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α-，，（，750021）：、α-，3、，α-10（4、3、3），，1.9~2.6，，α-4.8~5.7g/mL。，，，α-9.6~13.0g/mL，69.9%~129.5%。：；；；；：TQ925.1：A：1672-5190（2010）09-0001-03SeparationandMutagenesisofAlpha-amylaseProducingBacillusLIUYa-qin,CHENHai-kui,KONGLing-quan（SchoolofBiologicalScienceandEngineering,NorthernUniversityforNationalities,Yinchuan750021,China）Abstract：Tenalpha-amylaseproducingBacillusstrainswereisolatedfromsoil(fourstrains),water(threestrains)andflour(threestrains)throughisolationwithstarchplates,Gram′sstainingandsporestaining.Theratioofhydrolysiszonediametertocolonydiameterwas1.9-2.6.Liquidculturemediumwasusedforfermentationtoproduceamylase.Theactivityofalpha-amylasewasdeterminedbycolorimetry,anditwas4.8-5.7g/mLinfermentationbroth.Theoriginalstrainsproducinghigh-activityalpha-amylasewasselectedandmutatedbyUVmutagenesis.Excellentstrainswereobtained,andtheiractivityofalpha-amylasewasupto9.6-13.0g/mLundersuitableconditions,whichwas69.9%-129.5%higherthanthatbeforeselection.Keywords：amylaseproduction;Bacillus;separation;selection;mutagenesisα-1，4-α-D-，，、，。α-、、、、［1］。，，α-，α-。α-，，［2］。，（pH2.0）α-，。，α-、、［3-5］。，，。，。α-、［6］。，，。，α-。α-，a-［7-9］。，、、，（、、）α-，α-，。11.1［10-11］：5.0g、2.0g、10.0g、5.0g、20.2g，1000mL，pH7.2~7.4，0.1MPa30min。：40g、80g、（NH4）2SO44g、Na2HPO48g、CaCl22g，1000mL，250mL50mL，0.1MPa30min。、、，。1.21.2.1：，（HC）。1.2.2α-［12］：。：1mL60℃，pH6.0，1h1。1.2.3［13］：，，，，600nmOD600，OD600。1.31.3.1α-：31g，，80℃20min，。，37℃24~48h；、、、。、，。，，，，。，37℃：2010－08－28：（2008sy011）。：（1965—），，，。AnimalHusbandryandFeedScience2010，31（9）:1-324h，4℃。1.3.2α-1.3.2.1———：，，，37℃24h。cfu（）5~6，，（HC），。1.3.2.2———α-：HC，（108/mL），10%，180r/min、37℃60h，α-，。1.3.3α-1.3.3.1：，，106/mL，5mL7cm，，，15W30cm30，60，90，120，150，180s，，，，37℃24h，，，。1.3.3.2：，HCα-。1.3.3.3：cfu（）5~6，，（HC）。HC，HC，（108/mL），10%，180r/min、37℃60h，α-。α-，α-，。22.1α-3，，，。，（1）。3：①：，，，，，，，，。②：。：，，。①312③：、，。2.2α-、3，64，，47，10，，4（Ty1~Ty4）、3（My1~My3）3（Sy1~Sy3）。10（HC）1。6，α-，2。2.3，α-，（2）。2，，。，，，，，，，，，。2，180s93%，，，，，，，。，，120s（84%）。2.4Sy1，10，3。6，α-，4。Sy1i，12.97g/mL，129.5%，，α-。3、3α-，，。9.6~13.0g/mL，，69.9%~129.5%。：［1］［2］［3］［4］［5］［6］［7］［8］［9］［10］［11］［12］［13］306090120150180100806040200（%）（s）2，，，.α-［J］.，2005（8）：14-17.VANDERMAARELMJ，VANDERVEENB，UITDEHAAGJC，etal.Propertiesandapplicationsofstarch-converingenzymesofthealpha-amylasefamily［J］.JBiotechnol，2002，94（2）：137-155.，.α-［J］.，2008，14（2）：235-239．，，，.α-［J］.，2010，38（20）：10509-10511.，，，.1α-［J］.，2010，38（4）：1709-1711.，.［J］.，2007，3（3）：51-52．．α-［D］.：，2007．，，，．［J］.，2002，26（2）：3-5．，，.［J］.，2009，37（12）：5362-5363，5371.，，，．（Brevibacillusbrevis）XDH［J］.：，2006，37（2）：190-195．.α-［J］.，2009，37（12）：5372-5374.．［D］.：，2006．．α-［J］.，2003，22（4）：76-79．□310Sy1a1.40.43.50Sy1b1.70.62.83Sy1c1.50.53.00Sy1d1.30.43.25Sy1e1.80.72.57Sy1f1.70.62.83Sy1g1.40.52.80Sy1h1.60.53.20Sy1i1.70.62.83Sy1j1.80.72.57cm8′33″075.65Sy1a4′48″2110.00Sy1c4′59″869.60Sy1d4′11″9611.43Sy1f3′53″8812.31Sy1h4′01″2312.00Sy1i3′43″1612.9746g/mLTy11.80.72.57Ty21.90.92.11Ty31.90.82.38Ty42.21.02.20My12.20.92.44My22.30.92.56My32.11.02.10Sy12.31.12.09Sy22.51.22.08Sy32.51.31.92110cm26Ty18′53″675.39Ty39′37″215.0My18′58″985.33My28′41″835.52Sy18′33″075.65Sy29′58″664.80g/mL：α-93