第五章植物检疫性病原物及杂草本章重点重要检疫性病原物的鉴别特征、自然寄主种类及其引起病害的症状特点重要检疫性病原物的传播途径及检疫检验技术检疫性杂草的识别及传播途径第一节危险性病原真菌基本特点所有真菌性病害都可通过种苗传播,可经由种子传播的占3.5%;列入各国检疫名单的有100多种,我国现行的名单中,A1类真菌11种,A2类2种,A3类73种,B类5种;一、小麦矮腥黑穗病菌学名TilletiacontroversaKühn(TCK)异名T.brevifaciensFisch.分类地位担子菌亚门(Basidiomycotina),冬孢菌纲(Teliomycetes),黑粉菌目(Ustilaginales),腥黑粉菌属英文病名Dwarfbuntofwheat(一)发生简史及危害1874Kühn在匍匐冰草上发现;1935年从网腥黑粉菌中区分开的一个“新变种”;是麦类黑粉菌中危害最大、防治极难的病害之一;在美国北部发生严重,1972年减产17%,重病田减产90%;为我国禁止进境的A1类检疫性病害。上海、大连、深圳等检疫局曾多次从美国和德国转口的小麦中截获TCK孢子。美洲:美国、加拿大等;尤其是美国中西部和东北部;欧洲:俄罗斯、乌克兰、捷克斯洛伐克、波兰等;亚洲:土耳其、伊拉克、伊朗、叙利亚、阿富汗、日本等;非洲:阿尔及利亚、利比亚、突尼斯和大洋洲的澳大利亚(为害冬大麦)等。(二)境外分布禾本科的5个族,18个属,65个种或变种。被侵染的属有山羊草属、如冰草属、剪股颖属、看麦娘属、燕麦草属、雀麦属、鸭茅属、野麦属、羊茅属、绒毛草属、大麦属、黑麦草属、早熟禾属、黑麦属、三毛草属和小麦属。在栽培条件下,矮腥黑粉菌主要为害冬小麦,也侵染大麦和黑麦。(三)寄主范围植株矮化:为健株的1/4~2/3分蘖增多:健株2~4个,病株4~10个病株健株(四)危害症状特点病穗健穗小花增多、病穗宽大紧密:健株3~5,病株5~7病粒近球型、有鱼腥味,成熟后成菌瘿。(四)危害症状特点病原形态冬孢子黄褐色,球形、近球形,直径19.73~22.2μm;外壁有多角状网纹;网目4.5~6.4个;网脊高0.82~1.77μm;胶质鞘无色透明1.2~2.16μm。不孕孢子球形无色,薄壁,光滑,有的也包被胶鞘。(五)病原形态与生物学小麦矮腥黑穗病菌冬孢子小麦矮腥黑穗病菌冬孢子TCK担孢子“H”型结合小麦矮腥黑穗病菌与近似种冬孢子形态比较小麦网腥黑穗病菌小麦光腥黑粉病菌小麦印度腥黑穗病菌生物学特性冬孢子萌发需有长期低温与光照。萌发温度范围最低-2℃≤T≤15℃,适温为3~8℃。在5℃条件下,至少3周才开始萌发,6~8周为萌发高峰。在5℃培养3~4周,再移至-2~0℃,则在较短时间内就可大量萌发。(五)病原形态与生物学冬孢子萌发需有弱光照,适宜的照度为400~600lx。对湿度的要求不甚严格,土壤含水量35%~88%时均可萌发。矮腥冬孢子具有自发荧光;网腥冬孢子(除少数未成熟者外)无此种自发荧光,这一特征可用于种的鉴别。(五)病原形态与生物学三种腥黑粉菌冬孢子有关特征的比较特征矮腥(TCK)网腥(TCT)印腥(TIM)色泽深黄褐色褐色深红褐色外壁网状突起网状突起疣状突起直径(µm)19.918.034.6网脊(µm)1.5-3.00.5-1.51.5-5.0胶质(µm)1.5-4.00.2-0.9-网目(µm)3.0-5.02.0-4.0-萌发条件5℃3周萌发;17℃不萌发;需光照。5℃13-15d;17℃7-10d;光促进萌发。15-20℃1-3周萌发;光促进萌发。先菌丝和担孢子数先菌丝短,可分枝;初生担孢子多,线形,可H行结合。先菌丝很少分枝;初生担孢子少,线形,可H行结合。初生担孢子很多,镰刀形,无H行结合。自发荧光≥80%≤30%-土传疫区土壤带菌是主要的侵染菌源。分散的冬孢子在病田土壤中存活l~3年,菌瘿中的冬孢子可存活3~10年。冬孢子在水田中只能存活5个月。冬孢子经过牲畜的消化道后仍可萌发。种传附着在子表面,或混杂在种子间远距离传播。(六)传播途径运载工具随着被孢子污染的包装材料等远传。疫区的孢子可随风雨、河水和灌溉水传播到较远的无病区。病麦加工后的下脚料、洗麦水等若不慎随粪肥施入田间或流入田间都可污染土壤。(六)传播途径发病规律冬小麦幼苗小麦生长点子房组织菌瘿冬孢子萌发侵入发病关键因素:冬孢子萌发温度0~5℃,40d;寄主组织幼嫩。过筛检验在各舱各层次按棋盘式随机选点20~30个,每点至少取1kg样品,用1.7mm×20mm长孔筛或2.5mm圆孔筛进行筛检,仔细检查筛下物中有无菌瘿及其碎块,并同时检查筛上物。症状检查将样品倒入灭菌白瓷盘内,仔细检查有无菌瘿或碎块,挑取可疑组织在显微镜下检查鉴定。同时对现场检查时携回室内的筛上挑出物和筛下物进行检查,将发现的可疑病组织及其他可疑的感染黑穗病的禾本科作物及杂草种子进行镜检鉴定。(七)检验方法洗涤检验检查附着于种子表面的病菌冬孢子。在显微镜下观察,与其它病原菌相区分。孢子萌发检验3%琼脂培养基。设5℃和17℃/无光照5℃/光照萌发17℃/无光照萌发TCKTCT(七)检验方法冬孢子自发荧光显微检验从菌瘿上刮取冬孢子于载玻片上,然后加一滴无荧光载浮剂,封片后置于激发波长为485nm,屏障滤片波长为520nm的落射荧光显微镜下,检查视野中呈荧光正负反应的冬孢子数,统计冬孢子自发荧光率,全过程不得超过3min。冬孢子自发荧光率大于或等于80%,为TCK。PCR技术(七)检验方法二、马铃薯癌肿病菌学名Synchytriumendobioticum(Schilb.)Percival异名Chrysophlyctisendobiotica(Schil.)SynchytriumsolanlMassee英文病名Potatowartdisease,Blackwartofpotato,Blackscabofpotato分类地位鞭毛菌亚门(Mastigomycotina)壶菌纲(Chytridiomycetes)壶菌目(Chytridiales)集壶菌属(Synchytrium)危险性分析我国列为A1类检疫性真菌亚洲的日本、印度、巴基斯坦、缅甸、巴勒斯坦、黎巴嫩、以色列、尼泊尔;非洲的突尼斯、阿尔及利亚、津巴布韦、南非、肯尼亚、坦桑尼亚;美洲的加拿大、美国、巴西、秘鲁、阿根廷、智利、哥斯达黎加、乌拉圭、厄瓜多尔、玻利维亚、墨西哥、福克兰群岛;欧洲的英国、德国、奥地利、比利时、匈牙利、荷兰、丹麦、波兰、卢森堡挪威、葡萄牙、罗马尼亚、前苏联、芬兰、法国、捷克、斯洛伐克、瑞士、瑞典、意大利、前南斯拉夫、希腊、保加利亚、西班牙、冰岛、爱尔兰、法罗群岛;大洋洲的新西兰、澳大利亚。我国四川、云南部分地区;(一)境外分布马铃薯癌肿病在全球的分布寄主范围自然条件下主要侵染马铃薯。也有资料记载可侵染番茄、甘苦茄、龙葵、京豆属和假酸浆属。危害情况危害马铃薯薯块,导致大幅度减产。常发生区内一般减产50%,重者绝收,且品质变劣,重病薯块不堪食用,轻病薯块也煮不烂。此病在冬季储藏期间也引起腐烂。前苏联感病品种损失80%;中国四川重病田病株率100%。(二)寄主范围及危害高感品种可在腋芽和茎间形成小癌瘤。茎、花梗、花萼、叶背可长出无柄、有主脉无分脉的丛生小叶。(三)典型症状马铃薯茎基部被害状茎基部、匍匐茎:形成较大的甚至包围整个茎基部的畸形、粗糙、疏松的肿瘤,酷似花椰菜。马铃薯薯块被害状幼薯整个变成畸形。较大薯块在芽眼处形成畸形的癌瘤。有的品种根系也可发病产生癌肿瘤。癌瘤的数目、大小,因品种的感染性、感病的迟早、侵染点的多少和发病程度而异。癌肿初为白色,见光后渐为绿色,最后变褐至黑色,腐烂。(三)典型症状休眠孢子囊锈褐色,近球形,壁厚,分为三层,大小为50~82×38~69µm,孢子壁厚4.l~10.5µm,外壁厚呈褐色内壁薄而无色。休眠孢子萌发分裂产生无数的单鞭毛游动孢子,呈球形或洋梨形,侵入寄主表皮细胞后引起瘤状突起,很快进入繁殖阶段产生夏孢子囊。夏孢子囊成熟释放游动孢子再侵染。条件不适宜时,产生配子→结合成双鞭毛的合子→侵入寄主细胞→休眠孢子囊(四)病原形态及生物学病原物形态特征休眠孢子囊夏孢子囊病害循环特点土壤温度、湿度和pH值是影响该病发生的关键因子。休眠孢子囊、夏孢子囊萌发释放游动孢子要求近饱和的湿度。发病的适宜温度12~24℃、pH4.5~7。多发生于海拔较高的山区;炎热干旱的平原极少发病。(五)发病规律气候与发病的关系:温湿度、降雨、日照是影响病害发生的主要因素。关键性因素是马铃薯生长季节的雨日与雨量。年份4~8月降雨量(mm)发病面积(亩)大面积病情1980537.83459.0中1981575.26554.9重1982471.83049轻(五)发病规律海拔高度与发病的关系:在马铃薯种植上下限范围内,海拔较高的地块发病重。坡向与发病的关系:在同一海拔高度内,阴坡比阳坡发病重。品种与发病的关系:不同品种的抗性有一定的差异。耕作制度和栽培措施与发病的关系:病地连作发病重,轮作可减轻发病。土壤酸碱度与发病的关系:是中性至微酸最适发病。(五)发病规律症状检验检查块茎及根等的芽周围有无癌肿组织。显微镜检查将芽及其周围的块茎组织带表皮作断面切片,显微检查有无夏孢子堆或休眠孢子囊存在。夏孢子堆黄褐色、壁厚,有的具不规则脊突。土壤检查对来自病区的马铃薯块茎及其他植物的块根、块茎、机器上所附带的少量土壤,要检查是否带有马铃薯癌肿病的休眠孢子。常用的检查方法有氯仿漂浮法、二澳乙烷漂浮法、油漂浮法和氢氟酸瘁取法。(六)检验方法第二节危险性病原细菌细菌的基本特点细菌病害包括有薄壁菌门、厚壁菌软门和软壁菌门引起的病害,有300多种;所有细菌性病害都可通过种苗传播,经由种子传播的占40%;主要是革兰氏阴性的假单胞菌、黄单胞菌和革兰氏阳性的棒形杆菌。列入我国检疫名单的有57种,其中A类52种,B类5种。一、柑橘溃疡病菌学名Xanthomonasaxonopodispv.citriVauterinetal1995英文病名Citruscanker;Bacterialcankerofcitrus分类地位薄壁细菌门(Gracilicutes)假单胞菌科(Pseudomonaceae)黄单胞菌属(Xanthomonas)危险性分析B类检疫性细菌亚洲的阿富汗、孟加拉、印度、巴基斯坦、斯里兰卡、印度尼西亚、马来西亚、菲律宾、越南、缅甸、尼泊尔、老挝、柬埔寨、泰国、日本、韩国、朝鲜、马尔代夫、阿拉伯联合酋长国、也门;美洲的阿根廷、巴西、巴拉圭、乌拉圭、美国、墨西哥、伯利兹、多米尼加、海地、马提尼克、瓜德罗普;非洲的加蓬、马达加斯加、科摩罗、科特迪瓦、毛里求斯、莫桑比克、留尼汪;大洋洲的巴布亚新几内亚、斐济、关岛、马里亚纳群岛、密克罗尼西亚群岛等国家均有分布。尤以亚洲国家发病最为普遍。中国广东、广西、福建等柑橘产地。(一)境外分布主要侵染芸香科野生和栽培的植物。在经济上造成损失最大的是柑橘,主要以甜橙、脐橙、酸橙、红江橙、来檬和官溪蜜柚、通贤柚等最为感病。自然侵染主要发生在柑橘属植物上,也发生在枸橘、金橘、菲律宾木橘上。(二)寄主范围可为害叶片、枝梢和果实。苗圃发病,苗木生长不良,出圃延迟;成年结果树发病,常引起大量落叶、落果,甚至枯梢,降低树势;未脱落的轻病果形成木栓化开裂的病斑,严重影响果品的外观和品质,降低了商品价值。20世纪初美国烧毁柑橘树25万多株、苗木27万株,损失600万美元。我国贵州20世纪80年代,销毁病株300万株。(三)危害情况叶片背面产生圆形、针头大小微突起的油浸状半透明斑点,通常为深绿色,病斑周围组织褪色呈现黄色晕环。后斑点逐渐隆起,病部表面出现开裂,呈海绵状,并开始木栓化,形成表面粗糙、灰白色或灰褐色、中心凹陷的病斑。后期病斑似“火山口”状开裂。病斑大小依品种而异,一般直