耐用性试验

含量色谱体系微调的耐用性考察在此色谱条件下：硅胶柱；以正己烷：正戊醇（997:3）为流动相；流速为1ml/min；检测波长为265nm。取对照品和供试品溶液，用同一色谱柱将流动相比率、流速，在上述流动相体系数据上，上下适当加调两个数据；将检测波长在上述数据上，上下适当加调两个数据；另选两个色谱柱按上述色谱条件检测，进样量均为100μl，记录色谱图，用外标法计算样品含量，结果见下表。表3.2.P.5-65含量测定色谱体系耐用性实验结果色谱条件含量（%）平均含量（%）RSD(%)标准130.03128.351.78流速（ml/min）0.9129.281.1125.75标准130.87125.913.53检测波长(nm)260nm124.54270nm122.30标准129.47131.411.40流动相比例996:4133.13998:2131.62标准128.11129.901.20色谱柱柱2130.92柱3130.69结果表明，本色谱条件在一定范围变动情况下是耐用的。有关物质色谱系统适当变化在此色谱条件下：硅胶柱；以正己烷：正戊醇（997:3）为流动相；流速为1ml/min；检测波长为265nm。通过对液相色谱的流速、检查波长、流动相组成比例、色谱柱进行适当的调整，观察杂质的量是否增加，是否有新增杂质，以确定本色谱条件的可耐用性。色谱图见附图3.2.P.5-89～3.2.P.5.3-106，结果见下表。表3.2.P.5-38有关物质耐用性试验结果色谱条件系统适用性溶液供试品溶液相对保留时间分离度杂质个数前维D3（0.5）反维D3（0.6）速甾醇（1.1）前维D3与反维D3维生素D3与速甾醇标准0.520.571.092.2201.9934流速（ml/min）1.10.510.551.091.6861.96840.90.500.551.092.1442.0594检测波长(nm)260nm0.520.561.092.0451.9544270nm0.520.571.092.1492.0824流动相比例996:40.540.591.082.1741.7893998:20.500.551.102.0332.3114色谱柱柱20.520.571.092.4892.2544柱30.520.571.091.9501.9484结果表明，液相体系所有参数在适当范围内变化时，系统适用性溶液中前维生素D3，反维生素D3和速甾醇的相对保留时间稳定的，且分离度均大于1.0，供试品溶液中没有新的杂质产生。说明本方法有一定范围内是耐用的。