二类体外诊断试剂临床研究的基本要点

1体外诊断试剂临床研究的基本要点广东省食品药品监督管理局审评认证中心2首先：哪些二类体外诊断试剂需要进行临床试验？首次注册产品：除校准品、质控品、参比液外的二类体外诊断试剂已上市产品：申请变更产品主要原料（主要指抗原、抗体）或增加临床适应症的试剂按照《体外诊断试剂注册管理办法》（试行）规定，未在注册证有效期内申请重新注册的试剂3一、临床试验机构的选择（一）应选择至少2家（含两家）省级卫生医疗机构，特殊使用的产品可在市级以上的疾病控制中心、专科医院或检验检疫所、戒毒中心等临床机构。注：目前省局限定省级卫生医疗机构为三甲医院。4一、临床试验机构的选择重要！目前二类试剂基本上都很少满足在市级以上的疾病控制中心、专科医院或检验检疫所、戒毒中心等临床机构进行临床试验的条件，企业应慎重选择。5一、临床试验机构的选择（二）临床机构的检验实验室（简称实验室）应符合《医疗机构临床实验室管理办法》要求；应优先考虑经CNAS-CL02《医学实验室能力认可准则》(ISO15189:2007)认可或GB17025标准认可的实验室。6一、临床试验机构的选择实验室所釆用的检测系统应为完整、有效的,检测系统包括申报产品的检测系统和所选择的对照检测系统。对照检测系统的试剂、校准品、仪器等应是经注册批准的；其主要分析性能指标（如准确性、精密度、线性范围、参考区间、测量范围等）满足临床要求。申报产品的检测系统与所选择的对照检测系统最好为同一类型的检测方法（如同为酶联免疫反应、同为化学发光免疫反应等），如为非同一类型的检测方法，可能选择分析性能较近似的方法。7一、临床试验机构的选择（三）实验室应有完善的室内质控程序。（四）实验室的该项目检测人员应具有相应资质（至少具有中级以上技术职称），对选择对照系统的项目检测具有一定经验。（五）应有能力提供临床评价所需的各类样本。8二、临床研究设计原则（一）研究方法1．新诊断试剂产品的临床研究1．1对于新诊断试剂产品而言，选择适当的研究对象，用进行临床研究的产品与诊断该疾病的金标准（goldstandard）进行盲法同步比较。对用于早期诊断、疗效监测、预后判断等的诊断试剂产品，在进行与金标准的比较研究的同时，还必须对研究对象进行跟踪研究。在研究开始时，研究者应明确研究对象的入选标准、随访标准和随访时间。9二、临床研究设计原则1．2金标准的确定金标准是指目前公认的最可靠、最准确、最好的诊断方法，也称标准诊断方法。临床上常用的金标准有组织病理学检查（活检、尸检）、手术发现、影像诊断（CT、核磁共振、彩色B超）、病原体的分离培养以及长期随访所得的结论。金标准一般是特异性诊断方法，可以正确区分“有病”和“无病”。10二、临床研究设计原则1．3研究对象的选择研究对象应包括两组：一组是用金标准确定为有某病的病例组，另一组是用金标准证实无该病的患者或正常人群，作为对照组。病例组应包括该病种的不同病例，如症状典型和非典型的，病程早、中、晚期的，病情轻、中、重型的，不同年龄层次的等，以便能反映该病的全部特征。对照组应包括确定无该病的患者，且易与本病相混淆疾病的病例。11二、临床研究设计原则1．4同步盲法测试经金标准确定的病例与对照组中的受试者样本同步接受“新的检验项目”产品的测定，将测定结果与金标准判定的结果进行比较，计算“新的检验项目”产品测定结果与金标准判断结果符合或差异程度的统计学指标，再根据这些指标对新产品进行评价。在试验操作的全过程和判定试验结果时，采用盲法（尽可能用双盲法）是保证诊断试验结果真实可靠的关键。12二、临床研究设计原则2．“已有同品种批准上市”产品的临床研究选择已批准上市产品，采用进行临床研究的产品与已批准上市产品针对临床样本进行对比试验研究，证明本品与已上市产品等效（equivalent）。2．1对比试剂的选择在采用已批准上市产品作为对比试剂的前提下，选择目前临床普遍认为质量较好的产品。同时应充分了解所选择产品的技术信息，包括方法学，临床使用目的和范围，主要性能指标、标准品或校准品的溯源情况、推荐的参考值（参考范围）等，以便对试验结果能够进行科学的分析。13二、临床研究设计原则2．2研究对象的选择原则同1．3。2．3关于对比试验研究中测定结果不符的样本应采用金标准或其他方法再次进行确认试验，以便对临床研究结果进行分析。14二、临床研究设计原则（二）关于临床研究样本量注册申请人（简称申请人）或/临床研究者应根据产品临床使用目的，与该产品相关疾病的临床发生率确定临床研究的样本量。在符合指导原则有关最低样本量要求的前提下，还应符合统计学要求。罕见病、特殊病种及特殊情况可酌减样本量，但应说明理由，并满足评价的需要。15二、临床研究设计原则重要！临床研究的总样本数至少为200例，是最低要求，不是最终要求，最终要求是具有统计学要求。16二、临床研究设计原则定量测试的产品，样本中待测物浓度应覆盖分析系统检测范围，并应包含医学决定水平，且尽可能均匀分布。尽可能使50%样本的测定值处于参考区间以外，但在测量范围内。定性测试的产品，应该包含阳性、阴性和接近临界值的样本，并且样本数目尽可能均匀分布。17二、临床研究设计原则（三）其他注意事项应明确临床样本的采集要求：血清/血浆应明确抗凝剂的要求、存贮条件、可否冻融等要求及避免使用的样本。注：尽可能釆用新鲜样品，避免贮存。如无法避免使用贮存样品时，注明贮存条件及时间，在数据分析时应考虑其影响。对检测结果有明显干扰作用的样本,如溶血、脂血、或浑浊的样本尽量避免使用。试验系统与对照系统选择的实验体系样本及其要求应一致。18二、临床研究设计原则检测系统和对照系统都应建立适当的质控程序，应保证检测结果的可靠性。19三、试验过程的管理及数据分析采用已批准上市产品作为对照系统，评价试验系统和对照系统的一致性，临床试验研究还应考虑诊断敏感度、诊断特异度等其他性能的评估。对于定量检测，可以通过分析检测结果的偏倚估计来评价；定性检测，可以通过分析检测结果的一致性进行等效性评价。20三、试验过程的管理及数据分析（一）试验过程的管理临床试验建议分若干天（例如5天）內完成，并规定每天完成的样本数。每天试验时间应根据被测物在样本中的稳定性及试验时间长短决定，并作出规定，其原则为试验时间不得长于被测物在样本中的稳定时间。每天试验必须保证同一样本在试验系统和对照系统上在规定时间內完成对比试验。试验过程中应规定检测顺序，可以先用对照系统进行检测，再用试验系统进行检测；亦可先检测试验系统,再用对照系统进行检测。试验过程中要观察离群值，离群值的个数不得超过2.5%，即在100个样本的临床试验中，不得出现3个离群值。如出现3个或3个以上离群值，应寻找原因，如仅仅是样本问题，则更換这些样本；如找不到原因，又影响“等效”的分析时，停止试验并通知试验申请者。21三、试验过程的管理及数据分析（二）偏倚估计的数据分析2.1作图（1）试验系统和对照系统的均值对应作散布图；（2）试验系统每次测定值与相对应的对照系统每次测定值作散布图；以上以试验系统作Y轴，对照系统作X轴，作散布图。如图1所示。（3）每次测定试验系统与对照系统均值之差与相应对照系统均值作图(中心水平线为零)；（4）试验系统与对照系统每次测定值之差与相应对照系统均值作图(中心水平线为零)。22三、试验过程的管理及数据分析2.2目测线性,，计算相关系数目测线性，非线性段可截去；如线性范围太短，则停止评价。对线性段作相关分析，要求r0.975，如0.975，应扩大样本量以扩大数据范围。23三、试验过程的管理及数据分析2.3建立回归方程并分析计算a值及b值,列出线性回归方程式。Y=a+bX----------------------------（3）按下列方程式分别计算每组的平均偏倚B及试验系统与对照系统测定值差值的标准差SD。B=Σ(Yi-Xi)/N-----------------------------(4)SD=√Σ[(Yi-Xi)-B]2/(N-1)----------------(5)(其中B是适当浓度范围内的估计的预期(平均)偏倚；X为对照系统测定值；Y为试验系统测定值；SD为两系统测定值差值的标准差)计算医学决定水平(Xc)处预期偏倚估计值(Bc＾)及其95%区间。Bc＾=a+(b-1)Xc-----------------------(6)Bc＾95%区间=(Bc)＾±2*SD/√N--------(7)24三、试验过程的管理及数据分析2.4结果判断与解释:将医学决定水平预期偏倚的可信区间与允许误差的限值相比较(允许误差推荐为小于或等于1/2CLIA88或者室间质评可接受范围)。预期偏倚可信区间小于规定的允许误差的限值,试验系统可被接受；预期偏倚可信区间大于规定的允许误差的限值,试验系统不被接受。25三、试验过程的管理及数据分析2.5统计学分析试验系统与对照系统之间结果作配对t检验。如t检验有显著差异，则两者有系统误差，需要进一步分析原因（可能与参考区间有关）必要时需要重新设计临床试验方案。26三、试验过程的管理及数据分析3.一致性的数据分析对于定性检测的产品，临床试验还应关注诊断敏感度、诊断特异度、阳性符合率和阴性符合率，并且对于患病和非患病的对象应通过临床诊断金标准选取。本文仅介绍采用已批准上市、临床公认较好的产品作为对照系统，评价试验系统和对照系统的一致性。定性检测产品的结果多为计数统计资料，可按下表进行统计分析：27三、试验过程的管理及数据分析28三、试验过程的管理及数据分析对上述基数资料进行Kappa一致性分析，Kappa系数0.8，为高度一致，认为两系统等效；0.8Kappa系数0.4认为一致，需进行阳性符合率和阴性符合率比较并进行统计学分析；Kappa系数0.4则认为两系统不一致，两系统不等效。临床试验还应比较阳性符合率和阴性符合率的相关要求，一般来说，阳性符合率和阴性符合率的公式为：阳性符合率=a/a+c*100%阴性符合率=b/b+d*100%阳性符合率和阴性符合率满足临床要求，认为两个方法或产品等效；阳性符合率和阴性符合率相差过大，则需重新设计临床方案。29四、要点两家三甲临床试验机构两家医院采用相同的对照体系确保每家医院每个检测项目100例以上样本盲法试验报告中附对照产品的技术资料（注册证、标准和说明书等）报告中需附临床试验数据汇总对临床数据的统计分析30产品注册中需要注意的问题标准应尽量引用现有的国标、行标，自行制定的试验方法需经过可行性验证。31产品注册中需要注意的问题注意注册单元的划分；气管插管--------气管切开插管臂式血压计---------腕式血压计应明确阐述同时申请的不同型号、规格之间的区别；申报材料中切忌广告性、浮夸性说明；应提供产品原理的依据（教科书、权威文献等）；32产品注册中需要注意的问题对具备多个作用单元的产品，应逐个说明每个作用单元的技术原理及预期用途；写好标准的编制说明；用好标准的附录；产品的使用功能建议写入标准；技术报告、风险分析报告、自测报告切勿走过场。33产品注册中需要注意的问题首次注册时所有申请型号规格应经检测机构检测，或检测覆盖，超声探头不建议检测覆盖；重新注册应注意标准的更新34产品注册中需要注意的问题《广东省二类医疗器械首次注册提交临床资料的有关要求》（106-001二类医疗器械产品注册证核发（首次注册））A：治疗类、诊断类（包括软件）、功能性敷料B：工具类、通用敷料35产品注册中需要注意的问题注意收集国家局及省局发布的技术性文件36产品注册中需要注意的问题37原则未申请即视为没有！未经验证即视为不可行！38医疗器械说明书编写-10号令解读《医疗器械说明书、标签和包装标识管理规定》（局令第10号）2004年07月08日发布39医疗器械说明书编写-10号令解读第七条医疗器械说明书应当符合国家标准或者行业标准有关要求，一般应当包括以下内容：（一）产品名称、型号、规格；（二）生产企业名称、