补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN编码区补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区编码区补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游启动子补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点启动子补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点启动子终止子补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点启动子终止子编码区非编码区补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点启动子终止子编码区非编码区编码蛋白质,连续不间断补:原核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点启动子终止子编码区非编码区编码蛋白质,连续不间断不编码蛋白质,有调控作用补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序非编码区非编码区IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区非编码区IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区非编码区编码区上游与RNA聚合酶结合位点IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区非编码区启动子编码区上游与RNA聚合酶结合位点IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区非编码区启动子终止子编码区上游编码区下游与RNA聚合酶结合位点IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区非编码区启动子终止子编码区上游编码区下游外显子与RNA聚合酶结合位点IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区非编码区启动子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区编码区非编码区非编码区启动子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区外显子:能编码蛋白质的序列内含子:不能编码蛋白质的序列编码区非编码区非编码区启动子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN补:真核细胞的基因结构1.2基因工程的基本操作程序编码区非编码区外显子:能编码蛋白质的序列内含子:不能编码蛋白质的序列不编码蛋白质,有调控作用编码区非编码区非编码区启动子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN1.2基因工程的基本操作程序一目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序IMN一目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序IMN(一)目的基因:一目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序IMN(一)目的基因:主要指的是编码蛋白质的结构基因;一目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序IMN(一)目的基因:主要指的是编码蛋白质的结构基因;也可以是一些具有调控作用的因子。一目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序IMN(一)目的基因:主要指的是编码蛋白质的结构基因;也可以是一些具有调控作用的因子。(二)获取目的基因的常用方法一目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序IMN(一)目的基因:主要指的是编码蛋白质的结构基因;也可以是一些具有调控作用的因子。(二)获取目的基因的常用方法从自然界已有的物种中分离用人工的方法合成一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)基因文库的概念一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)基因文库的概念一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)基因文库的概念将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)基因文库的概念将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。(2)基因组文库和部分基因文库一目的基因的获取IMN一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(2)基因组文库和部分基因文库包含了一种生物所有的基因的基因文库叫做基因组文库。一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(2)基因组文库和部分基因文库包含了一种生物所有的基因的基因文库叫做基因组文库。包含了一种生物的一部分基因的基因文库叫做部分基因文库。IMN(3)基因文库的构建IMN(3)基因文库的构建①直接分离法IMN(3)基因文库的构建①直接分离法IMN(3)基因文库的构建①直接分离法基因组文库的构建IMN(3)基因文库的构建②反转录法:IMN(3)基因文库的构建②反转录法:IMN(3)基因文库的构建②反转录法:mRNAcDNA(互补DNA)双链DNA反转录DNA聚合酶IMN(3)基因文库的构建②反转录法:mRNAcDNA(互补DNA)双链DNAcDNA文库的构建反转录DNA聚合酶IMN基因组DNA文库与cDNA文库的比较一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(2)如何从基因文库中得到所需要的基因一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(2)如何从基因文库中得到所需要的基因依据:目的基因的有关信息。一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(2)如何从基因文库中得到所需要的基因依据:目的基因的有关信息。如:根据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特性。一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因2.利用PCR技术扩增目的基因一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目的基因一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应是一项生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术,可在短时间内获取大量的目的基因。2.利用PCR技术扩增目的基因一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目的基因(2)原理:一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目的基因(2)原理:DNA双链复制一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目的基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目的基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:一段已知目的基因的核苷酸序列一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目的基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:一段已知目的基因的核苷酸序列(4)条件:一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因(1)PCR——聚合酶链式反应模板DNA;DNA引物(做启动子);四种脱氧核苷酸;DNA聚合酶等。2.利用PCR技术扩增目的基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:一段已知目的基因的核苷酸序列(4)条件:IMN利用PCR技术扩增IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲变性IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲变性退火IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲变性退火延伸IMN(6)方式:以_____方式扩增,即_____(n为扩增循环的次数)IMN(6)方式:以_____方式扩增,即_____(n为扩增循环的次数)指数IMN(6)方式:以_____方式扩增,即_____(n为扩增循环的次数)指数2nIMN(6)方式:PCR扩增仪以_____方式扩增,即_____(n为扩增循环的次数)指数2n一目的基因的获取IMN1.从基因文库中获取目的基因2.利用PCR技术扩增目的基因3.通过DNA合成仪用化学的方法直接人工合成Thanks!