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实验：培养液中酵母菌种群数量的变化•实验原理：•探究问题：•提出假设：酵母菌可以用液体培养基来培养,培养液成分、空间、pH、温度等因素会影响酵母菌种群的增长培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？在资源和空间有限的环境中，酵母菌的种群呈“S”型增长1需要准备的材料及用具探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板、滴管、显微镜等，都是由老师提供目的要求1、学习使用血细胞计数板进行微生物计数2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、体会影响种群数量变化的因素2血细胞计数板3血细胞计数板的结构血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。4大方格中方格小方格5方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容积为0.1mm3；大方格的长和宽各为2mm，深度为0.1mm，即2mm×2mm×0.1mm，其容积为0.4mm36计数室通常也有两种规格16×25型：即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格25×16型：即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。不管计数室是哪一种构造，其每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。72、计数16×25型：一般取四角的四个中方格（100个小方格）计数25×16型：一般计数四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数。8盖玻片下的培养液厚度为0.1mm，请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数，换算成10ml培养液中酵母菌总数的公式。（大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容积为0.1mm3；)（1ml=1cm3=1000mm3）每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式（1）16格×25格的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数×4×106（×稀释倍数）（2）25格x16格的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数×4×106（×稀释倍数）9大方格的长和宽各为2mm，深度为0.1mm，其容积为0.4mm3。则：每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式（2mm×2mm）：（1）16格×25格的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数×106（×稀释倍数）（2）25格x16格的血细胞计数板计算公式:酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数×106（×稀释倍数）101.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小方格组成，若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有个。5×400×10000×10＝2×108112、检测员将1mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻多少个。＝n/80×400×10000×10＝5n×10512怎样进行酵母菌的计数？提示：对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。13注意事项•从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试管震荡几次，目的是什么？•本实验需要设置对照吗？•本实验需要做重复实验吗？目的：使培养液中酵母菌分布均匀，以保证估算准确，减少误差不需要，因为本实验在时间上形成自身前后对照需要，提高实验数据的准确性14注意事项•如果计数时，一个小方格中酵母菌过多，难以计数，应该采取什么措施？•对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？可将培养液稀释一定倍数后再计数。目的是方便计数计相邻两边及其夹角上的酵母菌计数方法：方格内部及相邻两边及其夹角上的酵母菌15血细胞计数板的如何清洁？血细胞计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。怎样记录结果？怎样表怎样设计？首先通过显微镜观察，估算出10ml培养液中酵母菌的初始数量（N0）,在此之后，每天同一时间，取出各组试管，用血细胞计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。16（4）计数计数：首先取样，每天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀，正确地使用1mL刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里，然后用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。如记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当稀释。参考1：一次实验数据记录表参考2：出A、B、C各个处理的曲线图1718酵母菌的种群数量在资源和空间有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。19201、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作过程如下：（1）把酵母菌培养液放置于冰箱中培养，（2）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（3）到第七天取样计数，请纠正其错误：（1）___________________________（2）__________________________（3）_________________.该同学用25格x16格,其中长和宽各为2mm,深度为0.1mm的血球计数板计数,取五个中格读取酵母菌有40个,其中稀释了10倍,则1ml菌液中所含的酵母菌个数为_____________将静置改为轻轻振荡几次.放在适宜温度下培养.连续七天取样计数.5×10621