EB临床应用

EB病毒抗体检测在鼻咽癌辅助诊断中的应用中山生物工程有限公司2009年12月29日路亮EB病毒及相关抗原1EB病毒感染的血清学特征23456EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标在临床中的应用及取得的成绩鼻咽癌与EB病毒的关系鼻咽癌的血清学诊断Epstein-Barr病毒结构EB病毒及相关抗原潜伏性感染(LatentInfection)分I型、II型、III型潜伏性感染，都表达EBNA1。溶解性感染(LyticInfection)在EBV潜伏感染的淋巴细胞中有小部分出现溶解性感染，溶解性感染出现三个时相（Phase）：表达zta、EBNA1等立即早期表达EA、EBNA1等早期表达VCA、EBNA1等晚期EB病毒感染的两种形式EB病毒及相关抗原EB病毒相关抗原中文名称英文简称特性核抗原EBNA1*病毒复制蛋白，癌基因立即早期抗原Zta*病毒开始复制的产物早期抗原EA病毒复制的早期产物衣壳抗原VCA*病毒复制的晚期产物EB病毒及相关抗原EB病毒感染后抗体滴度变化抗体水平发病时间（月）EB病毒感染的血清学特征EB病毒感染的血清学特征感染状态VCAIgMNA1IgGZtaIgGVCAIgGNA1IgAZtaIgAVCAIgA原发感染阳性阴性低低阴性低低再次感染，上皮阴性高高高高高高再次感染，淋巴阴性高高高低低低EB病毒感染的血清学特征AB（60-70%）C15%普通型腺癌鼻咽癌(NPC)组织学分类涎腺型腺癌腺鳞癌黏液表皮样癌非角化性癌（100%）角化性鳞状细胞癌鳞状细胞癌（90%以上）鼻咽癌与EB病毒的关系肿瘤性干细胞具有向腺性分化能力的鼻咽癌肿瘤性干细胞既具有向鳞状又具有向腺性分化能力的鼻咽癌肿瘤性干细胞具有鳞状分化能力的鼻咽癌鼻咽癌与EB病毒的关系NPC病人的细胞中存在着EB病毒Vera-SempereFJ等采用巢式PCR和免疫组化分析证明，鼻咽癌（WHOI、WHOII、WHOIII）中均有EB病毒感染。1996年,鼻咽癌患者血清中抗EBNA的水平反映肿瘤的大小。国内也从鼻咽癌组织培养所建立的类淋巴母细胞株中发现EB病毒，并在电镜下找到了典型的疱疹病毒颗粒。1969年De-the从鼻咽癌活检培养的类淋巴母细胞中分离出EB病毒。鼻咽癌与EB病毒的关系NPC病人血清中的EBV抗体水平普遍升高数据来源于ChinJCancer,2003,22(9):903-906OD值鼻咽癌的血清学检测鼻咽癌血清学检测中各指标的特点NA1IgG,ZtaIgG阳性率偏高，不是上皮感染的特异性指标。IgG类VCAIgAEAIgAZtaIgANA1IgA灵敏度较高，但特异性低。只在急性期短暂出现。可作为预后监测的指标，有待进一步实验验证。鼻咽癌辅助诊断的首选指标。ELISA间接法示意图微孔板底物抗原抗体酶标抗抗体EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标参数NA1IgAZtaIgAVCAIgA样本稀释倍数1：201：201：20样稀是否变色是是是酶标记物工作浓度工作浓度工作浓度温育总时间75分钟75分钟75分钟Cut-off值阳性对照20%阳性对照20%阳性对照20%EB病毒系列抗体诊断试剂盒工艺参数EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标NA1-IgA30min091103检（备注：20091026Ag板，1:2万E）00.10.20.30.40.50.60.70.80.911.100.10.20.30.40.50.60.70.80.911.11.21.31.41.51.61.71.81.922.12.22.32.42.52.62.72.82.93NormalNPCOD值NA1IgA性能曲线*100%EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标ZTA-IgA30min090907检测（备注：20090415Ag板，1：1.4万E）0%10%20%30%40%50%60%70%80%90%100%110%0.00.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.31.41.51.61.71.81.92.02.12.22.32.42.52.62.72.82.93ODNormalNPCOD值ZtaIgA性能曲线EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标温育总时间灵敏度特异性NA1IgA75分钟93%94%ZtaIgA75分钟85%87%VCAIgA75分钟84%85%EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标n=886EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标VCAIgA厂家比较中山生物国内厂家1国内厂家2国内厂家3国外厂家灵敏度84%48%52%50%89%特异性85%82%81%80%88%n=886EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标参数VCAIgA（中山）NA1IgA（中山）CAIgA（国外）样本稀释倍数1：201：201：100样稀是否变色是是否温育总时间75分钟75分钟75分钟温育条件37C37C18-24C结果判定rCut-offrCut-offrOD值灵敏度和特异性85%90%88%EB病毒系列抗体诊断试剂盒工艺参数EB病毒系列抗体诊断试剂盒性能指标•单独使用EBNA1IgA，灵敏度和特异性均能达到93%以上。•EBNA1IgA和VCAIgA二者联合检测，可使灵敏度和特异性达到96%以上。•EBNA1IgA，ZtaIgA和VCAIgA三者联合检测，将有望对鼻咽癌的潜伏、发生、复制以及恶化进行监测，从而为鼻咽癌的早期诊断及预后提供临床数据，对鼻咽癌的诊断和治疗起指导性作用。鼻咽癌的辅助诊断在临床中的应用及取得的成绩•首次EB病毒血清学筛查1373人；•高危0.80%中危2.06%低危96.94%Table1人群一般资料中危高危低危____________________________________________总人数男/女平均年龄高危中危低危____________________________________________13731.0944.2411311331____________________________________________在临床中的应用及取得的成绩健康人群鼻咽癌风险评估摘自季明芳2009鼻咽癌会议高危人群检出率110.80例数检出率%327272.73鼻咽癌检出率高危人群鼻咽癌检出率/10万高危人群和鼻咽癌检出率摘自季明芳2009鼻咽癌会议在临床中的应用及取得的成绩谢谢！