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双抗体夹心法原理以FABP为例（检测抗原）阳性反应Y1=F14A（标记了胶体金）Y2=F104B（固定在NC膜上即T线）Y3=羊抗鼠IgG（固定在NC膜上即C线）此方法较常用，主要用于较大分子量的蛋白（抗原）的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目是双抗原夹心检测抗体的，原理类似。样品（血清）含FABP蛋白金标记F14A抗体金-F14A-FABP金-F14A-FABP-F14A金-F14A-羊抗鼠IgG金-F14A-FABP羊抗鼠IgG显示红色显示红色金标记F14A抗体不显色显示红色金-F14A-羊抗鼠IgG阴性反应阳性反应竞争法原理以吗啡为例（检测抗原）阳性反应Y1=胶体金标记的吗啡单抗Y2=吗啡-BSA偶联物Y3=羊抗鼠此方法主要用于小分子抗原（毒品、农药、肽链等）的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC膜上，常常用化学方法把小分子偶联到BSA等大分子物质上再固定于NC膜上。此结果与双抗原夹心法相反，阴性CT两条都是红线，阳性只有C线一条红线。金-吗啡抗体-吗啡吗啡-BSA金标记吗啡抗体显示红色不显色金-吗啡抗体-吗啡羊抗鼠样品（尿液）含吗啡显示红色显示红色金标记吗啡抗体金-吗啡抗体-羊抗鼠阴性尿液抗体-吗啡羊抗鼠阴性反应阳性反应间接法原理以HIV为例（检测抗体）此方法主要用于血清中抗体检测，纯化或者重组的抗原固定于NC膜上，标记多为蛋白A(ProteinA或叫SPA，抗体Fc端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金过量，一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。斑点免疫渗滤法使用就是间接法。显示红色显示红色显示红色不显色