事业单位，成立于1902年。•SSI是丹麦国家级卫生和疾病预防、控制机构。为丹麦国民提供卫生服务是其众多职责中的一项。SSI致力于预防和控制传染病、生物威胁和先天缺陷。主要内容•沙门氏菌属的分类及其抗原简介•沙门氏菌的血清学分型方法简介•丹麦SSI沙门氏菌抗血清产品简介沙门氏菌抗原超过2500种血清型例子:SalmonellaTyphimurium抗原表(O:4,5,12;H:i:1,2)O抗原(57种)O抗原也称菌体抗原，是细胞壁的组成成分。Vi抗原(荚膜多糖)Vi抗原是一种特殊的菌体抗原，属于K抗原群H抗原(116种)大部分沙门氏菌H抗原都有两相，第一相被称为特异性相，第二相为非特异性相Flagella鼠伤寒沙门氏菌（红色）入侵培养人类细胞。O抗原H抗原Vi抗原沙门氏菌血清型命名法：O:[Vi]:H1:H2超过2500种血清型例：4,5,12:i:1,2SalmonellaTyphimurium沙门氏菌抗血清沙门氏菌抗血清应用沙门菌血清学（快速）确诊•O多价群血清•H多价群血清（可选）完整血清学分型•全部群血清和因子血清部分血清分型或快速鉴定•需要选择性的部分抗血清•例如：S.Enteritidis（肠炎）和S.Typhimurium（鼠伤寒）Title:AntigenicformulaeoftheSalmonellaserovars(沙门氏菌血清型抗原表)20079theditionWHOCollaboratingCentreforReferenceandResearchonSalmonella,InstitutPasteur,Paris,FranceTheKauffmann-WhiteschemeFritzKauffmann•1922-1929:在德国研究沙门氏菌•1929:建立了最初的血清分型表•1929-1932:在德国研究肺炎链球菌•1933-1965:工作于SSI•1938-1965:国际沙门氏菌参比中心主任•1940:建立肺炎链球菌的丹麦式血清分型系统F.Kauffmann1899-1978沙门氏菌属分类•salmonellaenterica肠道沙门氏菌–下属亚种(2557)I-enterica肠道亚种(1531)II-salamae萨拉姆亚种(505)IIIa-arizonae亚利桑那亚种(99)IIIb-diarizonae双亚利桑那亚种(336)IV-houtenae豪顿亚种(73)VI-indica印度亚种(13)•Salmonellabongori邦戈尔沙门氏菌(22)总计：2579（截止2007年）沙门氏菌O群的命名命名规则旧名现名旧名现名旧名现名________________________________________________________________________A2G1–G213Q39B4H6,14R40C1–C46,7I16S41C2–C38J17T42D19K18U43D29,46L21V44D39,46,27M28W45E1–E2–E33,10N30X47E41,3,19O35Y48F11P38Z50________________________________________________________________________其它O:51–O:67(O:64=O:48)在沙门氏菌血清分型之前1.(粪便)标本采集2.在SSI肠道培养基上培养并分离沙门氏菌3.生化鉴定血清分型之前一定要先做生化鉴定•赖氨酸脱羧酶•吲哚试验•硫化氢•半固体琼脂(游动性)•葡萄糖产气•糖发酵试验沙门氏菌生化鉴定利用生化特性区别沙门氏菌属的种及亚种SpeciesS.entericaS.bongoriSubsp.entericaIsalamaeIIarizonaeIIIadiarizonaeIIIbhoutenaeIVindicaVIDulcitol++---d+ONPG(2h)--++-d+Malonate-+++---L(+)-tartrate+------Gelatinase-+++++-Sorbitol+++++-+KCN----+-+PGUAdd-+-d-Salicine----+--Lactose---(75%)+(75%)-d-HabitatWarm-bloodedanimalsCold-bloodedanimalsandenvironment沙门氏菌血清分型Kauffmann-WhiteschemeO(Vi):H1:H2S.Typhi9,12,[Vi]:d:–伤寒S.ParatyphiA1,2,12:a:[1,5]副伤寒S.Typhimurium1,4,[5],12:i:1,2鼠伤寒S.Braenderup6,7,14:e,h:e,n,z15布伦登卢普H抗原第二相通过相诱导后分型确定食物传染和人间传染的主要原因临床事件血清分型的作用•食物中毒诊断病情•腹泻控制动物和食品•伤寒流行病学监测流行病暴发溯源人类标本•A-E多价•Vi其他标本•A-I多价•A-S多价•H多价一定要进行生化实验沙门氏菌血清学（快速）确诊GroupB包括鼠伤寒(S.typhimurium)GroupD包括肠炎(S.enteritidis)丹麦O抗原的分布统计数据人源–PolyA-E(Art.no.40190)–Vi(Art.no.15514)动物和环境–PolyA-I(Art.no.44806)–PolyA-S(Art.no.48957)–PolyH(Art.no.40290)0%25%10%63%1%1%Serogr.ASerogr.BSerogr.CSerogr.DSerogr.EOthersSalmonellasero-groupdistribution(1999).NationalReferenceLaboratoryforEnteropathogenicBacteria,SSI.SSI肠道致病菌国家参比实验室玻片凝集实验操作方法•于洁净载玻片的测试区域及对照区域分别滴一滴抗血清和一滴生理盐水；•用铂金丝蘸取新鲜培养物单菌落一环，于载玻片上的抗血清和生理盐水中；•分别将培养物和抗血清、培养物和生理盐水充分混匀，来回倾斜晃动载玻片10s；•观察凝集现象：O抗原为颗粒状凝集H抗原为絮状或绒毛状凝集S.Typhimurium1,4,[5],12:i:1,2沙门氏菌血清分型流程图血清学确诊PolyA-E+Vi沙门阴性O抗原鉴定O多群血清OMA-OMGOMB与群和因子血清反应H抗原鉴定H多价群血清HMA-HMGHMAiHMBg,m相诱导H多价群血清HMA-HMGHMD1,2与相血清和因子血清反应：确定第1相与相血清和因子血清反应：确定第2相沙门氏菌血清型结论无游动，此菌株只有单一相。S.Enteritidis1,9,12:g,m:-OMC,etc.OMA1,4,[5],121,9,12HMBe,hz10S.Newport6,8:e,h:1,2S.Hardar6,8:z10:enx6,8HMD1,2e,n,xHMBHMCrS.Infantis6,7,14:r:1,56,7,14HMD1,5阳性结果阴性结果图例相诱导血清分型实例：沙门菌株No.1xx(x)xxO抗原:1,9,12xxxSGG无需诱导，菌株为单相H抗原:g,mS.EnteritidisO:1,9,12H:g,m:-xxxxxxO:1,4,[5],12血清分型实例：沙门菌株No.2xxSG2xx结果：1,4,[5],12:i:1,2沙门鼠伤寒H:iH:1,2沙门氏菌相诱导加100µl相诱导血清加10ml半固体琼脂(Swarmagar)混匀并固化20分钟沙门氏菌相诱导操作在平板中心接种，35-37ºC过夜培养从边缘取菌落进行血清凝集实验沙门氏菌相诱导操作未接种无游动正常游动沙门氏菌相诱导操作SSI体外诊断产品1.培养基2.抗血清沙门氏菌（Salmonella）大肠杆菌（E.coli）肺炎链球菌（Pneumococci）志贺菌（Shigella）链球菌（Streptococci）3.其他试剂盒和产品SSI沙门氏菌抗血清沙门氏菌抗血清玻片凝集用抗血清多价血清Vi血清O多群抗血清(OM)O群抗血清O因子血清H多相抗血清(HM)H单相抗血清H因子血清H:R-相抗血清相诱导用抗血清SG相诱导血清H相抗血清抗血清试剂盒SalmonellaSero-QuickIDKitSalmonellaGroupKit拥有齐全的沙门血清产品可使用Kauffmann-White表对所有已知沙门氏菌进行完整分型。•所有的抗血清–除了Vi抗血清–都来自兔子（多克隆）。•Vi抗血清产自老鼠（单克隆）。用于玻片凝集反应快速•10秒之内判读结果Vi来自单克隆抗体带滴管瓶装1或3ml包装，即用型每毫升可用于50次实验没有交叉反应沙门氏菌抗血清简介+-SSI血清相对其他品牌血清的不同沙门氏菌O+H血清SSI血清更快的反应时间(10sec./1min)；SSI血清专用于玻片凝集反应；若有需要，可提供高滴度血清；SSI血清用量每次反应仅需30µl。同一玻片上可同时进行多个反应；SSI血清覆盖全部已知沙门氏菌；SSI的H因子血清也可用于试管凝集反应；SSI有齐全的相诱导血清；产品覆盖广玻片凝集用血清多价血清单克隆Vi血清O多群血清O群血清O因子血清H多相血清H单相血清H因子H:R相血清相诱导血清SG混合血清Kauffman-White提供超过180种血清产品，根据Kauffman-White表可对所有已知沙门菌株进行分型。沙门氏菌诊断血清30支套装沙门氏菌诊断血清60支套装沙门氏菌诊断血清30支套装沙门氏菌抗血清60支套装沙门30/60支套装分型流程