第21章感染性疾病及其免疫检测

医学技术学院免疫教研室第二十一章感染性疾病及其免疫检测掌握：先天性感染、TORCH、性传播性疾病概念；C-反应蛋白、IL-6的常用检测方法及意义；乙肝五项常用检测方法；HIV初筛试验和确证试验结果解释和报告流程。熟悉：降钙素检测方法及意义；了解：细菌检测；真菌及寄生虫监测。第一节概述第二节细菌感染性疾病第三节真菌感染性疾病第四节病毒感染性疾病第五节TORCH感染第六节寄生虫感染第七节其他病原体感染第一节概述感染性疾病（infectiondiseases）指病原体破坏机体正常功能后产生的各种感染症状，包括传染病和非传染性疾病。免疫学标志物特异性标志物非特异性标志物第一节概述1.先天性感染：胎儿在母体内受到的感染，又称宫内感染。2.TORCH：弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等引起宫内感染时，可导致流产、死胎、畸形、发育异常，或智力低下、试听障碍等，俗称TORCH综合征，这些病原体成高致畸性病原体。掌握第一节概述3.性传播性疾病：通过亲密接触传播的传染病，包括淋病、梅毒、尖锐湿疣、艾滋病等。4.输血前感染筛查：输血前筛查项目有乙肝病毒、丙肝病毒、梅毒螺旋体病毒、HIV病毒。掌握第二节细菌感染性疾病一、非特异性标志物（一）降钙素原（PCT）检测方法：ELISA、化学发光免疫试验免疫渗滤/层析试验临床意义：全身性细菌感染或脓毒症、严重真菌和寄生虫感染。熟悉（二）C-反应蛋白（CRP)CRP是炎症标志物，也直接参与炎症过程检测方法：ELISA、速率散射免疫比浊。临床意义：CRP10mg/L心血管疾病风险评估；CRP＞10mg/L细菌感染、严重创伤、烧伤、心肌梗死、恶性肿瘤、结缔组织病。细菌感染急性期CRP；病毒感染时CRP变化不大掌握（三）IL-6检测方法：ELISA、CLIA和流式细胞术临床意义：用于感染性疾病的辅助诊断在肿瘤、自身免疫性疾病、类风湿性关节炎、烧伤时，IL-6可显著升高.掌握免疫学检查抗链球菌溶血素“O”抗透明质酸酶（ADH）抗DNA酶B抗体（DNA-B）A族/B族链球菌抗原肺炎链球菌抗原生物学性状化脓性疾病的常见细菌A群链球菌有较强侵袭力可产生多种酶和外毒素（一）链球菌二、链球菌感染了解2.临床意义抗O凝集效价≥1:80，抗H凝集效价≥1:160副伤寒沙门菌抗H凝集效价≥1:80双份血清效价增长4倍三、沙门菌感染伤寒沙门菌1.检测项目及方法血清凝集试验——抗O和抗HELISA——脂多糖和抗Vi了解抗-TB：ELISA、免疫渗滤/层析试验结核感染T细胞：ELIPOT优点：灵敏度和特异性更高缺点：操作复杂，成本高,不能区分既往感染和现症感染四、结核分枝杆菌感染1.检验项目及检测方法了解五、幽门螺旋杆菌感染检测项目：抗-Hp、Hp抗原、Hp尿素酶检测方法：抗体检测：ELISA、免疫印迹试验、免疫渗滤/层析试验抗原检测：ELISA、免疫渗滤/层析试验了解六、嗜肺军团菌感染检测项目：LP抗原（纤支镜刷检物、尿液）抗LP抗体（血清标本、纤支镜刷检物）临床意义：IgM和IgA作为近期感染的指标，抗原检测具有诊断意义了解第三节真菌感染性疾病的免疫检测真菌（fungus）的种类繁多，但能引起人类疾病的真菌仅有100多种。真菌感染除可引起表面感染外，部分真菌可以导致人类深部组织感染，甚至全身感染，严重者可致死亡。了解检验项目：真菌D-葡聚糖（G试验）半乳甘露聚糖（GM试验）检测方法：ELISA、CLIA临床意义一、深部真菌感染了解检验项目：肺孢子菌抗原和抗肺孢子菌临床意义：支气管灌洗术和纤支镜刷检物直接镜检可发现肺孢子菌，结合抗原检测可诊断肺孢子菌感染。抗体检测主要用于流行病学调查。二、类真菌感染了解第四节病毒感染性疾病一、肝炎病毒感染（一）甲型肝炎病毒(HAV)感染传播途径:污染食物和水传播疾病特点：急性；孕妇HAV不传胎儿。实验室诊断：1.特异抗体检测：ELISA；化学发光技术IgM早；IgG晚（甚至维持终生）2.抗原检测3.病毒分离4.分子诊断技术了解（二）乙型肝炎病毒感染传播途径:密切接触；母婴；血液；性检测项目：HBsAg—HBsAb;HBeAg–HBeAb;HBcAb;两对半---五项掌握（二）乙型肝炎病毒感染乙型肝炎病毒的诊断标志物乙型肝炎表面抗原HBsAg乙型肝炎表面抗体-抗-HBs乙型肝炎e抗原（HBeAg）乙型肝炎e抗体（抗-HBe）乙型肝炎核心抗原HBcAg乙肝核心抗体-IgM乙肝核心抗体-IgG乙肝病毒前S1抗原抗乙肝病毒前S1抗体乙肝病毒前S2抗原抗乙肝病毒前S2抗体1.常用检测项目及检测方法*HBsAg、抗-HBs、HBeAg、PreS1抗原----双抗夹心法ELISA、CLIA。*抗-HBe、抗-HBc--竞争法ELISA、CLIA。*抗-HBcIgM--捕获法ELISA、CLIA。熟悉2.临床意义--HBsAgHBV感染后首先出现标志物：HBsAg。（1）HBsAg是乙肝早期诊断和普查指标。（2）HBsAg阴性不能完全排除乙型肝炎。（3）如仅表现为HBsAg阳性者，传染性较弱（4）HBsAg转阴且出现抗HBs是最终治疗目标熟悉2.临床意义--抗HBs是一种保护性抗体。是机体感染恢复期、既往感染、接种乙肝疫苗的标志。接种疫苗后抗HBs浓度大于10mIU/ml才有保护作用。急性感染后期，HBsAg转阴后出现抗HBs。掌握2.临床意义--HBeAg是病毒复制的标志（1）一般见于HBsAg阳性者。（2）治疗过程中，定量检测HBsAg、HBeAg浓度降低，反映患者病情好转，治疗有效。熟悉2.临床意义--HBeAb无保护作用多出现于急性肝炎恢复期、慢性乙肝、肝硬化或无症状的HBsAg携带者等病人中。治疗近期目标:HBeAg消失HBeAb出现。熟悉2.临床意义--HBcAb是乙肝病毒存在的直接标志。无保护作用。IgM--早期HBV感染的特异性血清学标志IgG--既往感染标志。熟悉检验项目:抗HCV和HCV核心抗原检测方法：ELISA、CLIA、RIA、免疫印迹试验2.临床意义抗HCV不是中和抗体，无保护性抗HCV是HCV感染的标志性物质HCVIgM阳性可作为HCV活动性复制的血清学标志HCV-IgM与慢性丙肝患者的急性发作有关。（三）丙型肝炎病毒感染了解（四）丁型肝炎病毒感染生物学性状HDV是一种缺陷病毒丁肝的临床表现一定程度上取决于同时伴随的HBV感染状态HDV是一种单股负链RNA病毒检验项目HDVAg、抗-HDVELISA免疫渗滤/层析了解（五）戊型肝炎病毒感染戊型肝炎病毒是一单股正链无包膜的RNA病毒,引起经胃肠传播的肝脏疾病检验项目抗-HEV-IgG抗-HEV-IgMHEVAg检测方法：ELISA了解九、人类免疫缺陷病毒感染人类免疫缺陷病毒（HIV）感染可引起获得性免疫缺陷综合征（AIDS）。抗体检测是HIV感染的金标准。RNA和抗原检测可发现窗口期感染者。CD4+T和CD8+T检测可用于感染者免疫状况评价，辅助临床进行疾病分期。掌握检验项目：抗-HIV、抗-HIV抗体确认试验、HIV抗原抗体联合检测、抗-HIVIgG亲和力、HIVp24抗原初筛实验：ELISA、CLIA、胶体金免疫层析法、胶体金免疫渗滤试验、明胶颗粒凝集实验、胶乳凝集实验确证实验：免疫印迹、免疫荧光实验1.常用检测项目及方法掌握2.临床意义(1)初筛实验：HIV(-)不能排除窗口期感染，可检测HIVRNV或p24抗原。**初筛结果处理流程：HIV(-)正常报告；HIV(+)用原有试剂和另外一种不同原理(或厂家)的试剂,或另外两种不同原理或厂家的试剂进行复检试验,两种试剂均呈阴性反应则报告(-);如均为阳性或一阴一阳需确证试验.掌握2.临床意义(2)确认试验处理流程：使用HIV-1/2混合型试剂进行检测.阴性反应报告HIV(-)；阳性反应报告HIV(+);HIV(+)建议4周后随访检测，可检测核酸或p24抗原；仍不能确定者，随访到8周。必要时检测核酸或P24抗原.疑难样品送国家实验室进一步分析.掌握流产、死胎、胎儿畸形等先天性感染弓形体、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等。第五节TORCH感染生物学特性弓形虫（toxoplasma，TOX）寄生于各种有核细胞内，引起弓形虫病。孕妇初次感染TOX可通过胎盘传染给胎儿，可出现死胎、流产、死产、脑积水等。二、弓形虫感染（1）检验项目及检测方法TOX抗原、抗-TOX和抗-TOXIgG亲和力ELISA、CLIA、免疫渗滤/层析试验（2）临床意义血清TOX抗原阳性反应提示弓形虫感染TOX感染后7-8天出现抗-TOXIgM；抗-TOXIgG用于既往感染诊断二、弓形虫感染生物学特性风疹是由风疹病毒（rubellavirus，RUV）引起出疹性呼吸道感染病。病后可获得终身免疫力孕早期感染可导致胎儿流产、死胎或出生后耳聋、失明、智力障碍等先天性风疹综合征属RNA病毒仅有一个血清型三、风疹病毒感染抗-RVIgM和抗-RVIgGELISA、CLIA检验项目免疫渗滤/层析试验检测方法抗-RVIgM出现早，消失快，近期感染的指标抗-RVIgG单独阳性反应提示既往感染，与抗-RVIgM同时阳性反应，恢复期血清抗体效价增高4倍以上，提示近期感染新生儿出生时如有特异高效价IgM抗体，提示宫内RV感染2.临床意义生物学性状由人巨细胞病毒(HCMV)引起的一种全身性感染综合征巨细胞包涵体病属疱疹病毒科核心为双股线形DNA四、巨细胞病毒感染免疫学诊断检验项目CMVIE+E+PP65抗原、抗-CMV和抗-CMVIgG亲和力。检测方法抗原检测：ELISA、免疫荧光试验抗体检测：ELISA、CLIA、免疫渗滤/层析试验巨细胞病毒感染产后婴儿2.临床意义外周血CMV抗原检测——活动期感染早期诊断IgM抗体可持续4-8个月，新生儿IgM阳性反应提示宫内CMV感染。IgG抗体用于流行病学调查，双份血清抗体效价增高4倍以上，提示近期感染四、巨细胞病毒感染生物学性状单纯疱疹病毒（HSV）是一种DNA病毒HSV-1型主要引起生殖器以外的部位HSV-2型主要引起生殖器部位皮肤粘膜的感染先天感染有宫内感染、产道感染、产后接触感染五、单纯疱疹病毒感染检验项目：HSV抗原、抗-HSV、抗-HSV-1、抗-HSV-2抗原检测方法：免疫荧光法、ELISA法、免疫渗滤/层析试验抗体检测方法：ELISA法、CLIA、免疫渗滤/层析试验2.临床意义直接检测组织或分泌物中的HSV抗原可用于早期诊断感染后1-2周出现抗-HSVIgM阳性反应；新生儿IgM阳性反应提示宫内HSV感染。急性期和恢复期双份血清IgG效价增高4倍以上，提示HSV近期感染五、单纯疱疹病毒感染第六节寄生虫感染检验项目：疟原虫抗原和抗疟原虫抗体抗原检测：ELISA、RIA抗体检测：ELISA、荧光免疫试验临床意义：检测疟原虫抗原，结合临床症状可诊断疟疾抗体主要用于疟疾的流行病学调查和辅助诊断一、疟原虫感染血吸虫病（大肚子病）血吸虫二、血吸虫感染检验项目：血吸虫抗原、抗血吸虫抗体抗原检测方法：ELISA抗体检测方法：ELISA、免疫印迹试验临床意义：抗原检测是血吸虫感染诊断的重要依据；抗体检测用于流行病学调查二、血吸虫感染三、丝虫感染丝虫病由斑氏丝虫和马来丝虫寄生于淋巴系统所引起的慢性寄生虫病检验项目：血清中丝虫抗原和抗丝虫抗体抗原检测：ELISA抗体检测：ELISA、免疫印迹试验临床意义：抗原用于感染的辅助诊断，抗体用于流行病学调查四、华支睾吸虫感染华支睾吸虫病又称肝吸虫病，是由寄生在人的肝胆管内所引起的以肝胆病变为主的一种人畜共患寄生虫病。感染的确诊方法：粪便镜检华支睾吸虫卵检验项目：肝吸虫抗原和抗肝吸虫抗体抗原检测：ELISA、荧光免疫试验抗体检测：ELISA、荧光免疫试验、免疫渗滤/层析试验、间接血凝试验临床意义：抗原检测用于肝吸虫感染的辅助诊断，抗体检测用于流行病学调查四、华支睾吸虫感染猪囊尾蚴病