小鼠心梗模型制备及其心功能检测

小鼠心梗模型的制备及其心功能检测动物拥有生存，享受生命，免受痛苦权利动物权利医学研究中实验动物的伦理原则—“3R”原则减少（Reduction）代替（Replacement）优化（Refinement）减少动物实验中的应激因素建造自然舒适的环境有躲避的安全场所（设置黑洞）实验中的动物爱护清洁与玩耍熟悉动物的生物学特性、进行正确的实验操作，减少动物痛苦正确的抓取与固定，让动物舒适、有安全感简介在心血管疾病研究中，心肌梗死动物模型的建立对于研究冠心病、心力衰竭等疾病的病理生理变化、心电生理改变、评价各种治疗方法以及预防冠心病的发生发展具有重大价值。今天，与大家一起讨论小鼠心肌梗死模型的制备及其心功能的检测。对动物模型的要求如何建立具有稳定性高，重复性好的心肌梗死模型对于心肌梗死的基础研究有着重要的应用价值。•大动物：其解剖结构、心脏血管分布和心脏/体重比等方面与人的心脏很相似。试验周期长、成本高、操作难度大。•小动物：繁殖快易饲养、试验周期短，成本低小鼠生命力相对弱，手术耐受性差，术后评估效果相对难。•选择小鼠作为心梗模型可以大大降低成本，缩短实验周期，有利于实验的重复性和数据的稳定性，对于研究人类心肌梗死的发生，发展及转归具有重要价值。心梗模型制备一、器械准备1.麻醉机2.呼吸仪3.显微镜4.保温垫5.洁净手术台6.显微手术器械二、小鼠准备小鼠年龄：﹥6w体重：﹥18g三、术前准备器械消毒动物麻醉异氟醚当小鼠对痛觉没有反应时，可将润滑剂涂抹在小鼠的双眼上以免干燥，脱去颈部、胸部的体毛。手术步骤用75%酒精或温水清洗掉体毛，然后用75%酒精消毒手术视野。将小鼠固定在暖垫上，然后用粘胶固定四肢。用粗线牵拉上齿固定。切开颈部皮肤，分离皮下组织和肌肉，露出气管。牵拉舌头，利用PEtubing(20号)进行气管插管，插好后连接好呼吸机。麻醉机调节Isofluran：2氧流量：2呼吸机调节呼吸频率(RespiratoryRate)：30to350µl输出量(strokevolume)：0-130ul开胸沿着胸骨左缘自下而上切开皮肤约1.5cm，剪开或者分立胸大肌，暴露第四肋间，切开肋间约1.0cm,用微型拉钩（retractor）分离肋骨，暴露心脏。用弯钳提起心包膜，用有齿镊子轻轻的撕裂开心包膜，暴露出心脏，找到左心耳，确定前降支。结扎用8.0线结扎左前降支后，退出分离器，用6号线缝合肌肉层，4号线缝合皮肤。停止麻醉，脱离呼吸机，一旦确信小鼠有自主呼吸，就可以拔管。随后可皮下注射无菌生理盐水0.5ml。将小鼠放置在暖水袋上保持约1小时后放回动物房。验证结果：最直接的是心电图1)Staining:Evan’sBluedyeandTTCafterMIorI/R.2)Calculatetheareaatrisk.JitkaA.I.Viragetal.JJournalofVisualizedExperiments20191-5Crosssection:Evansbluedye(Blue),TTCstainingofmetabolicallyviabletissue(red).Necroticareasdonotstain(pale)A.K.M.TarikuzZamanetal.JExpBiolMed(Maywood)2009234:246超声心动图PV-Loop心梗模型的心功能检测超声心动图是应用超声波回声探查心脏和大血管以获取有关信息的一组无创性检查方法。包括M型超声、二维超声、彩色多普勒血流显像等。LVperformance:CO,ml/m:cardiacoutputEF,%:ejectionfractionHR,bpm:heartrateFS,%:fractionalshorteningSV,ul:strokevolumeLVAW,mm:leftventricularanteriorwallVolume,systole,ulLVPW,mm:leftventricularposterwallVolume,distole,ulLVID,mm:leftventricularinteriordiameterPapillarymuscleasthemarkerMarker:Papillary,Aorticartery,Leftatrium例子血液动力学检测（P-VLoop）压力-容积环技术:提供随心室随时间而变化的压力容积输出的模拟信号.在稳定的时期血液动力学和压力容积环会被记录下来.它能更明确的检测出左室功能，不依赖左室的负荷状态.P-VLoopP-VLoopdP/dtmin&dP/dtmax:representtheminimumandmaximumrateofpressurechangeintheventricle.谢谢！