分子机制研究试验设计

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分子机制研究实验设计龙喜带教授(上海市曙光学者、广西十百千第二层次人选)主要内容分子机制设计基础A-B-C设计模式A-B-C设计案例分子机制生物大分子:核酸蛋白质疾病/现象分子A分子B分子C设计基础(1)细胞与生物功能核、质、膜细胞骨架细胞周期细胞凋亡细胞通讯设计基础(2)生物大分子DNA:基因与非基因mRNA:5’-UTR、3’-UTR、CDSProtein:空间结构、修饰、转运、代谢设计基础(3)大分子物质关系RNAProteinDNA设计基础(4)遗传信息的传递转录RNA剪接翻译翻译后修饰设计基础(5)生物信号通路设计基础(6)生物信号通路Web:设计基础(7)研究对象体外实验:细胞模型体内试验:动物模型、临床实验非体内外实验:离体样本设计基础(8)研究技术定性分析技术:IHC、IF、IP、ChIP定量分析技术:IHC、WB、RT-qPCR定位分析技术:IHC、ISH设计基础(9)大分子检测技术蛋白质:IHC、IF、WB、ELISA核酸:PCR、印迹核酸-蛋白质:CHIP、Luc、EMSA蛋白质-蛋白质:IP核酸-核酸:EMSA设计基础(10)细胞功能检测技术细胞周期:流式细胞凋亡:IHC、酶标、流式细胞迁移:transwell细胞增殖:CCK-8、细胞计数A-B-C设计方案A:研究的靶分子C:(1)疾病如炎症、肿瘤等(2)生命现象B:机制(1)单个分子或几个分子(2)通路研究内容CAB总体思路研究内容研究与分析A在C中的作用研究与分析上述作用的机制(即B)研究与分析B在A-C中的必要性研究与分析A-B-C的科学价值具体设计研究方案(1)研究与分析:过表达A对C的影响研究与分析:敲低A对C的影响研究与分析:补救A对C的影响影响:如增殖、凋亡、迁移功能、结构等研究与分析A在C中的作用研究方案(2)研究与分析:可能机制(B)研究与分析:过表达A对B的影响研究与分析:敲低A对B的影响研究与分析:补救A对B的影响研究与分析上述作用的机制研究方案(3)研究与分析:并过表达B后对C的影响研究与分析:敲低B对C的影响研究与分析:补救B对C的影响以上过程应结合:Ahigh和Alow研究与分析B在A-C中的必要性研究方案(4)研究与分析:A-B-C临床诊断价值研究与分析:A-B-C临床治疗价值研究与分析:A-B-C临床预后预测价值研究与分析A-B-C的科学价值A-B-C设计案例TWIST2的抑癌作用研究设计分析A:TWIST2C:对肿瘤的抑癌作用B:机制?研究内容设计研究与分析TWIST2在肿瘤中的抑癌作用研究与分析上述作用的机制(即B)研究与分析B在TWIST2–抑癌作用中的必要性研究与分析TWIST2-B-抑癌作用的科学价值具体设计原案例内容研究TWIST2对更多白血病细胞生长的影响研究TWIST2对OCL-AML2细胞及小数Baf3/BCR-ABL细胞只白血病能力的影响研究TWIST2对AML和CML患者原代细胞体外生长的影响鉴定TWIST2抑制白血病细胞生长所需的结构域原案例内容鉴定与TWIST2表达相关的基因表达谱鉴定受TWIST2调控的可能基因验证上述所鉴定的差异基因该案例研究内容分析研究内容设计与标题吻合研究内容合理科学价值明确研究思路清晰THEEND

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