细胞工程期末试卷

细胞工程期末试卷一、填空（共20’1’*20）1.细胞工程：是在细胞水平研究、开发和利用各类细胞的一门技术。2.体外培养主要包括_细胞培养_，_组织培养_，和_器官培养_三种类型。3.体外培养的动物细胞其生长方式主要贴壁生长、半贴壁生长和悬浮生长三种，分别称为贴壁型细胞、半贴壁型细胞细胞和悬浮型细胞。体外培养的动物细胞其生长方式以贴附生长为主。4.贴壁生长的体外培养动物细胞，按形态来分，大体分为成纤维型细胞、上皮型细胞、游走型细胞、多形型细胞四种类型。5.目前，较常用的消化试剂有胰蛋白酶、胶原酶、EDTA消化液。6.制备单克隆抗体的融合是指将免疫小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合。7.单克隆抗体的大量制备普遍采用的方法是杂交瘤技术。8.融合过程中使用的促溶剂主要是聚乙二醇。9.细胞融合培养时加入在HAT选择系统，目的是保证只有杂交瘤细胞生长。二、选择（共25’1’*25）1、植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（B）A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖2、以下4种细胞工程技术培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（A）A．细胞和组织培养B．细胞融合C．动物胚胎移植D．细胞核移植3、用于核移植的供体细胞一般都选用（B）A.受精卵B.传代10代以内的细胞C.传代10~50代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞4、下列哪一项属于克隆（B）A.将鸡的某个DNA片断整合到小鼠的DNA分子中B.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系C.将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内D.将鼠的骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞5、植物体细胞杂交是利用不同物种的两个体细胞融合成一个杂种细胞的过程。该过程是指（B）A.不同植物的精子与卵细胞的融合B.不同植物的原生质体的融合C.完整的两个体细胞的融合D.植物花粉细胞的两两融合6、从细胞全能性的角度看，下列叙述正确的是（C）A.分化程度高，具有较高的全能性B.分化程度低，具有较低的全能性C.分化程度低，具有较高的全能性D.分化程度高低与全能性无关7、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D）A.可以制成诊断盒，用于疾病的珍断B.可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C.可以利用基因工程技术生产D.可以在生物体内生产，不能体外生产8、下列关于动物细胞培养的有关叙述中正确的是（D）A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理9、下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是（C）A不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程B原生质体仍具有再生细胞壁，连续分裂并长成完整植株的能力C参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体D植物体细胞杂交技术可克服不同种植物之间的不亲和障碍10、在动物细胞培养过程中，下列处理不恰当的是（C）A．培养液和培养用具要进行无菌处理B．提供种类齐全的营养物质C．提供纯氧以保证细胞的呼吸作用D．保证提供适宜的温度和pH11、下列有关植物细胞工程应用的叙述，错误的是（A）A．利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种B．利用组织培养技术获得人工种子，大多能保持亲本的优良性状C．利用细胞培养技术获得紫草素，实现了细胞产物的工厂化生产D．利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”，克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍12、下列关于植物组织培养和动物细胞培养的相关叙述中，正确的是（A）A．动物细胞培养的原理是细胞增殖B．动物细胞培养过程也需要进行脱分化处理C．目前利用动物细胞培养技术已能产生新的动物个体D．植物组织培养要用一定的方法将细胞分散开来13、在动物细胞核移植技术的应用过程中，用于核移植的供体细胞一般都选用10代以内的培养细胞，其主要原因是（B）A．传代培养的细胞一般传至10代后不易传下去B．10代以内的细胞一般能保持保持正常的二倍体核型，保证供体细胞正常的遗传基础C．10代以后细胞的核型一定会发生变化，朝着癌细胞方向发展D．10代以内的细胞不能产生变异，可保持细胞正常的遗传基础14、在生物体的所有细胞中，全能性最高的是（D）A．卵细胞B植物花粉C．体细胞D受精卵15、通过细胞杂交,获得一个杂种植株,需要的步骤是(A)A.分离原生质诱导原生质融合生出细胞壁组织培养法得到杂种植株B.分离原生质原生质自然融合组织培养杂种植株C.获取细胞原生质融合组织培养杂种植株D.获取细胞原生质直接融合组织培养杂种植株16、一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件(D)①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血浆④温度与动物体温相近⑤需要02，不需要C02⑥能调培养液pHA．①②③④⑤⑥B．①②③④C．①③④⑤⑥D．①②③④⑥17、在细胞工程中，需要利用细胞的全能性。下列细胞中全能性最高的是(D)A.胡萝卜的韧皮部细胞B.水稻的花粉C.绵羊的乳腺细胞D.大白鼠的受精卵18、在以下四种细胞工程的技术中，培育出新个体的同时具有两个亲本遗传性状的方法是（B）A.细胞和组织培养B.细胞融合C.动物胚胎移植D.细胞核移植19、下列过程中，没有发生生物膜融合的是（C）A．植物体细胞杂交B．受精过程C．氧进入细胞中的线粒体D．效应B细胞产生抗体20、下列有关植物体细胞杂交技术的描述，不正确的是（C）A．利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株B．获得原生质体的过程中需要纤维素酶和果胶酶C．通常用聚乙二醇或灭活病毒诱导原生质体融合D．可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞21、在植物细胞工程中，当原生质体融合成一个细胞后，需要诱导产生出细胞壁，参与这一过程的细胞器是：(B)A．叶绿体、高尔基体B．线粒体、高尔基体C．叶绿体、线粒体D．线粒体、内质网22、下面哪一项生物技术与细胞全能性是无关的（C）A.克隆羊的培育B.干细胞培育出器官C.无籽西瓜的培育D.胚胎分割移植23、通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程：①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生抗体的效应B细胞③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后次序是（C）A.②③①B.③①②C.②①③D.①③②24、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的Ｂ淋巴细胞融合，对得到的杂交细胞不正确的叙述是（B）A.有双亲细胞的遗传物质B.无增殖的本领C.可分泌特异性抗体D.有大量增殖的本领25、下列生理活动与生物膜无关的是（C）A、ATP分子的形成B、神经递质释放到突触间隙内C、抗体与SARS病毒特异性结合D、原生质体融合成杂合体细胞三、判断（共15’1’*15）1、植物细胞工程中，悬浮细胞培养系统的特点是大量快速地增殖细胞，但不利于次生物质的积累。（√）2、在育种和生活实践中，目前主要采用花粉或花药离体培养的方法来获得单倍体植物。（√）3、哺乳动物的克隆技术包括胚胎分割和细胞核移植两种技术。（√）4、将动物的体细胞核移入一个去核体细胞后通过细胞培养可以获得克隆动物。（×）5、通过显微注射技术可以将外源基因导入动物或植物从而获得转基因动物或转基因植物。（√）6、脂质体法比磷酸钙法转染的效率高。（√）7、促溶剂PEG的最适使用浓度为60%~80%。（×）8、融合过程中PEG作用细胞的时间通常以1~2min为宜。（√）9、在单抗制备过程中可以采用任何品系的动物进行免疫。（×）10、饲养层细胞培养法是目前表皮细胞体外培养的较为成熟的技术。（×）11、MS培养基是没有激素的培养基。（×）12、铁盐母液可配成100倍液，配制培养基时移取100ml。（×）13、琼脂只起固化作用，本身并不提供任何营养。（√）14、原生质体多在盐溶液作渗透稳定剂的培养基中培养。（×）15、升式生物反应器是依靠气流循环来保证反应器内培养良好的传热、传质的。（√）四、问答（共40’）1、概述BSS的组成和用途。（共5’）答：BSS即平衡盐溶液是在Ringer的生理盐水基础上发展起来的，主要由无机盐和葡萄糖组成。用途：用来洗涤组织细胞，也是配制各种培养用液的基础溶液。BSS可以维持细胞渗透势和PH在生理范围内，可提供细胞正常代谢所需的水分和无机离子等，另外，大多数平衡盐溶液内附加的葡萄糖可以提供细胞生存所需的能量。2、什么是细胞系和细胞株？进行动物单细胞克隆方法主要有哪几种？（共6’）答：（1）细胞系：指从原代培养物经传代培养后得来的一群不均一的细胞，是由原先存在于原代培养物的各种类型所组成的。（2）细胞株：通过选择或克隆化培养，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的细胞群。（3）方法：稀释铺板法、饲养层克隆法、胶原模板或血纤维蛋白膜层板克隆法、琼脂糖克隆法。3、简述哺乳动物细胞核移植的一般操作步骤。（共6’）答：（1）核受体细胞的准备；（2）核供体细胞的准备；（3）细胞核移植；（4）激活；（5）重组胚胎的培养；（6）重组胚胎的移植。4、胚胎干细胞有何特性，如何验证胚胎干细胞的全能性？（共7’）答：胚胎干细胞具有全能性，可以自我复制（或更新）并具有分化为体内所有组织的能力。胚胎干细胞的鉴定：①形态学检测：细胞呈圆形、核大、胞浆少；细胞排列紧密，呈集落形生长；集落常呈岛状、巢状。②遗传学检测：为正常的二倍体核型；③酶活性检测：ES细胞内端粒酶和碱性磷酸酶活性高；④细胞表面标志物检测：ES细胞膜表面有特殊的标记：如OCT-4，SSEA-3,SSEA-4等；⑤体内分化潜能：植入裸鼠皮下，可诱发形成畸胎瘤；可分化为三个胚层的细胞；能参与嵌合体的形成；⑥体外分化潜能：可形成类胚体，可在体外诱导分化为三个胚层的细胞。5、比较动物细胞融合与植物细胞融合的异同。（共8’）比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）用途获得杂种植株制备单克隆抗体6、1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。（共8’）请观察下图，回答问题：答：（1）单克隆抗体是指化学性质单一，特异性强的抗体，其特点是特异性强，灵敏度高。（2）1984年以来，科学家针对如右图所示的单克隆抗体来自鼠，应用于人体，会作为异物产生免疫反应，加速排斥反应，以及完整的抗体分子的相对分子质量过大，难以穿透肿瘤组织，达不到有效治疗的浓度等问题，制备出可用于肿瘤治疗的相对分子质量小的单克隆抗体。（3）制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从脾脏（器官）中采集。从下表看，用于筛选杂交瘤细胞的是特定的HAT选择培养基培养基特殊成分主要作用次黄嘌呤骨髓瘤细胞不能利用氨基蝶嘌呤阻断DNA合成胸腺嘧啶核苷脾细胞用于合成DNA（4）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法是大量生产选①，小规模生产选②。