加样回收率

加样回收率液色迷人加标回收率的测定可以反映测试结果的准确度。进行加标回收率测定时应注意以下问题：1）加标物的形态应和待测物的形态一致。2）加标量应尽量与样品中待测物含量相近，并注意对样品容积的影响。3）加标后的测定值不应超过方法的测定上限的90%。计算方法一:(测定量-已含量)/加入量乘以100%计算方法二:测定量/(已含量+加入量)乘以100%以上两种计算方法不知哪种是可行的,还是都可以使用?我认为方法一可行，更准确些加样回收率(%)=(测得量一原有量)/加入量x100%＝实际测得加入量／理论加入量方法二不可行加样回收率(%)=测定量/(已含量+加入量)x100%＝实际测得总量／理论总量从误差传递的角度，以第一种为宜我认为方法一可行，2005年版药典一部附录加样回收率也是这样要求的。关于加样回收率的实验设计：1.高中低三个浓度的选取原则：高浓度应为样品浓度的120％左右、中浓度应为样品浓度的100％左右、低浓度应为样品浓度的80％左右。2.高中低三个浓度样品的制备：最好采用加入50％量的样品，然后分别加入70％、50％、30％量的对照品储备液，制成供试样品，每个浓度三份。3.测定：采用测定方法分别测定，这个时候要注意你之前制定的标准曲线的范围(线性范围)，是否能涵盖这九份样品的浓度范围？也就是说这九份样品的浓度都应该在你的标准曲线范围内。4.得到测定结果后的结算：应采用你的结果值，也就是每份样品的最终计算结果，而不是测定过程中没有经过计算的数据，因为你的加样回收率要体现的是全部操作过程的准确与变异程度，其中也包括数据计算。关于药物定量分析中加样回收率实验的再探讨回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物，经过样品处理都有一定的损失。做为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基质中定量加入药物，经处理后与标准品的比值。标准品为流动相直接稀释而来，而不是同样品一样处理。若一样，只是不加基质来处理，可能会有很多影响因素被此屏蔽掉。如全部转移有机相时只转移了98%等。也就因此失去了绝对回收率的考察初衷。相对回收率严格来说有两种。一种是回收试验法，一种是加样回收试验法。前者是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种测定用得较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。第二种是在已知浓度样品中加入药物，来和标准曲线比，标准曲线也是在基质中加药物。相对回收率主要考察准确度。准确度系指用该方法测定的结果与真实值或认可的参考值之间接近的程度。有时也称真实度。一定的准确度为定量测定的必要条件，因此涉及到定量测定的检测项目均需要验证准确度，如含量测定、杂质定量试验等。准确度应在规定的范围内建立，对于制剂一般以回收率试验来进行验证。试验设计需考虑在规定范围内，制备3个不同浓度的试样，各测定3次，即测定9次，报告已知加入量的回收率（％）或测定结果平均值与真实值之差及其可信限。1.含量测定原料药可用已知纯度的对照品或符合要求的原料药进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。制剂可用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，必要时，与另一个已建立准确度的方法比较结果。一般制剂的含量测定的回收率是向辅料中加入处方量80％、100%、120%已知含量的主药，按含量测定的方法测定。溶出度测定方法的回收率按处方量50％、80％、100％加入主药进行测定。2.杂质定量试验杂质的定量试验可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药典方法或经过验证的方法。如不能测得杂质的相对响应因子，可在线测定杂质的相关数据，如采用二极管阵列检测器测定紫外光谱，当杂质的光谱与主成分的光谱相似，则可采用原料药的响应因子近似计算杂质含量（自身对照法）。并应明确单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（％）或面积比（％）。3.7重复性试验取同一批样品，按供试品溶液方法平行制备5份供试品溶液，按色谱条件进行测定，计算刺楸皂苷A的平均含量为9.67mg/g，RSD值为0.10%，表明方法的重复性良好。表8重复性试验结果No.峰面积(A)含量(mg/g)(mg/g)RSD(%)13874119.659.670.1023879689.6733882279.6743879109.6753884349.683.8加样回收率试验精密称取已知含量(9.67mg/g)的样品9份，每份0.5g，分别精密加入刺楸皂苷A对照品适量，按供试品溶液制备方法制备，按色谱条件测定含量。计算刺楸皂苷A的平均回收率为98.98%，RSD值为0.27%。表9加样回收率试验结果No.称样量含量加入量测得量回收率RSD(g)(mg)(mg)(mg)(%)(%)(%)10.50024.83694.819.590898.8398.980.2720.50024.83694.829.611699.0630.50044.83894.829.600898.7940.50064.84084.819.591298.7650.50054.83984.879.683299.4560.50054.83984.869.655499.0970.50044.83894.869.632898.6480.50044.83894.869.643398.8690.50064.84084.829.627699.31