血凝四项

2013|携手发展GrowingTogether1止凝血产品线移转沃芬中国08May2012血凝常规项目介绍段鹏2013.5GrowingTogether2013|携手发展2013|携手发展GrowingTogether血凝项目•血栓/止血检验用于诊断的试验大致分为两部分：•筛选试验和确诊试验（或者也可以分为常规试验和特殊试验）•筛选试验一般有：PT,APTT,Fib,TT,其它为特殊试验。2013|携手发展GrowingTogether抗凝标本•抗凝剂：–0.109mol/L（3.2%）枸橼酸钠国际血液学标准化委员会推荐，因为V因子和Ⅷ因子在此抗凝剂中更为稳定。另外，用枸橼酸钠抗凝的血浆做APTT试验，其对肝素敏感性远远高于草酸盐抗凝血浆。•抗凝剂:全血=1:9一定要准确，抗凝剂在血标本中的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度，而影响实验结果。•收集管：最好使用真空法商业采集管，不推荐使用注射器2013|携手发展GrowingTogetherACLTOP检测菜单GeneralScreeningPTAPTTFib-CThrombinTimeISICalibrateINRValidateD-DimerD-DimerHS500D-DimerHSD-DimerFDPThrombophiliaAntithrombinProteinCProClotFreeProteinSProSAPC-RVHomocysteineFactorsIntrinsicFactorsExtriniscFactorsFXIIIAntigenVWDVWF:AgVWFActivityVWF:RCoHeparinHeparin(Xa–2stage)Heparin(Xa–1stage)HITHITAb(PF4-H)LupusAnticoagulantsDRVVTScreen/ConfirmSCTScreen/ConfirmLAControlsFibrinolysisPlasminogenPlasminInhibitorGlobalTestsThromboPath2013|携手发展GrowingTogether凝血55激活XIIXIIaXIXIaIXIXaPF3VIIIaCa++内源性途径VII-TFVIIa-TF外源性途径共同途径IIIIaXXaPF3VaCa++VIIIV纤维蛋白原纤维蛋白Ca++Ca++2013|携手发展GrowingTogether凝血因子的主要类型因子I：纤维蛋白原因子II：凝血酶原因子III：组织因子因子IV：钙因子(Ca2+)因子V：促凝血球蛋白原，易变因子（因子VI事实上是活化的第五因子，已经取消因子VI的命名。）因子VII：转变加速因子前体，促凝血酶原激酶原，辅助促凝血酶原激酶因子VIII：抗血友病球蛋白A(AHGA)，抗血友病因子A（AHFA)，血小板辅助因子I，血友病因子VIII或A,因子IX：抗血友病球蛋白B(AHGB)，抗血友病因子B(AHFB)，血友病因子IX或B因子X：STUART(-PROWER)-F，自体凝血酶原C因子XI：ROSENTHAL因子，抗血友病球蛋白C因子XII：HAGEMAN因子，表面因子因子XIII：血纤维稳定因子62013|携手发展GrowingTogether血液凝固内源性凝血途径intrinsicpathway参与因子：VIII,IX，XI，XII，PK(激肽释放酶原),HMWK（高分子量激肽原）参与凝血的因子全部来自血液，通常因血液与带负电荷的异物（玻璃、白陶土、硫酸酯、血管壁的胶原蛋白等）表面接触而启动，启动因子为FXII。正常新鲜血浆中：I，VIII,IX，XI，XII正常新鲜血清中：IX，XI，XII2013|携手发展GrowingTogether血液凝固外源性凝血途径extrinsicpathway参与因子：IIIVII来自于血液之外的组织因子（TF）暴露于血液而启动的凝血过程，启动因子为FIII。开始于外伤或组织损伤，包括手术。2013|携手发展GrowingTogether血液凝固共同途径commonpathway指从X激活纤维蛋白形成参与因子：I.II.V.X.XIII2013|携手发展GrowingTogetherPT凝血酶原时间检测原理：向患者血浆中加入凝血酶原时间试剂，钙离子存在情况下，可以激活外源性凝血途径。最终使纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成固体凝胶,PT检测实验可以定义为外源性凝血系统的筛选实验。102013|携手发展GrowingTogetherPT的检测原理inBloodinPlasmaPT试剂FibrinIIIExtrinsicSystem测量凝血时间without组织因子Calcium(Ca2+)withoutIX37癈Ca2+,PLCa2+,PLXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIVIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIVIIIIIXVIIIBloodSamplingTrisodiumCitrate2013|携手发展GrowingTogether12XIIXIIaXIXIaIXIXaFP3VIIIaCa++VII-TFVIIa-TFFibrinogenFibrinIIIIaPTXXaFP3VaCa++PT对因子II,V,VII,X和低纤维蛋白原敏感促凝血酶原激酶Ca++2013|携手发展GrowingTogetherPT的结果表示：凝固时间（sec）–用于术前筛查和因子缺乏的筛查凝血酶原时间比值（PTR）–较少使用活动度（%）–肝脏功能评价的较好指标国际标准化比率（INR）–口服抗凝剂监测（internationalnormalizedratio），即用国际参照凝血活酶标定所用凝血活酶的ISI值，用标好ISI的试剂测待测标本与参比血浆的PT（S），其结果用INR表达，从而建立了PT结果的室间可比性。INR:国际标准化比值ISI:国际敏感度指数INR=（患者PT/正常参考PT时间）ISI132013|携手发展GrowingTogetherINRISIMNPT–INR值是PT比率的国际敏感指数（ISI）次方。它代表的是，当存在有国际参考值时的PT比率。–每一个批号的PT试剂都有其特定的ISI值，在不同仪器上其值也可能不同。因此，ISI值对试剂和仪器来说都是特异的。美国临床病理学会（ACCP）建议选择ISI值低于1.7的PT试剂。–正常参比血浆PT值（MNPT）是测定20个健康成年人新鲜血浆的PT，然后取其平均值2013|携手发展GrowingTogetherMNPT•正常对照血浆–要求采集20份以上–年龄在18岁～55岁之间的健康男女个体，删除服药者。–须在平静状态下采血–血液经抗凝离心后，分离血浆等量混匀，分装小瓶，冻存于-80℃备用或冷冻干燥。2013|携手发展GrowingTogetherPT检测的临床意义•PT缩短：–常见于高凝状态（比如DIC早期）–先天性凝血因子Ⅴ增多–口服避孕药–血栓性疾病等2013|携手发展GrowingTogetherPT检测的临床意义•PT延长：–先天性Ⅶ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ和Fg缺乏症–获得性缺乏，•肝病，维生素K缺乏症•口服抗凝剂华法令等药物和肝素治疗时•血循环中有抗凝物质–肝素、抗Ⅶ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ的抗体–DIC时，由于凝血因子的大量的消耗和产生的FDP拮抗凝血酶的作用可使PT延长。2013|携手发展GrowingTogetherPT的临床应用18•手术前的筛选试验•凝血因子缺乏的筛选–先天性缺乏–获得性缺乏•新生儿出血性疾病•肠道重吸收障碍•肝病（肝硬化，肝炎，黄疸）•弥散性血管内溶血（DIC）•口服抗凝剂治疗的监测2013|携手发展GrowingTogetherHemosILPT:PTReagentPT-RecombiPlasTin2GPT-HSPlusPT-Fibrinogen批号和规格00020002950;5+5x8mL00020003050;5+5x20mL00084698105+5x8mL000975671010x8mLISI值1.01.21.8组织表达因子HumanRecombinantRabbitBrainThromboplastinextractRabbitBrainThromboplastinextractRecon.Stability@2-8C10days5days5days肝素敏感性Upto1.0IU/mLUpto0.5IU/mLUpto1.0IU/mLVII因子敏感性++++++PT-BasedFibrinogenYYY2013|携手发展GrowingTogether基因重组试剂的优势合成技术重组试剂动物提取试剂高度纯化的磷脂成分提取前对动物中的有效成分含量不清楚重组的组织因子提取兔或牛的脑组织脂质和蛋白的成分比例明确混合异源的磷脂及蛋白质无季节变化的差异提取物的有效成分受季节变化影响溶解后溶液不混浊溶解后溶液混浊试剂稳定性显著提高组织因子含量可变性大可复制202013|携手发展GrowingTogetherAPTT活化部分凝血活酶时间检测原理：血浆样本与适量磷脂共同孵育，带有负电荷的接触激活剂与缓冲液共同作用启动内源性凝血途径。37℃下孵育一定时间后，加入钙以触发凝血过程，测定血液凝固所需要的时间。APTT检测实验可以定义为内源性凝血系统的筛选实验。212013|携手发展GrowingTogetherAPTT的检测原理inBloodinPlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIAPTTReagentActivatorPLIntrinsicSystemMeasureClottingTimeEllagicacid,silicaetc.Calcium(Ca2+)CaCl2IVPhospholipidFibrin37癈XIIIXXIVIIIXVIIICa2+,PLCa2+,PLBloodSamplingTrisodiumCitrate2013|携手发展GrowingTogether23XIIXIIaXIXIaIXIXaFP3VIIIaCa++VII-TFVIIa-TFFibrinogenFibrinIIIIaXXaFP3VaCa++APTT激活物+磷脂CaCl2APTT对因子XII,XI,IX,VIII,X,II,V和低纤维蛋白原敏感2013|携手发展GrowingTogetherAPTT检测的临床意义•APTT延长：–Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ缺乏症•如血友病A、B，•Ⅷ减少还见于部分血管性血友病患者（vWF保护VIII的活性）–严重的Ⅹ、Ⅴ、凝血酶原、纤维蛋白原缺乏症•如肝脏疾病，阻塞性黄疸，新生儿出血症,肠道细菌综合症，吸收不良综合症，口服抗凝剂等。–纤溶亢进，PL水解Fb(g)及其它蛋白质如V、VIII、XIII因子等。–血中有抗凝物质•如抗Ⅷ、Ⅸ抗体等•狼疮抗凝物2013|携手发展GrowingTogetherAPTT检测的临床意义•APTT缩短:–高凝状态•如DIC的高凝期。–血栓性疾病•如心肌梗死，不稳定心绞痛，脑血管病变，糖尿病伴血管病变，肺梗塞，深静脉血栓形成，妊娠高血压综合症，肾病综合症等。–血小板增多症等。2013|携手发展GrowingTogetherAPTT的临床应用•手术前的筛选试验•凝血因子缺乏的筛选–先天性缺乏•凝血因子VIII缺乏-血友病A•凝血因子IX缺乏-血友病B•凝血因子XI或XII缺乏•VWD（低VIII因子）–获得性缺乏•肝病，DIC，...•狼疮抗凝物（LA）检测•肝素抗凝治疗监测262013|携手发展GrowingTogetherHemosILAPTT:APTTReagentAPTT-SPSynthASilSynthAFaxPartNumberandSize0020006300APTTreag.5x9mL0.025MCaCl2