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静脉采血(真空采血器法)SOP文件1.静脉穿刺前准备⑴确保穿刺用托盘准备好，内容包括所有采血用具（手套、止血带、真空采血管、消毒液、棉签等）。⑵所有的样本管编号或贴上标签。⑶请患者准备。做血液检验项目的病人，一般要求采血前禁食8--12小时，采血的前一天避免吃高脂肪、高蛋白类食物，避免饮酒。⑷查看检验单，查对检验单上病人姓名、性别、年龄等项目与病人是否吻合，耐心检查需要空腹血检验的项目，询问病人是否8小时以内没有能量摄入；需要增添项目时先与出具检验申请单的医生联系。⑸洗手，带上手套，并注意常规防护。⑹在受试者的穿刺位以上约5～8厘米处，紧紧地系上止血带，但不能太紧以至受试者不舒服,止血带的捆绑时间不应超过1分钟。⑺嘱受试者握紧拳头，选择合适的血管：当轻压或轻拍时能感觉其回弹的静脉即为合适血管。最常用的选择部位是血管丰富并且血管贴近皮肤表层的肘前区域。⑻消毒：以穿刺点为圆心，用蘸有碘酒的棉签由内到外螺旋型涂抹，然后用75％酒精棉签脱碘，消毒范围为直径大约8-10厘米，注意消毒过的地方不能重复涂抹，在涂抹的过程中棉签必须也要同时旋转。如果手臂皮肤不足够干净的则需重新擦拭。⑼穿刺部位干燥。⑽在洁净后不要触摸穿刺部位。2.静脉穿刺方法真空采血器法真空采血器由真空采血管、采血针（包括直针和头皮采血针）、持针器三个部分组成。真空采血管是其主要组成部分，主要用于血液的采集和保存，在生产过程上预置了一定量的负压，当采血针穿刺进入血管后，由于采血管内的负压作用，血液自动流入采血管内；同时采血管内预置了各种添加剂，完全能够满足临床的多项综合的血液检测，安全、封闭、转运方便。⑴将采血针针头斜面朝上,使针与手臂成约15度角，使其方向与血管一致。⑵迅速地刺穿已选定的静脉。⑶若观察到回血现象,说明针已经准确地刺入血管。嘱受试者松开拳头。⑷固定采血针确保针头不移动。⑸待血液自行流入至所需体积血液。顺序：血培养—抗凝管—干燥试管。当出现异常时如：病人出汗、面色苍白、晕倒时立即拔出针并急救；操作失败，取得病人谅解，再次进行操作（“对不起，由于……的原因需要再取一次血，请原谅”）。采样尽量在1分钟内完成。⑹解开止血带。⑺退针。⑻请受试人自行轻压棉签3~5分钟。手臂需举至高于心脏水平位置以控制血流。（如果是有出血倾向患者如紫癜，ITP，血液病等要压迫5～10分钟直到无血渗出）。同时告知病人报告时间。⑼将真空管颠倒混匀5-10次，切勿用力振摇。⑽迅速把针头放入利器专用容器，针管放入医疗垃圾袋中。将采血管与相应的检验单核对好，编号，分类，尽快送检。精液常规检查SOP1.实验原理记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、形态。2.标本采集2.1标本采集前病人准备：必须禁欲（包括遗精和手淫）3～7天。这是因为少于48小时采取的精液，因相距时间太短，精液中精子的数量可能偏少，容易造成少精症的假象。如果超过7天，精子活率、活力都有所下降，也可造成弱精子症的假象。精液检查应间隔一周或两周，要进行2～3次检查。因为一个人精子的产生在一年中，可因季节、气候等,诸多因素的影响而有一些变化。2.2标本种类：精液2.3标本要求：用清洁干燥小瓶收集，不应采用避孕套内精液。3.标本储存：立即送检。4.标本运输：室温运输，冬季需保温运输。5.标本拒收标准：久置标本，污染标本，避孕套内标本。6.操作步骤7.1纪录精液量、颜色、透明度、粘稠度和液化时间。7.2精子活动率：取新鲜标本混匀后，在温玻片上用高倍镜观察100个精子，计数活动精子与不活动精子的比例，计算精子活动的百分率。精子活动率=活动精子数/（活动精子数+不活动精子数）×100%7.3取上述新鲜湿片标本，观察精子的活动力，可按下列五级报告：0级：精子完全不活动，加温后仍不活动；临床实验室I级：精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差；II级：精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动，带有回旋；III级：为中速运动；IV级：精子活动好，快速直线运动，很快超越一个视野，活泼有力。7.4精子计数：7.4.1于试管内加精子稀释液0.38ml，吸液化精液20ml，加入稀释液内摇匀。7.4.2充分摇匀后，滴入血细胞计数池内，静置1-2min，待精子下沉后，以精子头部作为基准进行计数。7.4.3如精子数少，可计数两个大方格内精子数，总数乘以10万即为每毫升精液内精子数，再换算成×109/L报告。7.4.4如精子数多，可计数5个中方格内精子数，总数乘以100万即为每毫升精液内精子数，再换算成×109/L报告。7.5精子形态观察：革兰氏或瑞氏染色后用油镜观察。异常精子可有：头部过大、过小、尖细、外缘不齐、双头等；中部消失、分枝或肿胀；尾部呈双尾，卷曲度短或消失（缺尾）。7.6细胞：红、白细胞5/高倍视野。7.7pH：7.2-8.0，平均7.8。7.8其它成分：精液中可有结晶体、卵磷脂小体、淀粉样体、脂滴、脱落上皮细胞等。8.结果判断与分析8.1一般性状检查8.1.1量：正常人一次排精2～5ml。8.1.2颜色和透明度：正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色，液化后呈半透明乳白色，久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和肿瘤，黄色脓样精液，见于精囊炎或前列腺炎。8.1.3粘稠度和液化：正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状，在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样，可能是精子数量减少，见于生殖系统炎症，精液不凝固见于精囊阻塞或损伤；如果精液1小时后不液化，可能是由于炎症破坏纤溶酶所致，如前列腺炎，精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。8.1.4酸碱度：pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2-8.0，以利于中和酸性的阴道分泌物，pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢，不利于受孕。8.2显微镜检查。8.2.1精子存活率：排精后30～60分钟，正常精子存活率应为80％～90％，精子存活率降低是导致不育的重要原因。8.2.2精子活动力：正常精子活动力应在III级以上，若40％的精子活动不良，常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低，主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性感染，应用某些药物如抗疟药、雄激素等所致。8.2.3精子计数：正常人精子计数为10～130×109/L，相当于一次排出的精子总数为400×106～600×106。当精子计数值20×106/ml或一次排精总数100×106为精子减少，超过致孕极限而导致不育。精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精子为无精症。见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩(如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等)、输精管阻塞或是先天性输精管及精囊缺陷，是导致少精或无精的重要原因，也是导致不育的重要原因。检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。结扎六周后，连续检查无精子，说明手术成功，如果结扎两个月后，精液中仍有精子，说明手术不成功。8.2.4精子形态：正常精液中，异常形态精子应少于10％～15％，如果精液中异常形态精子数20％，将会导致不育，可能是由于精索静脉曲张、血液中有毒代谢产物、铅污染等或应用大剂量放射线及使用细胞毒性药物导致的精子形态异常。如果精液中发现1％的病理性未成熟细胞，包括精原细胞、精母细胞和发育不完全的精细胞，提示睾丸的曲细精管的生精功能受到药物或其他因素影响或损伤。如果精子凝集10％，提示生殖道感染或免疫功能异常。9.注意事项9.1出现一次异常结果，应隔一周后复查，反复查2-3次才能得出比较正确的结果。9.2如低倍镜、高倍镜检查均无精子，应将精液离心沉淀后再涂片检查，如两次均无精子，报告“无精子”。10.操作性能：快速简便11.方法局限性：易受人为主观经验不足影响结果判断。12.参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规范（第二版）.1997,149-150异常白细胞显微镜检查标准操作规程1.实验原理用瑞氏染色法，对制备好的血涂片进行染色，然后在显微镜下进行形态检查。2.标本采集：2.1标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2标本要求：2.2.1抗凝剂采用EDTAK2抗凝。2.2.2用手指末梢血作白细胞检验时，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3.标本储存：取材后应立即推制成血涂片，并尽快送检。4.标本运输：保持干燥，室温运输。5.标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定。6.实验材料：瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。7.实验仪器：7.1仪器名称：光学显微镜7.2仪器厂家：凤凰光学集团有限公司7.3仪器型号：PH1008.操作步骤8.1采血后推制厚薄适宜的的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。8.2瑞氏染色：将制好的干燥血涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满血膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水检验地带网冲去染液，待干。8.3高倍镜（必要时油镜）观察白细胞形态。8.结果判断与分析9.1核象变化。(1)核左移：说明外周血中幼稚或杆状核粒细胞增多，见于急性白血病，急性化脓性细菌感染，急性中毒，急性溶血。正常妊娠、缺氧及低血压也可出现细胞核左移现象。(2)核右移：说明中性粒细胞核分叶过多，见于巨幼细胞性贫血，恶性贫血，化疗及炎症恢复期，遗传性中性粒细胞分叶过多，尿毒症等。巨多核中性粒细胞：成熟中性细胞胞体增大，核分叶过多，常为5-9叶，甚至12-15叶。各叶大小差别很大，常见于巨幼细胞性贫血。此外，在疾病进行期突然出现核右移，表示预后不良。(3)分叶过少：乳酸缺乏症，假性pelger-huet异常等。9.2其他核异常环形或面包圈型核：见于慢粒，慢性粒细胞白血病，骨髓异常增生综合征等。中性粒细胞形态变化9.3中性粒细胞的毒性变化：1）细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。2）中毒颗粒：比正常中性颗粒粗大，大小不等，分布不均匀，染色较深，呈黑色或紫黑色。有时颗粒很粗大，与嗜碱粒细胞易混淆；有时小而稀少，散杂在正常中性颗粒之中。含中毒颗粒的中性粒细胞应与嗜碱粒细胞区别，其要点：嗜碱粒细胞核较少分叶、染色较浅、颗粒较大、大小不均、着色更深、细胞边缘处常分布较多，可分布于核上，胞浆中常见小空泡。在血片染色偏碱或染色时间过长时，易将检验地带网中性颗粒误认为中毒颗粒。但只要注意全片各种细胞的染色情况，则不难区别。含中毒颗粒细胞在中性细胞中所占比值称为毒性指数。毒性指数愈大，提示中毒变性结果。3）空泡：可为单个，但常为多个。大小不等，亦可在核中出现。被认为是细胞脂肪变性的结果。4）Dohle体：是中性粒细胞胞浆内因毒性变而保留的嗜碱性区域。呈圆形、梨形或云雾状。界限不清，染成灰蓝色，直径为1-2μm，是胞质局部不成熟，即核与胞质发育不平衡的表现。Dohle小体亦可见于单核细胞中，其意义相同。5）退行性变：常见者有胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀和核溶解（染色质模糊、疏松）等等。如胞质破裂后消失，只剩胞膜，则成裸核或蓝状细胞，退行性变亦可见于衰老细胞，在正常情况下为数极少。这些毒性变化可单独出现，亦可同时出现。观察中性粒细胞的毒性的变化，对估计疾病的预后有一定帮助。9.4其它异常白细胞：1）Pelger-Huet畸形：表现为成熟中性粒细胞核分叶能力减弱。常为杆状和分两叶（其间难成细丝）。呈肾形或哑铃形。染色质聚集成小块或条索网状，其间有空折间隙。为常染色体显性遗传异常，一般无临床症状。但也可继发于某些严重感染、白血病、骨髓增生异常综合征、肿瘤转移和某些药物（如水仙胺、磺基二甲基异恶唑）治疗后。2）Chediak-Higashi畸形：在Chediak-Higashi综合征患者骨髓和血液各期粒细胞中，含数个至数十个直径2-5μm的包涵体，即异常巨大的紫蓝或紫红色颗粒。电镜观察和细胞化学显示，巨大颗粒为异常溶酶体。患者容易感染，常伴白化病。为