诊断——临床常用免疫学检查

2019/9/41临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查Immunologicaltests2019/9/4临床常用免疫学检查2临床常用免疫学检查免疫功能检查(immunologicalfunction)血清免疫球蛋白检测血清补体检测细胞免疫检测(immunoglobulin,complements,cellimmune)自身免疫检测(auto-antibodies)类风湿因子测定抗核抗体检测组织和细胞抗体检测(RFANAotherantibodies)感染免疫检测(infectiousimmunology)细菌感染免疫检测病毒感染免疫检测其它(寄生虫感染、性病等）(bacterial,virusandsoon)肿瘤标志物检测(tumormarkers)蛋白质类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物(proteins,glycolipid,enzymesmarkers)器官与骨髓移植的检测(organandbonemarrowtransplantation)病毒肝炎血清标志物(virushepatitismarkers)其它循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测2019/9/4临床常用免疫学检查3免疫功能检查(immunologicalfunction)血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulintest)血清补体检测(Complements)细胞免疫检测(Cellimmune)2019/9/4临床常用免疫学检查4Immunoglobulin概念：具有抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。分类:用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE2019/9/4临床常用免疫学检查5Immunoglobulin2019/9/4临床常用免疫学检查62019/9/4临床常用免疫学检查72019/9/4临床常用免疫学检查8IgG最多、占75%～85%抗体活性IgA血清型和分泌型两种IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子。最早；最先IgD功能尚不完全清楚IgE与变态反应有关(0.002%)2019/9/4临床常用免疫学检查92019/9/4临床常用免疫学检查10ADCCnormalrange2019/9/4临床常用免疫学检查112019/9/4临床常用免疫学检查12多克隆(Polyclonal)增高:IgGIgAIgM均增高单克隆(Monoclonal)增高:仅某一种Ig增高而其他种不增高2019/9/4临床常用免疫学检查13增高：多克隆性增高(polyclonalelevate)慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病(chronicinfection,chronichepatitis,AID)单克隆性增高(monoclonalelevate)免疫增殖性疾病(proliferativedisease)增高临床意义增高临床意义2019/9/4临床常用免疫学检查142019/9/4临床常用免疫学检查15M蛋白（Monoclonalprotein）概念：单克隆B淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有抗体活性。M蛋白临床意义2019/9/4临床常用免疫学检查162019/9/417临床常用免疫学检查2019/9/4临床常用免疫学检查18减低：先天性(congenital)体液免疫缺陷和联合免疫缺陷（先天性无（低）丙种球蛋白血症等）获得性(acquired)肾病综合征（大量流失蛋白）、淋巴网状系统肿瘤、病毒感染、免疫抑制剂应用减低临床意义2019/9/4临床常用免疫学检查19immunologicalfunction血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulintest)血清补体检测(Complements)细胞免疫检测(Cellimmune)2019/9/4临床常用免疫学检查20Compleme2019/9/4临床常用免疫学检查21血清补体（complement,C）组成：由传统途径的9种成分c1（c1q、c1r、c1s）～c9,旁路途径的3种成分及其衍生物B、D、P、H、I等因子组成。作用：参与灭活病原体的免疫反应，也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫损伤2019/9/4临床常用免疫学检查222019/9/4临床常用免疫学检查23totalhemolyticcomplementactivityCH50正常值：50~100ku/L临床意义：减低—1.先天性2.合成减少hepatitis,营养不良3.消耗或者丢失过多SLE增高—急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。2019/9/4临床常用免疫学检查24补体C3检测C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质。正常值：0.85~1.7g/L补体C4检测C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用。正常值：0.22~0.34g/L2019/9/4临床常用免疫学检查25参见CH50减低和增高的临床意义C3增高在急性炎性反应更敏感C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低更有意义临床意义2019/9/4临床常用免疫学检查26immunologicalfunction血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulintest)血清补体检测(Complements)细胞免疫检测(Cellimmune)2019/9/4临床常用免疫学检查27细胞免疫检测(Cellimmune)①T细胞免疫检测②B细胞免疫检测③自然杀伤细胞检测(NKcell)④细胞因子检测(cytokine)2019/9/4临床常用免疫学检查28T细胞分化抗原测定(免疫荧光法;流式细胞）CD3—总T细胞正常值：69.4%±4.86%CD4—T辅助细胞（TH）正常值：41.17%±5.28%CD8—T抑制细胞（TS）正常值：24.58%±4.02%CD4/CD82.2±0.7/1流式细胞仪检测T细胞亚群2019/9/4临床常用免疫学检查30临床意义：CD4降低—病毒感染（CMV,HIV,HBV)CD4/CD8增高—恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、排异反应CD4/CD8减低—见于艾滋病(HIV)、恶性肿瘤、传单及乙肝急性期。CD3CD4CD8均增高—T细胞型淋巴细胞恶性疾病(Tlymphocytesmalignantdisease)B细胞分化抗原测定：应用CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等单克隆抗体标记单个核细胞—B细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测。CD19为全部B细胞共有的表面标志，B细胞活化后不消失，是最重要的B细胞标记分子。CD22为成熟B细胞的表面标志。参考值：CD1911.74±3.73%临床意义升高—B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、Burkitt淋巴瘤等减低—无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂应用后2019/9/4临床常用免疫学检查33自然杀伤细胞免疫检测I.自然杀伤细胞（NK）介导天然免疫应答，它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞II.自然杀伤细胞（NK）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一2019/9/4临床常用免疫学检查34细胞因子检测•细胞因子（cytokine）是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的，介导和调节免疫、炎症反应的小分子多肽。•IL-2、IL-6、IL-8、IL-10和TNF、IFN2019/9/4临床常用免疫学检查35临床常用免疫学检查免疫功能检查自身免疫检测肿瘤标志物检测感染免疫检测(infectiousimmune)器官与骨髓移植的检测病毒肝炎血清标志物其它2019/9/4临床常用免疫学检查36自身免疫检测类风湿因子测定抗核抗体检测组织和细胞抗体检测2019/9/4临床常用免疫学检查37RA2019/9/4临床常用免疫学检查38rheumatoidfactor,RF概念：RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。分型：可分为IgM型、IgG型、IgA型等，用胶乳凝集法测出的主要是IgM型，速率散射比浊检测准确定量分析，用ELISA法可检出其它型。2019/9/4临床常用免疫学检查39RF-IgGRF-IgARF-IgM2019/9/4临床常用免疫学检查40A.参考值：阴性30U/LB.临床意义：1、类风湿关节炎(RA)（阳性率79.6%）；与疾病活动有关2、其它自身免疫性疾病（SLE、SS等）3、慢性肝病、慢性感染性疾病4、健康人3%至5%阳性rheumatoidfactor,RFRF分型意义2019/9/4临床常用免疫学检查412019/9/4临床常用免疫学检查42auto-immunetestRheumatoidfactorAnti-NuclearAntibodytissueandcellantibody2019/9/4临床常用免疫学检查43SLE系统性红斑狼疮：手背和甲周红色皮疹白细胞管型红细胞管型心包炎2019/9/4临床常用免疫学检查47抗核抗体检测抗核抗体（antinuclearantibody,ANA）抗核抗体是泛指抗各种细胞核成分的自身抗体的总称（ANAS），这种抗体无器官和种族的特异性。2019/9/4临床常用免疫学检查48Immunofluorescenceassay以鼠肝细胞核或人喉癌细胞（Hep-2细胞）作抗原时该抗体（1抗）可与之结合，再加入荧光标记抗人IgG（2抗）后可产生黄绿色荧光。2019/9/4临床常用免疫学检查49血清抗体荧光素标记的抗免疫球蛋白细胞核细胞浆载片间接免疫荧光检测的原理2019/9/4临床常用免疫学检查50根据细胞核着染荧光的图像可分为:均质型DNP核蛋白核膜型DNA斑点型ENA核仁型RNA2019/9/4临床常用免疫学检查51抗核抗体：均质型(diffused)抗DNP,抗组蛋白抗体，抗DsDNA2019/9/4DsDNA52抗核抗体：核膜型(spherical)2019/9/4抗核糖体核蛋白颗粒53抗核抗体：斑点型(speckled)2019/9/4RNA54抗核抗体：核仁型(nucleolus)2019/9/4临床常用免疫学检查55参考值：免疫荧光法为阴性血清滴度1：100为阳性2019/9/4临床常用免疫学检查56临床意义：1、ANA阳性最多见于未治疗的SLE，阳性率达80%—100%（活动期几乎100%阳性）2、ANA阳性是结缔组织病的标志，是SLE最佳筛选试验。3、其它疾病,如原发性胆汁性肝硬化(Primarybiliarycirrhosis)、慢性肝病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性ANA荧光图形临床意义2019/9/4临床常用免疫学检查572019/9/4临床常用免疫学检查582.抗脱氧核糖核酸抗体（anti-DNAantibody）其中抗双链DNA（doublestranded-DNA,ds-DNA）抗体的靶抗原是细胞核中的DNA双螺旋结构，识别双碱基对的DNA。正常结果：阴性临床意义：1.为SLE特异性抗体(SpecificantibodyforSLE)，特异性率95%—100%；敏感性30-50%。2.与活动程度相关3.特别在并发狼疮性肾炎时起重要作用。4.其它风湿病中抗ds-DNA抗体也可阳性。2019/9/4临床常用免疫学检查593.可提取性核抗原多肽抗体谱ENA（extractableantinuclearantigen）由多种相对分子质量不同的多肽构成，利用免疫印迹试验可对这些抗原的自身抗体进行检测，目前已经发现20余种。2019/9/4临床常用免疫学检查60抗体靶抗原意义方法SmRNA和核蛋白SLE标记抗体，阳性30~40%双向免疫扩散U1RNP小核糖核蛋白MCTD阳性90%;SLE﹑SS﹑SSc﹑PM/DMDID;EIASSA(Ro)小细胞质核糖核蛋白PSS40~95%;SCLE70~90%DID;EIASSB(La)小细胞核核糖核蛋白SS