分子机制研究实验设计龙喜带教授(上海市曙光学者、广西十百千第二层次人选)主要内容分子机制设计基础A-B-C设计模式A-B-C设计案例分子机制生物大分子:核酸蛋白质疾病/现象分子A分子B分子C设计基础(1)细胞与生物功能核、质、膜细胞骨架细胞周期细胞凋亡细胞通讯设计基础(2)生物大分子DNA:基因与非基因mRNA:5’-UTR、3’-UTR、CDSProtein:空间结构、修饰、转运、代谢设计基础(3)大分子物质关系RNAProteinDNA设计基础(4)遗传信息的传递转录RNA剪接翻译翻译后修饰设计基础(5)生物信号通路设计基础(6)生物信号通路Web:设计基础(7)研究对象体外实验:细胞模型体内试验:动物模型、临床实验非体内外实验:离体样本设计基础(8)研究技术定性分析技术:IHC、IF、IP、ChIP定量分析技术:IHC、WB、RT-qPCR定位分析技术:IHC、ISH设计基础(9)大分子检测技术蛋白质:IHC、IF、WB、ELISA核酸:PCR、印迹核酸-蛋白质:CHIP、Luc、EMSA蛋白质-蛋白质:IP核酸-核酸:EMSA设计基础(10)细胞功能检测技术细胞周期:流式细胞凋亡:IHC、酶标、流式细胞迁移:transwell细胞增殖:CCK-8、细胞计数A-B-C设计方案A:研究的靶分子C:(1)疾病如炎症、肿瘤等(2)生命现象B:机制(1)单个分子或几个分子(2)通路研究内容CAB总体思路研究内容研究与分析A在C中的作用研究与分析上述作用的机制(即B)研究与分析B在A-C中的必要性研究与分析A-B-C的科学价值具体设计研究方案(1)研究与分析:过表达A对C的影响研究与分析:敲低A对C的影响研究与分析:补救A对C的影响影响:如增殖、凋亡、迁移功能、结构等研究与分析A在C中的作用研究方案(2)研究与分析:可能机制(B)研究与分析:过表达A对B的影响研究与分析:敲低A对B的影响研究与分析:补救A对B的影响研究与分析上述作用的机制研究方案(3)研究与分析:并过表达B后对C的影响研究与分析:敲低B对C的影响研究与分析:补救B对C的影响以上过程应结合:Ahigh和Alow研究与分析B在A-C中的必要性研究方案(4)研究与分析:A-B-C临床诊断价值研究与分析:A-B-C临床治疗价值研究与分析:A-B-C临床预后预测价值研究与分析A-B-C的科学价值A-B-C设计案例TWIST2的抑癌作用研究设计分析A:TWIST2C:对肿瘤的抑癌作用B:机制?研究内容设计研究与分析TWIST2在肿瘤中的抑癌作用研究与分析上述作用的机制(即B)研究与分析B在TWIST2–抑癌作用中的必要性研究与分析TWIST2-B-抑癌作用的科学价值具体设计原案例内容研究TWIST2对更多白血病细胞生长的影响研究TWIST2对OCL-AML2细胞及小数Baf3/BCR-ABL细胞只白血病能力的影响研究TWIST2对AML和CML患者原代细胞体外生长的影响鉴定TWIST2抑制白血病细胞生长所需的结构域原案例内容鉴定与TWIST2表达相关的基因表达谱鉴定受TWIST2调控的可能基因验证上述所鉴定的差异基因该案例研究内容分析研究内容设计与标题吻合研究内容合理科学价值明确研究思路清晰THEEND