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标准准葡萄糖DNS比色法测定的方法采用3，5-二硝基水杨酸比色法测定水解液中还原糖含量，用752型分光光度计进行比色测定。1葡萄糖DNS比色法的测定原理3,5－二硝基水杨酸与还原糖共热后被的还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖的含量。2测试药品（1）1mg/mL葡萄糖标准液准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂3测试方法（1）葡萄糖标准曲线制作①按下表制备9个试管。②向9支试管中分别加入DNS试剂0.5ml，充分混合。③将9支试管放入沸水浴中加热煮沸5min。④将试管放入盛有冷水的烧杯中冷却。⑤向各管中分别加入4mL蒸馏水，充分混合。⑥以空白（1＃）管做对照，用分光光度计于540nm波长下分别测定各管溶液的OD值。⑦以每管在540nm下的吸光值为纵坐标，每管所含的葡萄糖浓度为横坐标作图，即可得到一条通过零点的直线。如果直线不通过零点则需重做。标准葡萄糖曲线浓度的量取Tab.2.2Preparationonstandardcurveofglucose试管编号标准葡萄糖溶液(mL)蒸馏水(mL)最终浓度(mg/mL)100.5020.050.450.130.10.40.240.150.350.350.20.30.460.250.250.570.30.20.680.350.150.790.40.10.8（2）测定步骤①样品稀释。②取2支试管，其中一支做对照，向样品试管中加入稀释后的样品溶液0.5mL，空白不加。③向两支试管中分别加入DNS试剂0.5ml，于沸水浴中加热5min，然后冷却。④完全冷却后向空白试管中加入蒸馏水4.5ml，样品试管中加入蒸馏水4ml。⑤以空白为对照，测定溶液在540nm下的OD值。（3）计算%1009.0%纤维素和半纤维素质量液体体积稀释倍数还原糖浓度）还原糖得率（（4）葡萄糖标准曲线图葡萄糖标准曲线FigStandardcurveofglucose葡萄糖浓度与OD值之间的相关关系可表示为式回归方程：y=2.1511x-0.0896相关系数：R2=0.9921y=2.1511x-0.0896R2=0.992100.20.40.60.811.21.41.61.800.20.40.60.81还原糖浓度%OD值