发酵罐的操作流程

生物制药生产性实训基地仪器设备标准操作规程第1页共7页文件名称50L发酵罐操作规程文件编号2014111102编制人张婉月徐洁严梦迎臧赢陈孝颜编制日期2014/11/11页码/页数一．目的：为了确保发酵产品安全正常生产，建立50L发酵罐设备标准操作规程。二．适用范围：50L发酵罐的操作三．责任人:1、实验员：负责生产现场水、电、气及生产设备的正常使用;使用生产用原辅料及检测设施。2、指导老师：指导学生了解发酵设备结构，熟悉掌握发酵操作规程，安全使用发酵罐系统。3、操作者：遵守安全管理规定，严格按照标准操作规程操作。四、操作步骤发酵罐内部构造示意图第一步、准备工作1.检查压力表是否为零，若不是则开对应的阀门调零。2.检查阀门是否为关闭状态，若不是则顺时针旋转关闭。3.检查蒸汽发生器上的压力表不得低于0.2MPa。4.检查空压机的压力表不得低于0.2MPa。生物制药生产性实训基地仪器设备标准操作规程第2页共7页5.校正温度和pH电极：温度用沸水或冰水校正，pH用标准溶液校正。6.检查发酵罐的密封性：关F21，F16，开F11，F15，使发酵罐的压力表为0.1MPa，保持5min，再关F11，F15。第二步、空气管道的消毒打开F3，F14，微开F12，F13（转两圈），等到F4均匀的蒸汽时，关闭F13，F12，微开F14，调节F3，使空气管道的压力表维持在0.1MPa，30min，关F14，F3。开F11，F14，使空气管道压力保持在0.1MPa，当有F14干燥冷空气排出时，微开F14，调节F11，使空气管道的压力保持在0.1MPa。第三步、空消开F4，F22，排冷凝水，当F22有均匀蒸汽排出时，关F22，开F21，F16，排空气，当F16有均匀蒸汽排出时，发酵罐的压力为0.1MPa。微开F16，调节F21（关F21或F4），使发酵罐压力保持在0.1MPa。30min.关F21、F4，大开F16进行泄压，使发酵罐压力到微正压0.02~0.03MPa，再关F16.生物制药生产性实训基地仪器设备标准操作规程第3页共7页第四步投料第五步、实消1.开F2，F37（排污管），F16，打开手动搅拌，当发酵罐内温度达到80—90度时，关F2，F37，手动搅拌。2.开F4，F22，排冷凝水，当F22有均匀蒸汽出现时，关F22，开F21。当F16生物制药生产性实训基地仪器设备标准操作规程第4页共7页有均匀蒸汽出现时，关F16，当发酵罐压力升到0.1MPa时，微开F16，调节F21，使发酵罐压力保持在0.1MPa，30min。3.关F21，F4。然后大开F16泄压到微正压（0.02-0.03MPa）。再关F16.第六步、参数设定生物制药生产性实训基地仪器设备标准操作规程第5页共7页第七步、冷却开F33，F32(通夹套冷却水)，在控制面板上开手动冷却，手动搅拌。当发酵罐压力降至0.05MPa时，微开F15，调节F11，空气管道压力回升到0.1MPa。关F15，调节F11。罐内压力保持在微正压，当温度降到90度时，关手动搅拌，大开F15，同时调节F11，使空气管道压力保持在0.1MPa。开F16，泄压到发酵罐的压力至微正压。当温度降至设定温度时，关F33，F32，关F16，，调节F11、F15，至F15完全关掉，使空气管道压力保持在0.1MPa，微开F16，泄压到微正压，关F16。第八步、接种1.用酒精棉球擦洗双手和种子罐（由上到下）2.在接种圈内滴加酒精并点燃，围在接种口处3.带上隔热手套，用扳手将螺帽拧下，过下火焰之后放在干净器皿中4.将接种瓶在火焰旁拔下棉塞，瓶口过下火焰，之后迅速悬空倒入发酵罐内，将接种瓶放一旁。5.用扳手夹住螺帽过下火焰，之后拧紧并用湿抹布熄灭接种圈内的火焰。第九步、保温在控制面板上的加热打到自动上，开F32生物制药生产性实训基地仪器设备标准操作规程第6页共7页第十步、取样1.准备好已消毒的空三角瓶2.将三角瓶上的报纸拆掉，用手压住纱布，然后开F21，F22，先流掉一部分，之后用三角瓶悬空接溶液，并迅速塞上纱布。3.关F21，再开F4进行消毒灭菌，之后关F4，F22。注意事项：1.最高工作压力不大于0.2Mpa，进罐空气压力应不大于0.2Mpa，最高消毒温度为126培养基装量：5L罐最高不超过4L，10L罐最高不超过8L，最少装量以所有的电极都没于液面以下为准。2.在过滤器消毒时，流经空气过滤器的蒸汽压力应在0.12～0.14MPa之间，最高不得超过0.17MPa。压力过低将造成灭菌不彻底，压力过高则空气过滤器滤芯有可能被损坏而失去过滤能力。3.在实消结束后冷却时，发酵罐内严禁产生负压，以免损坏设备或造成污染。开始控温前把注水开关打开，确保夹套中有水4.接种时要保证无菌环境，需要在进料口放置火圈。5.发酵过程中，罐压应维持在0.03～0.05MPa之间，以免引起污染。6.发酵结束后数据存盘，关闭总电源前，请将控制器退回主菜单，然后按Ctrl+F6生物制药生产性实训基地仪器设备标准操作规程第7页共7页关闭控制程序，然后关闭电源。7.运行结束后，关闭自来水阀，空气源，蒸汽发生器。8..每次移动发酵罐的时候都要先把溶氧电极和pH电极取下来，防止在挪动的过程中碰撞损坏电极。9.手动清洗罐体前要先取下溶氧和pH电极，再打开发酵罐的盖子，清洗时要用柔软的棉布轻轻擦洗内部，绝对不可以使用硬物刮发酵罐的内壁。否则以后的发酵罐容易染菌。10.使用发酵罐应登记，使用后由负责人检查签字。