实验4——DNS法测还原糖

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资源描述

1.实验原理在氢氧化钠和丙三醇存在下,还原糖能将3,5-二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基,生成氨基化合物。此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色,在540nm波长处有最大吸收,在一定浓度范围内其吸光度与还原糖含量呈线性关系2.适用范围及特点此法适用于各类食品中还原糖含量的测定,具有准确度高、重现性好、操作简便、快速等优点,尤其适用于大批样品的测定。3.实验试剂3,5-二硝基水杨酸溶液:称取6.5g3,5-二硝基水杨酸溶于少量水中,移入1000mL容量瓶中,加入2mol/L氢氧化钠溶液325mL,再加入45g丙三醇,摇匀,冷却后定容到1000mL。4.测定方法准确吸取0、2、3、4、5、6、7mg/mL的葡萄糖标准溶液各1mL,样液2mL,分别置于25mL比色管中,各加入3,5-二硝基水杨酸溶液2mL,用蒸馏水补齐至10mL刻度线,置沸水浴中煮5min显色,然后以流水迅速冷却,用水定容到25mL,摇匀。以空白调零,在540nm处测定吸光度,绘制标准曲线,计算样品中还原糖的含量。4.结果计算还原糖(%)=A×V定W样×V测×100其中:A——从标准曲线上求得的葡萄糖质量,mgV定——样品溶液定容的体积,mLW样——样品的质量,mgV测——测定时的取样体积,mL

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