尿液及体液一般检查

尿液及体液一般检查上海交通大学医学院胡晓波副教授(一)尿液标本的种类kindsofurinespecimens1．首次晨尿morningurine2．随机尿randomurine3．餐后尿postprandialurine4．定时尿timedurine尿液标本的保存与防腐storageandantisepsisofurinespecimens1．冷藏refrigeration2.防腐antisepsis尿液的理学检查urinephysicalexamination：尿量volume颜色colourh混浊度turbidity气味odour尿量urinevolume多尿polyuria少尿oliguria无尿anuria尿色urinecolor正常尿液的颜色红色浓茶色、振荡后有黄色泡末棕黑色乳白色气味odor正常尿液新鲜排出的尿液有氨臭味烂苹果味大蒜臭味腐臭味老鼠尿样臭味尿液化学检查urinechemicalexamination干化学尿液分析仪的发展史1956年，美国Ames和Lilly两家公司几乎同时创建了测定尿糖的Clinistix和TesTape试剂带。1957年，美国Ames推出测定尿液蛋白Albustix试剂带。1958年，推出尿糖和尿蛋白的二联Uristix试剂带，次年有推出尿糖、尿蛋白、和尿pH的三联Combistix试剂带。Multistix试剂带。20世纪70年代，半自动尿液分析仪按测试项目分类8项尿液分析仪尿蛋白、尿糖、尿pH、尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血和尿亚硝酸盐9项尿液分析仪尿白细胞10项尿液分析仪尿比重11项尿液分析仪颜色或维生素C12项尿液分析仪颜色和浊度尿液分析仪原理尿液pH试带法：酸碱指示剂法，测试模块中含有甲基红（pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝（pH6.0~7.6)，两种酸碱指示剂适量配合可反映尿pH5.0~9.0的变异范围。肾功能食物生理活动药物疾病常见影响尿液pH的因素影响因素尿液酸性尿液碱性肾功能肾小球滤过增加，肾小管保碱能力正常肾小球滤过功能正常，肾小管保碱能力丧失食物肉类及混合性食物蔬菜、水果生理活动剧烈运动、大汗、应激、饥饿饭后、消化高潮药物氯化钙、氯化铵、稀盐酸等小苏打、碳酸钾、碳酸镁、枸橼酸钠、酵母制剂等疾病酸中毒、肾炎、糖尿病、饥饿状态、尿路尿酸盐或胱氨酸结石碱中毒、膀胱炎、肾盂肾炎、胃扩张、草酸盐磷酸盐或碳酸盐结石其他尿内含酸性磷酸盐尿内混入多量血、脓，细菌污染，分解尿素等尿比重（比密）称重法、浮标法、折射计法试带法多聚电解质（甲乙烯稀酸酰马来酐）含有随尿标本中离子浓度而解离的酸性基团，离子浓度越多，酸性基团（氢离子浓度）解离越多，而使模块中的pH改变，这种改变可由模块中的酸碱指示剂变化显现出来pH6.2~7.0比密的变化范围在1.000~1.030蛋白质浓度增加使比密结果增加尿胆红素试带法在强酸的介质中直接胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应生成红色的复和物。尿胆原试带法：在强酸性条件下，尿胆原与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应，生成樱红色缩合物，模块发生从黄色到红色的颜色变化。在强酸条件下尿胆原和对-甲氧基重氮四氟化硼发生重氮盐偶联反应，生成胭脂红色化合物。尿液pH胆红素的形成量肝细胞功能胆道梗阻尿液胆红素尿胆原正常阴性少量肝前性黄疸阴性显著增加肝原性黄疸阳性轻度增加肝后性黄疸阳性减少或无葡萄糖glucose[referenceinterval]定性：阴性定量：2.78mmol/L尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素：动脉血液中葡萄糖浓度每分钟流经肾小球的血浆量近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能力摄食性糖尿、神经、精神性糖尿糖尿葡萄糖尿非葡萄糖尿生理性糖尿病理性糖尿妊娠期糖尿真性糖尿病胰岛外性糖尿肾性糖尿胰岛外性高血糖性糖尿半乳糖尿果糖尿戊糖尿其他糖尿尿糖定性试验1.班氏法（Benedict法）含有醛基的葡萄糖，在高热及碱性溶液中能将蓝色的硫酸铜还原为黄色的氢氧化亚铜及红色氧化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀物。加班氏试剂1ml加热取尿液0.1ml加入上述试剂中再加热冷却判断结果尿糖定性结果判断:实验结果结果判断相当含量（g/L）仍呈蓝色-蓝绿色，无沉淀±＜0.1绿色，有少量+0.1~0.5绿黄色沉淀黄绿色，有较多++0.5~1.0沉淀土黄色，有大量+++1.0~2.0沉淀砖红色沉淀，上++++＞2.0清液无色2.试带法：试带模块中主要含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色源及其他物质。葡萄糖氧化酶（glucoseoxidase,GOD）作用于尿液中葡萄糖，使其形成葡萄糖醛酸和过氧化氢（H2O2），后者在过氧化氢酶（POD）的催化释放出[O]，后者使色源呈现不同的颜色变化。蛋白质protein[referenceinterval]定性：阴性定量：0.1g/L尿蛋白血浆蛋白组织蛋白肾小球性肾小管性混合性溢出性组织性泌尿系统、泌尿外系统肾病综合征、肾病性蛋白尿原发、继发肾小球疾病肾小管间质病变、中毒性肾病浆细胞病、血管内溶血、肌肉损伤肾脏疾病、炎症、中毒、泌尿道结石泌尿道、生殖道炎症、出血、排泌物污染尿蛋白定性1.磺柳酸法:在酸性条件下，磺基水杨酸的阴离子和蛋白氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐沉淀。敏感度0.05~0.1g/LNCCLS将其定为干化学检查蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。加磺硫酸2滴加尿液1ml判断结果实验结果结果判断相当含量（g/L）清晰透明无-0改变黑色背景下，±＜0.1极轻度混浊明显白色混浊，+0.1~0.5但无颗粒明显混浊，++0.5~2.0出现颗粒大量絮状沉淀+++2.0~5.0但无凝块严重混浊，++++＞5.0有大凝块2.加热醋酸法加热煮沸使蛋白变性、凝固，然后加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点，在含有适量无机盐状况下，蛋白质更易于变性沉淀。3.试带法pH指示剂的蛋白误差原理蛋白质具有两性离子的电荷性，在溶液中，能被指示剂相反电荷的静电吸引，而生成蛋白指示剂复合物，引起指示剂的进一步电离，从而使其所显示的pH颜色发生转变，这种色泽变化的差别，与蛋白质的含量成正比。试带法影响因素：尿液pH值尿液所含蛋白成分尿液中的干扰物尿液存放的时间及污染隐血试带法：尿液中的血红蛋白或其破坏释放的游离血红蛋白均含有亚铁血红素，后者具有过氧化物酶样活性，可使过氧化物分解释放出新生态氧[O]，[O]能使无色的邻甲联苯胺变成蓝色。2.试带法：亚硝基铁氰化钠，在碱性条件下可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮起反应，呈现紫色。尿液必须新鲜，及时送检不同病程酮体成分的变化会给检测结果带来差异。尿酮体1.湿化学法：尿亚硝酸盐试带法：当尿液中有大肠埃希氏菌增加时，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，其可将模中的氨基磺胺重氮化而成重氮盐，后者与1，2，3，4-四氢并喹啉-3偶联，使模块产生红色，借以诊断患者是否被肠杆菌科细胞感染。尿路感染的病原微生物种类体内适量硝酸盐的存在尿液标本留取的时间药物的影响菌尿症常见微生物及致病率分类菌名致病率（%）含硝酸盐还原酶大肠杆菌属Klebs氏杆菌属变形杆菌葡萄球菌属假单胞菌属72.016.05.05.01.0不含硝酸盐还原酶粪链球菌属1.0白细胞计数试带法：中性粒细胞胞浆中含有的酯酶作用于模块中吲哚酚酯，使其产生吲哚酚，后者与重氮盐反应形成紫色化合物，其颜色的深浅与细胞的多少呈比例关系。维生素C试带法：VitC在酸性条件下使染料还原，模块颜色发生改变。血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸盐尿液分析试纸项目缩写符号反应原理酸碱度pHpH指示剂蛋白质PROpH指示剂的蛋白质误差法葡萄糖GLU葡萄糖氧化酶法隐血BLD血红蛋白类过氧化物酶法胆红素BIL偶氮反应法尿胆原URO醛反应法、重氮反应法酮体KET硝基铁氰化钠法亚硝酸NIT亚硝酸盐还原法白细胞LEU酯酶法比密d（SG）多聚电解质离子解离法抗坏血酸ASG还原法中华医学会提出尿液干化学分析仪筛检的标准：当干化学尿液试带质量合格、尿液分析仪运转正常情况下，试验结果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐全部为阴性时，可以免去显微镜检查。干化学过筛适用范围的局限性肾科和泌尿科病人的尿液不适合于干化学过筛显微镜检查。以镜检结果作为诊断依据或疗效观察时，不宜使用干化学方法作为过筛。要结合临床表现判断结果。不可只看干化学分析，忽视镜检。尿液的外观与尿沉渣有一定的相关性。当尿液外观异常时，应注意显微镜检查。干化学试剂带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确性密切相关。组合型试带肾病型四联试带：pH、蛋白、隐血、比密糖尿病型五联试带：pH、蛋白、葡萄糖、酮体、比密肝脏病型二联试带：胆红素、尿胆原结果分析：干化学（+）镜检（-）干化学（-）镜检（+）WBC细胞破坏以淋巴细胞为主RBC为Hb、Mb尿，含热不稳定酶、菌尿大量VitC，试带失效NIT标本放置时间过久或被污染尿路感染的病原微生物种类、无硝酸盐的存在、尿液标本留取的时间、药物（二）尿标本制备prepareofurinespecimen：1.离心centrifugation离心10ml尿（离心管）水平离心机有效半径为15cm，相对离心力为378G1500转5分钟弃上清液，取剩余约0.2ml混匀吸取混匀液0.02ml于载玻片上盖片（18*18mm或22*22mm），防止产生气泡低倍镜下：全片观察，计数管型（20个视野）高倍镜下：细胞计数、复查管型、结晶（10个视野）2.不离心notcentrifugate3.染色stain二．尿细胞成分检查及临床意义urinarycellelementexaminationandclinicsignificance（一）红细胞redcell参考值referenceinterval：混匀一滴尿0~偶见/高倍视野离心尿0~3个/高倍视野1.量quantity肉眼血尿：如果每100ml尿液中含有0.1ml以上的血液时，肉眼能看到不同程度的浑浊红色，称为肉眼血尿。Visualhematuria:Excretionofurinecontainingblood,whichcanbedemonstratedbyeyes.UsuallyRBCsaremorethan50/HPFbythemicroscope.显微镜血尿microscopichematuria：100ml尿液中含有0.1ml以下的血液，肉眼看不见，只有通过显微镜才能发现，称显微镜血尿。Microscopichematuria:Excretionofurinecontainingblood,whichcanbedemonstratedonlybythemicroscopeandusuallyequalormorethan3/HPF.2.形态form（质quality）新鲜尿中红细胞形态对鉴别肾小球源性和非肾小球源性血尿有重要价值。异形红细胞30%肯定诊断为肾小球性；15%～30%初步诊断；15%肯定诊断为非肾小球性。红细胞（非肾小球源性）红细胞（S染色：非肾小球源性）瘤状、环状、岛状红细胞（未染色）用相差显微镜观察计数红细胞，参照Brich和李惊子判断标准将红细胞结果分为三型：（1）均一型（均一红细胞血尿homogeneouserythrocytehematuria）（2）多形型（变形红细胞血尿metamorphoticerythrocytehematuria）（3）混合型（混合性血尿mixedhematuria）诊断diagnosis：肾小球源性血尿多为变形红细胞血尿，或以其为主的混合性血尿。3.鉴别identification：名称形态折光性大小排列加蒸馏水化学试验红细胞淡黄色双弱一致无规律破坏隐血（+）redcell凹圆盘状脂肪滴无色正圆形强不一致不一致不破坏苏丹III染色fatdrop草酸盐无色圆形强不一致无规律不破坏10%盐酸可oxalatesalt椭圆形溶解酵母菌无色椭圆形强不一致有规律不破坏隐血（-）yeast淀粉颗粒无色类圆弱不一致无规