人工制备抗体

人工制备抗体多克隆抗体单克隆抗体基因工程抗体人工抗体主要包括：一、多克隆抗体概念：以相应抗原免疫动物获得抗血清，通过接种动物所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物，简称多抗。多克隆抗体的应用：1、用于抗原物质的鉴别、定位、分析和提纯2、作为疾病的诊断、检疫试剂3、作为人和动物某些疾病的治疗制剂二、单克隆抗体概念：1975年，Kohler和Milstein在自然杂交基础上创建杂交瘤技术，其产生的抗体只针对单一抗原决定簇，简称单抗。单抗制备过程示意图单克隆抗体的特点：•高特异性•高均质性单克隆抗体的应用：1、在血清学技术方面,2、在免疫学基础研究方面,3、在抗原纯化方面,4、在肿瘤治疗方面，如生物导弹,5、用于制备抗独特型抗体疫苗。三、基因工程抗体概念：又称重组抗体，利用基因工程技术制备抗体分子，这是分子水平的抗体。基因工程抗体的优势：去除或减少无关结构，保留或增加天然抗体特异性和生物学活性。基因工程抗体包括：（一）改造鼠源性抗体（二）噬菌体抗体（三）胞内抗体（一）改造鼠源性抗体1.人-鼠嵌合抗体2.改型抗体或人源化抗体3.小分子抗体1.人-鼠嵌合抗体是指在同一抗体分子中含有不同种属来源抗体分子片段的抗体。人-鼠嵌合抗体的特点：1.保留了鼠源单抗的特异性和亲和力；2.其人源Fc段能有效介导生物学效应功能；3.能自由地选择抗体，并有效地利用不同的生物学特点及理化特性；4.可以容许插入不同的鼠单克隆抗体的可变区，缩短操作和研制周期；操作相对简单。2.改型抗体或人源化抗体概念：指利用基因工程技术，将鼠单抗V区中互补性决定区（CDR）序列取代人源抗体CDR序列，重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持人抗体亲和力的CDR移植抗体。改型抗体或人源化抗体的特点：保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。3.小分子抗体概念：是指由Fab和Fv组成的抗体片段。小分子抗体的优点：a.仅含V区结构，免疫原性较弱，b.分子量小，易透过血管壁，可有效克服肿瘤灶组织对抗体的生理阻抗，c.无Fc段，不与非靶细胞的FcR结合，易渗透至病灶局部，d.有利于作为导向药物的载体。小分子抗体的局限性：与靶细胞表面抗原的结合力较弱，半寿期短，易从血液中被清除，从而影响到达肿瘤局部的抗体浓度。小分子抗体的类型：（1）Fcb片段，（2）单域抗体，（3）Fv片段，（4）单链抗体（ScFc），（5）最小识别单位（MRU），（6）双价小分子抗体（diabody），（7）双特异性小分子抗体，（8）微抗体（minibody）。（二）噬菌体抗体概念：是将克隆的人抗体V区基因与一种丝状噬菌体DNA上的基因Ⅲ或基因Ⅷ精确连接，转染细菌后在其膜表面表达Fab段--噬菌体外壳蛋白的融合蛋白。噬菌体抗体的优点：（1）无须免疫，可直接从非免疫动物抗体库中筛选出特异性抗体，（2）可供产生针对多种特异性抗原的人源抗体，以克服难以建立的人-人杂交瘤的困难，（3）细菌增殖快，培养成本低，适合大规模生产，为临床上大量应用抗体提供了可能性。（三）胞内抗体概念：指借助基因工程手段，获得仅在细胞内表达并仅作用于胞内靶分子的抗体或其片段，多为ScFc。胞内抗体的特点：可特异性作用于胞内靶分子，从而发挥特定的生物学效应。Thankyou！