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医院环境卫生学及消毒灭菌效果监测方法1医院环境卫生学监测内容一、空气卫生学监测二、物体表面卫生学监测三、手卫生监测四、手消毒产品检测2环境卫生学监测的目的1.了解消毒设备或消毒方法是否达到某环境应达到的标准，如：设备运转是否正常、消毒方法是否正确；新使用的消毒方法能否达到所要求的标准。2.在医院感染暴发流行时的调查，是发现问题的方法之一，制订科学、有效的干预措施的前提，同时可评估干预措施的效果。3.可作为某些科研的基础研究。3消毒液内镜空气物表手卫生监测对象及方法其它二、监测的对象及方法4（一）空气采样•需做科室：换药室、治疗室、抢救室、手术室、产房、新生儿室、ICU、血透室、供应室无菌物品放置室、烧伤病房、配奶室、洗婴室等•采样方法：平皿暴露法、撞击法•采样时间：在消毒处理后操作前进行采样•环境要求：关门窗减少走动静止10分钟5布点方法:室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1m处，距离地面1.5m布点方法:室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处,距离地面1.5m6普通营养琼脂平皿(D＝9cm)（最好事先在采样点上铺一张无菌治疗巾），7将平板盖打开，扣放于平板旁8暴露5min（层流室暴露30min)，盖好立即送检9注意事项1揭盖后不可将盖内面朝上2开启平皿时应从室内由里至外揭盖3回收平皿时应从室外由外至里盖10计算公式11做好手卫生是预防和控制医院感染最有效、简单、经济的方法!12（二）手消毒效果监测•需做科室：有手术室科室、ICU、NICU、血透室供应室•采样方法：印压法、洗脱法、棉拭子法•采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样•采样频率：一般院感重点部门每月一次，发现院感流行趋势时，随时（及时监测）环境要求：人员流动少室内洁净区域13烧试管口14涂擦采样15烧试管口16棉拭子插入后烧试管口1718计算公式细菌总数（cfu/cm2）=平板菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）19手消毒产品检测（1）在使用现场，随机选定受试者。试验不少于30人次。•（2）消毒前，在受试者双手相互充分搓擦后，让受试者左手并拢，将无菌棉拭子在含10ml（或5ml）生理盐水或营养肉汤的试管中浸湿，于管壁上挤掉多余水分，在五指屈面指尖至指根，往返涂擦2遍，涂擦时不断转动棉拭子。采样后，以无菌操作方式将棉拭子采样端剪入试管内，作为阳性对照标本。20手消毒产品检测（3）根据消毒剂使用说明书的方法对右手进行消毒，手的卫生消毒作用时间为1分钟，外科洗手一般设定作用时间为3分钟。消毒后用含相应中和剂的采样液，与阳性对照组同样的方法对受试者右手上残留的自然菌采样1次，作为实验组样本。（4）分别将未用过的同批中和剂、采样液各1ml、棉拭子1-2份作为阴性对照组样本。2.评价规定：阳性对照组应有较多的细菌生长，阴性对照组应无细菌生长，对30人次手上自然菌的平均杀灭率≥90%，可判断为消毒合格。21采样时间•根据监测目的选择采样时间•1.进行常规物体表面监测，选择消毒处理后，从事医疗活动前；•2.若是医院感染暴发流行时的环境微生物检测，则尽可能对未处理的现场进行采样。•3.监测频度：Ⅱ类环境每月监测1次。当发生医院感染暴发流行时，应及时（随时）进行监测。22（三）物体表面采样采样时间：消毒处理后采样方法：棉拭子法、压印法采样面积：被采表面100cm2取全部表面被采表面≥100cm2，取100cm2对于门把手、玻璃等不规则的小物体直接在物体表面按一定顺序涂抹23标本采集注意事项•1.采取标本要有足够的样本数量且具有代表性,手术室，选择具有代表性采样地点，每个房间每种（如手术台、桌、灯等）表面不少于2点。•2.采样时，棉拭子处于潮湿状态，如处于饱和状态可将多余的采样液在采样管壁上挤压去除，不可使用干棉拭子采样。24用5cm×5cm的灭菌标准规格板，放在被检物体表面25烧试管口26用棉签蘸取中和剂27在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次28烧试管口29剪除或烧掉手接触部分30烧试管口31计算公式细菌总数（cfu/cm2）=平板菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）32（四）消毒剂浓度监测•监测方法：生物监测化学监测•采样时间：采取更换前或使用中的消毒液33生物监测•采样方法：用无菌注射器1支，在被采样消毒液容器内抽取3ml左右结果判断：染菌量≤100cfu/ml，未检出致病菌34化学监测（1）G-I型消毒剂浓度试纸1）过氧乙酸，二氯异氰尿酸钠、次氯酸钙、次氯酸钠、氯胺T、二氧化氯、含氯消毒剂和含次氯酸钠的清洗消毒剂等监测2）方法：取试纸条于消毒剂溶液中，片刻取出。半分钟内，在自然光下与标准色块比较，直接读出溶液所含有效成分浓度值，时间超过1分钟，着色逐渐消退。35使用方法（1）将试纸条浸于所测消毒剂溶液中，即刻取出，半分钟内在自然光下与标准色块比较，直接读出该溶液所含有效成分浓度值。l（2）当溶液有效成分1500mg/L时，为取得较准确的结果，可稀释至100-1000mg/L浓度后再进行检测。在计算浓度时，将比色板所得值乘以稀释倍数即可。36注意事项(1)测试结果应在试纸浸消毒药液后半分钟内观察并记录结果。若时间超过1分钟，试纸条颜色将逐渐消退。l(2)用后剩余试纸应及时放回原塑料袋内包好，以免受到环境中其它药物的影响。l(3)测试纸应置阴凉、避光、防潮处保存且在有效期内使用。37取出测试卡→旋紧瓶盖→指标色块完全浸没于待测消毒液中→沾下瓶盖上的纸垫→去除多余的液体→横置于瓶盖上等候5—8分钟（不要将色块面朝下，以免受到污染）→观察色块着色变化，若指示色块变成均匀黄色，表示溶液浓度﹥2.0%，若色块全部或仍有部分白色，表示溶液浓度﹤2.0%；测试方法（2）戊二醛浓度测试卡使用办法38使用中消毒剂细菌污染量检测采样方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml(或0.5ml）被检样液，加入9ml（或4.5ml）含相应中和剂混匀。结果判断:使用中的消毒剂、灭菌剂合格卫生学标准为：l使用中消毒液细菌菌落总数应≤100cfu/ml，不得检出致病菌；灭菌剂不得检出任何微生物为合格。注意事项：消毒剂细菌检测时采样液中一定要加相应的中和剂。39一次性医疗用品监测一次性卫生用品：指使用一次后即丢弃的，与人体接触并为人体生理卫生或卫生保健目的而使用的各种日常用品，如薄膜（或乳胶）手套、餐巾、纸巾、口罩、妇女经期卫生用品、床布等排泄卫生用品、避孕工具等。l消毒的一次性使用医疗用品：接触皮肤黏膜、无毒害、检验合格、出厂前必须经过消毒处理，可直接使用的用品。l灭菌的一次性使用医疗用品：指进入人体组织，无菌、无热源、无溶血反应和无毒性、检验合格、出厂前必须经过灭菌处理的可直接使用的用品。40灭菌的一次性医疗用品监测一、采样时间：日常检测：监测在灭菌处理后存放至有效期内采样。在医院感染暴发流行时怀疑与一次性医疗用品用关。1.采样方法：(1)在超净工作台或洁净层流间内，用无菌方法将拟检小件医疗器械：缝合针、针头、手术刀片等各3-5支，分别投入5ml的无菌生理盐水（或无菌营养肉汤）；41灭菌的一次性医疗用品监测(2)注射器则取3-5副在5ml无菌营养肉汤中，分别反复抽吸5次；(3)对大的医疗器械：手术钳、镊子等在无菌操作下取2份以上，用浸有无菌生理盐水（或无菌营养肉汤）的棉拭子反复涂擦表面采样，并将棉拭子投入到，盛有5ml无菌生理盐水（或无菌营养肉汤）的试管中，被采样本表面积﹤100㎝2取全部表面，被采样本表面积≥100㎝2，取100㎝2，采样后立即送检。无细菌生长为灭菌合格。42监测方法（常规监测）二、监测方法（常规监测）3.监测频率：每月一次。采样注意事项：注意无菌操作，避免采样过程污染。医疗用品的标准：进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、黏膜的医疗用品必须无菌。43灭菌物品抽样培养采样、培养方法同灭菌的医疗用品监测l将压力蒸汽灭菌后的物品取样进行培养，若培养结果阴性（无菌生长）可视为灭菌可靠。l监测频率：每月一次。44灭菌物品不合格指征包装不严密湿包现象超过存贮有效期限化学指示剂变色不合格生物监测结果阳性45紫外线消毒效果监测影响紫外线消毒效果的因素1.消毒对象：微生物对紫外线的敏感性不同，其抗力由大到小排列次序为真菌孢子＞细菌芽胞＞细菌繁殖体;生物数量越多，需要产生相同致死作用的紫外线照射剂量也越大。2.环境：微生物附着在悬浮的灰尘粒子中比在气溶胶中对紫外线有更大的抗力。3.空间大小：输出功率分布应≥1.5W/m3.4.整流器：整流器使用时间过长会使紫外线灯管照射强度明显降低.46影响紫外线消毒效果的因素5.照射剂量：l不同微生物所需照射剂量不同，一般细菌繁殖体所需照射剂量为10000uW.s/cm2，细菌芽胞为100000uW.s/cm2，病毒对紫外线的抵抗力介于细菌繁殖体和芽胞之间.所照射时间可按以下公式计算：T=C/RT为时间（秒）；C为所需照射剂量（uW.s/cm2）；R为灯管强度（uW/cm2）。47紫外线消毒效果监测内容日常监测：1.记录每次的具体照射时间，并累加该支灯管已经使用的时间。2.记录紫外线物理或化学监测结果并签名。物理监测：是利用紫外线照度计直接读出其辐射强度值的方法。监测方法（1）将待测紫外线灯管固定于测定架。（2）将测定波长为253.7nm的紫外线照度计探头置于被检紫外线灯下垂直距离1m的中央处。（3）开启紫外线灯5分钟后，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯的辐照值（uW/cm2）。48物理监测注意事项1.测定时电压应稳定在220V±5V，温度20-25℃，相对湿度＜60%；2.紫外线照度计必须在计量部门规定的有效期内使用3.紫外线照度仪至少1年标定1次。49紫外线灯强度结果判断标准普通30W直管型紫外线灯新灯管的辐照度值应≥90uW/cm2为合格；使用中（旧）紫外线灯辐照度值≥70uW/cm2为合格30W高强度紫外线新灯的辐照度值≥180uW/cm2为合格.50化学指示物监测紫外线化学指示卡主要用于检测紫外线灯的照射强度，以检验紫外线灯是否符合要求。此指示卡是根据紫外线光敏涂料可随照射强度呈相应色变的原理研制而成。51化学指示物监测方法（1）开启紫外线灯5分钟后，将化学指示卡置紫外线灯下垂直距离1M的中央处，有图案一面朝上。（2）照射1分钟（紫外线照射后图案中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色），观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，判断照射强度。紫外线化学指示卡主要用于检测紫外线灯的照射强度，以检验紫外线灯是否符合要求。此指示卡是根据紫外线光敏涂料可随照射强度呈相应色变的原理研制而成。52化学指示物监测方法（1）开启紫外线灯5分钟后，将化学指示卡置紫外线灯下垂直距离1M的中央处，有图案一面朝上。（2）照射1分钟（紫外线照射后图案中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色），观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，判断照射强度。结果判断：将指示卡中间光敏涂料的颜色与标准色块比较，可以判断出紫外线灯管照射强度的范围。紫外线灯管是否合格的判断标准同紫外线照度仪。53化学指示物监测注意事项（1）指示卡应获得卫生部批准，并在有效期内使用。（2）及时记录判断结果，放置时间过久，指示卡光敏涂料的颜色会随着时间变化而变淡。（3）指示卡应用避光纸包装，置于4℃冰箱内储存，以免光敏涂料遇日光照射不稳定变色而影响监测结果。（4）紫外线灯安装后及使用前应进行监测;使用中的灯管照射强度监测，应每6个月监测1次。监测时应特别注意照射距离和照射时间，以免影响检测结果的准确性。（5）测试时注意个人防护，避免灼伤眼角膜、皮肤。54内镜消毒灭菌效果监测1.常规监测（1）消毒剂浓度必须每日监测并做好记录，保证消毒效果。使用的消毒剂在有效期内。（2）消毒后的内镜每季度进行生物学监测并做好记录。灭菌后