生物选修专题

生物选修专题第1页，共3页生物选修专题1.（1）果胶酶是由黑曲霉经发酵精制而成，外观呈浅黄色粉末状。果胶酶将果胶分解成________，用于果蔬汁饮料及果酒的榨汁及澄清。在分离果胶酶高产菌株时，将富集培养的菌液接种到以果胶为唯一碳源的（从功能上看）培养基培养，观察并测量________________。实验过程中发现空白对照组平板上出现6个菌落，可能的原因是________________（答出两点）。（2）生产中使用的果胶酶由优良的曲霉菌株经液体深层发酵和现代生物提取技术而制备的高活力果胶酶制剂，果胶酶的活性可以用在一定条件下，________________来表示。生产中如果要固定果胶酶，最好采用____________固定化。在畜牧业中，复合酶制剂作为饲料添加剂，可以提高营养级之间的能量__________。2.富集培养主要是指利用不同微生物生命活动特点的不同,限定环境条件,使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其在群落中的数量大大增加,人们能够更容易地从自然界离到所需的特定微生物。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物—对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。注：⑥在没有该底物的培养基中不能生长。⑦在含有该底物的培养基中表现为生长。请分析回答：(1)本实验所需培养基的碳源为____________，该碳源进入细菌细胞内的主要作用______________________(答出两点即可)。(2)培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有__________(答出两点即可)。(3)①→③重复培养的目的是_________________________________。(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明样品中有多种分解对羟基苯甲酸的细菌，依据是______________________。⑥为___________组，设置的目的是说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物。(5)若要测定⑦培养液中的菌体数，可在显微镜下，用_______直接计数；若要测定其活菌数量,可选用___________法进行计数。(6)若要固定化分解对羟基苯甲酸的细菌，一般采用___________的方法，若要分离纯化分解对羟基苯甲酸酶,根据分子量大小采用___________方法，也可以根据___________和___________等因素采用电泳方法分离纯化分解对羟基苯甲酸酶。3.目前，β一胡萝卜素既可以从岩藻中提取，又可以利用微生物的发酵生产。请回答以下问题。(1)从岩藻中提取β一胡萝卜素常用___________法，在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是___________，提取的β一胡萝卜素粗品可通过___________进行鉴定。(2)利用红酵母菌发酵生产β一胡萝卜素时，首先要对操作仪器进行无菌处理，其中对培养皿进行______灭菌。培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右才能倒平板，估计培养基温度的方法是。(3)微生物接种常采用___________法进行微生物的分离和计数，这种操作的核心是___________。通过观察菌落的___________、大小、颜色隆起程度等特征对微生物进行鉴定。4.自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离筛选出这种酵母菌。请回答：（1）获得纯净培养物的关键是。实验室筛选微生物的原理是。制备的酵母菌培养基在进行倒平板操作时，为防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染，生物选修专题第2页，共3页应。（2）用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，取其液体用涂布器涂布接种于以_____为唯一碳源的固体培养基上培养获得酵母菌菌落，用平板划线法纯化菌株时，划线的某个平板培养后，第一划线区域的第一条线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他线上有菌落，造成这种现象的原因可能是。（3）若要统计土样中的酵母菌数量，应采用_____法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基培养一段时间，这样做的目的是。5.大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。(1)利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的________到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是______________蛋白质。(2)通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。①伊红-美蓝培养基属于_____(填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨的作用有(答出两点即可）。②培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是。③用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应_______(填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是。6.某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐等配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。请分析回答下列问题：(1)该培养基只允许分解化合物A的细菌生长，这种培养基称为________培养基。该培养基在接种前应该用_________法灭菌。(2)对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，常采用的接种方法是__________，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是。(3)将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49，据此可得出每升水样中的活菌数为____________，实际上每升溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为______________________________________。(4)若用固定化酶技术固定目的菌中催化化合物A降解的酶，和一般酶制剂相比，其优点是___________________，且利于产物的纯化；固定化目的菌细胞常用_____________法固定化。7.幽门螺旋菌是一种螺旋形的革兰氏阴性菌（革兰氏阴性菌对万古霉素、两性霉素B等不敏感），感染后可引起胃炎、消化道溃疡等疾病，已知幽门螺旋菌具有较强活性的脲酶（脲酶能将尿素分解为氨和二氧化碳或碳酸铵）。目前幽门螺旋菌是能够分离纯化培养的少数胃微生物之一。（1）为从胃炎患者的胃粘膜提取稀释液中分离得到幽门螺旋菌，应将稀释液样品接种在以_____为唯一氮源的_____（填“固体”或“液体”）培养基上，以_____法接种后置于培养箱中培养。（2）如欲检测是否存在幽门螺旋菌，可向培养基中添加_____，在培养过程中如出现红色环带的菌落，表明该菌落为幽门螺旋菌菌落。（3）现将上述实验分离得到的幽门螺旋菌进行扩大培养，采用布式肉汤基础培养液进行培养，培养液中需加入用紫外线处理1小时的6%马血清和混合抗生素（包括万古霉素、两性霉素B等）。使用混合抗生素的目的是，选择紫外线而不用高压蒸汽灭菌的方法处理马血清的原因是。（4）若利用活菌计数法统计幽门螺旋菌的数量，计得的微生物数量往往比实际数_____，原因是_____。生物选修专题第3页，共3页参考答案1.（1）半乳糖醛酸选择透明圈直径和菌落直径平板灭菌不严格、操作失误（2）果胶酶所催化的果胶的反应速度(或果胶的减少量或半乳糖醛酸的增加量)物理吸附和化学结合传递效率2.（1）对羟基苯甲酸为细胞生物生命活动提供能量，为其他有机物的台成提供原料（2）为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定（3）增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例（4）一定条件下，同种细菌形成的菌落特征是相同的(不同菌种在相同条件下形成的菌落特征不同)对照（5）血细胞计数板稀释涂布平板包埋(固定)凝胶色谱所带电荷的差异分子大小(形状)3.（1）萃取防止加热时有机溶剂挥发纸层析（2）干热触摸锥形瓶不烫手（3）稀释涂布平板法防止杂菌的污染，保证培养物的纯度形状4.（1）防止外来杂菌入侵提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长将平板倒置（2）木糖接种环灼烧后未冷却或划线末从第一区域末端开始稀释涂布平板（3）检测培养基平板灭菌是否台格5.（1）磷酸缓冲液甲（2）①鉴别提供碳源、氮源、维生素②将未接种的培养基在适宜的条件下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落出现③小于(当样品中细菌浓度低时，)培养基表面生长的一个菌落来源于样品中的一个活菌6.（1）选择高温蒸汽灭菌（2）稀释涂布平板法检测培养基平板灭菌是否合格（3）5.0×107统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落（3）可重复利用包埋法7.（1）尿素固体稀释涂布平板（2）酚红指示剂（3）抑制对万古霉素、两性霉素B敏感的微生物生长高压蒸汽灭菌会破坏血清中的生物活性物质（4）少两个或多个细胞连在一起会形成一个菌落