HBV荧光定量PCR技术在乙肝临床检测中的意义

HBV荧光定量PCR技术在乙肝临床检测中的意义1、荧光PCR定量检测HBV的优点l灵敏性高，可检出血清学方法不能发现的病例lHBVDNA是病毒血症的直接证据l可检测HBV变异株l可以对血清中的HBVDNA进行准确定量2、荧光PCR在乙肝诊断中的意义A)提高对患者的诊断率，检出隐蔽感染–我国人群中约有1-3%HBsAg阴性的乙肝携带者。HBV感染后HBsAg（-）首先与检测方法的灵敏度有关，其次为S基因变异。–我国较多的非甲—戊型肝炎经进一步的检测证实很多为漏检的HBV感染。–PCR检测在以下情况下可帮助明确诊断：血清学指标阴性的无症状慢性感染；感染的窗口期；病毒变异株感染B)当血清学的结果有疑问或与临床表现不符合时，可作为确诊可疑病人的重要手段。-在乙肝变异株感染时，HBeAg和/或HBsAg阴性，这些变异株可逃避免疫监视系统，常常会引起较严重的肝损害和临床症状，但血清学指标却与病情的严重程度不一致，此时PCR检查显得尤为重要。C)对HBV传染性的估计D)PCR方法可修正血清学诊断的不足，有助于对病情的全面了解E)PCRHBVDNA定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能F)PCR检测HBVDNA可作为乙肝病人的严格判愈指标3、定量PCR方法用于乙肝治疗的意义1)定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能由于HBVDNA是乙肝病毒存在和复制的直接证据，因此我们可以通过动态检测血清HBVDNA含量而对各种乙肝病人病毒活动情况有更真实和全面的了解，使人们对乙肝的认识上升到一个更高的水平，对科研、临床以及流行病研究均可提供有力的依据。2)选择治疗时机PCR方法检测患者血中病毒含量，有利于明确乙肝病毒活动复制情况，决定是否接受治疗以及采取何种治疗方案，对既往依据临床表现、肝功及血清学指标决定治疗的方法是一个很好的补充。3)估计治疗反应研究表明，血清乙肝病毒高拷贝者对干扰素治疗不敏感，低拷贝者对干扰素治疗较敏感。4)观察药物疗效–在应用干扰素治疗治疗后，病人HBeAg往往有明显下降，但HBV-DNA的消失比HBeAg的消失早几周到几个月出现，更适于指导临床用药。–目前应用的抗病毒药物的疗效个体差异很大，对药物无反应者，治疗后HBVDNA仅轻微下降或无变化；对药物有反应者，HBVDNA则明显下降至不能测出。5)选择治疗方案–慢性乙肝病人使用干扰素治疗，只有30-50%的病人有反应；干扰素价格较昂贵并有一定的副作用，因此对采用干扰素治疗的病人，在治疗前后作HBVDNA浓度测定，有利于观察药物疗效，对治疗无反应者，应及时更换治疗方案，降低不必要的费用。6)治疗后随访及检测复发–在抗病毒治疗结束后，用PCR方法继续监测HBVDNA定量，定期复查，可以及时发现复发病人，及早给予治疗。7)抗病毒新药的研制–HBVDNA定量方法可在体外及动物实验中检测抗病毒药物应用后病毒量的变化，8)在临床应用中寻找更好的治疗方案4、针对拉米夫定治疗乙型肝炎的定量检测建议根据《拉米夫定临床应用指导意见》（由“拉米夫定临床应用专家指导小组”制定），我们提出了以下对乙型肝炎病人的定量检测建议：●病人的选择：HBVDNA定量检测；●观察项目及随访：–血清病毒学标志：HBeAg，抗HBe，HBVDNA，●治疗目标和疗效判断：–病毒学标志改善：HBV-DNA阴转（斑点杂交或定量法降低2log10）;●停药标准（使用至少一年）：–达显效病人，继续用药3-6个月，仍为显效者，可停药；–停药后，继续随访观察6-12个月，每3-6个月复查HBVDNA。