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一、名词：1、生物制品：是研究各类生物制品的来源、结构、功能、特点、应用、生产工艺、原理、现状、存在问题与发展前景等诸多方面知识的一门学科。2、疫苗：由性质和作用不同是物质共同组成的复合物。3、灭活疫苗：又称死疫苗，是指用物理或者化学方法将具有完整的病原微生物杀死，使其丧失感染性和毒性但仍保持免役原性，并结合相应的佐剂而制成的疫苗。4、减毒疫苗：筛选出毒力高度降低或无毒的活的病原微生物而制成的疫苗。5、亚单位疫苗：将病原体中能诱导保护性免疫应答的目的抗原编码基因克隆后，插入适当的原核或真核表达载体质粒；再将重组质粒导入细菌、酵母或哺乳动物中高效表达目的基因，分离、提取、纯化目的蛋白而制成。6、遗传重组疫苗：是指利用经遗传重组方法获得的重组微生物制成的疫苗。7、基因工程疫苗：即遗传工程疫苗，是指使用重组DNA技术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物或重组体本身制成的疫苗。8、逆向疫苗学：测病原微生物的核酸，由此预测抗原表达的核酸位点基因。9、核酸疫苗：又称基因疫苗或DNA疫苗，就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应。10、活载体疫苗：又称重组载体疫苗，是目的抗原的编码基因导入活载体中，构建重组菌株；目的基因可随重组菌株在宿主体内的增殖而大量表达，从而诱发相应的免疫保护作用。11、CCID50:即半数组织细胞培养感染量，指用不同剂量的病毒处理细胞，使半数组织细胞感染病毒的剂量。12、LD50：即半数致死量，一定时间内杀死全部实验动物中半数所需剂量。13、CPE：即细胞病变，多数病毒在敏感细胞增殖，可引起细胞代谢等方面的变化，发生形态变化。二、简答：1、生物制品质量检验主要包括哪些内容？答：生物制品的理化鉴定、生物制品的安全鉴定、生物制品的效力鉴定；（1）生物制品的理化鉴定又包括物理性状鉴定和化学性状鉴定；（2）生物制品的安全鉴定又包括一般安全性检查、杀毒、灭活和脱毒情况的检查、外源性污染检查和过敏性物质检查；（3）生物制品的效力鉴定又包括动物保护力试验、活菌数和活病毒滴度测定、血清学试验和其他相关的鉴定和评价。2．比较活疫苗与死疫苗各有哪些优缺点？答：活疫苗的优缺点：（1）优点：可在体内繁殖，免疫力持久，产量高，成本低、多数只需免疫一次，接种剂量小（2）缺点：有毒力增强和反祖危险抗原干扰现象保存条件苛刻。死疫苗的优缺点：（1）优点：不能在体内繁殖，性质稳定，安全性高、有利于制备多价或多联疫苗、比较安全，不发生全身性副反应，无毒力反祖现象、受外界影响小，有利于保存运输（2）缺点：免疫剂量大，需多次免疫，成本高只能诱导机体产生体液免疫、通常需要用佐剂或携带系统来增强其免疫效果。3、简述生物制品生产中常用的减毒方法有哪些？答：（1）体外减毒：体外连续传代培养减毒；（2）冷适应筛选：温度可能改变病毒的特性，在通常情况下，将病毒在低温条件下进行连续或逐步传代，可以诱导产生基因组多处突变或损害的减毒冷变异株，这种冷变异株常伴有毒力减弱和各种特征性标志。（3）诱变法：利用化学、物理或生物学等方法的诱变也可以使细菌或病毒的基因发生改变，通过筛选而获得毒性减弱可用疫苗生产的菌/毒种。4、简述禽胚尿囊腔接种病毒的实验过程。答：选7-11日龄鸡胚照检标出气室边界和胚胎位置，避开血管做标记，用碘酒消毒标记处的卵壳，在标记处钻孔，再次用碘酒消毒钻孔区；将注射剂针头经孔刺入尿囊胚，注入0.1-0.2ml接种物，用蜡熔化封孔，33℃-35℃孵化48-72h.5、基因工程亚单位疫苗抗原基因的选择原则是什么？答：（1）一般选择病原体表面糖蛋白编码基因；（2）对于易变异病毒，可选择各亚型共有的核心蛋白的主要保护型抗原基因序列。6、简要回答目前用于研究转基因植物疫苗常用的植物有哪些？各种植物具有哪些特点？答：常用的有香蕉、烟草、马铃薯、番茄等，在烟草中已经成功表达了链球菌变异株SpaA蛋白疫苗、防治霍乱和乙肝疫苗及疟疾孢子虫抗原等；在马铃薯中表达了乙肝病毒表面抗原基因和大肠杆菌肠毒素基因；在番茄中已表达了狂犬病毒糖蛋白和乙肝表面抗原蛋白，天花病毒表面抗原又在番茄中表达成功。7、核酸疫苗的定义是什么？详细阐述构建核酸疫苗的基本要素是什么？答：核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗，就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应；核酸疫苗构建的基本要素：（1）基因疫苗的构建：未使用高保真的酶；切胶时不迅速，紫外线照射发生诱变。（2）重组质粒的筛选与鉴定：主要有表型筛选、酶切测定及测序鉴定的顺序进行。8、简述生物制品动物保护力实验及原理。答：生物制品动物保护力实验是将疫苗免疫动物后，再用同种的活菌、活毒或毒素攻击，从而判断制品的保护水平。9.病毒性细胞疫苗制造工艺流程。大图10.简述细胞增殖病毒-异步接毒技术？答：（1）异步接毒：细胞生长成单层后，倒去生长液，按维持液的1%—10%（V/V）量接毒，37℃吸附1小时后加入维持液，多数病毒用此法；（2）同步接毒：种植细胞的同时，或在种植细胞4小时内将病毒接入，主要用于病毒复制发生在细胞有丝分裂盛期的病毒；（3）收毒：病毒在敏感细胞内增殖，在CPE达80%左右时，收获反复冻融多次使病毒释放，3000rpm离心15-20分钟，除去细胞碎片，取上清病毒液-20℃保存。三、论述1、一些高危型人乳头瘤病毒感染是女性宫颈癌的主要发病原因，该病毒为DNA病毒，其病毒的外壳蛋白L1和L2可在细菌和酵母载体中很好表达，具有很好的免疫效果。请以HPV58型为例设计实验方案，制备基因工程疫苗。2、已知药物蛋白质X等电点为6，设计一个利用阴离子交换柱从混有该蛋白的样品中纯化该蛋白的实验。