岳阳市一人民医院TheFirstPeople’sHospitalofYueyang文件编号:SOP-JZ-006.00第1版/第0次修改文件名称:大便常规和隐血试验标准操作维护规程编写人:李林审核人:彭进批准人:刘培香第1页,共4页实施日期:2011-9-1一、目的用于规范大便常规和隐血试验的操作。二、适用范围适用于大便常规和隐血试验的检测。三、支持性文件《全国临床检验操作规程》(第三版)、《临床检验基础》(第三版)、《隐血试验操作说明书》四、大便标本采集1、采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别,如一般检验留取新鲜指头大小(约5g)即可,放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检,标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒,便于检查后焚毁。血吸虫毛蝴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其它化学药品。2、检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子,在清晨排便前由肛门四周拭取标本,也可用棉拭子拭取,但均须立即镜检。3、检查阿米巴滋养体,应于排便后立即检查。冬季需采取保温措施,迅速送检。4、不应该采取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液,可使柔弱的原虫致死。用白明胶膜法检查粪便中的胰蛋白酶活性时,可因尿液中存在溶解白明胶的物质而导致其检查结果错误的增高。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等,因腐生性原虫、真菌抱子、植物种子、花粉易混淆实验结果。5、盛粪便标本的容器必须有盖,有明显标记。粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成分,若无病理成分,可多部位取材。采取标本后,应在一小时内完成检查,否则可因9H及消化酶等影响,而使粪便中细胞成分破坏分解。6、检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数,应收集24h粪便送验。7、隐血试验,应嘱患者收集标本前3日禁食动物性食物。连续检查3天,并选取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检查,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。8、细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。岳阳市一人民医院TheFirstPeople’sHospitalofYueyang文件编号:SOP-JZ-006.00第1版/第0次修改文件名称:大便常规和隐血试验标准操作维护规程编写人:李林审核人:彭进批准人:刘培香第2页,共4页实施日期:2011-9-1五、常规检验1、颜色可根据观察所见报告,如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。正常粪便因粪胆素而呈棕黄色,但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色。灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疽、胆汁减少或缺乏。绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时。红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等。柏油样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。米泔水样见于霍乱。2、性状可报告为软、硬、糊状、泡沫样、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。正常时为有形软便。[1]球形硬便:便秘时可见。[2]粘液稀便:见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。[3]粘液脓性血便:多见于细菌痢疾。[4]酱色粘液(可带脓)便:多见于阿米巴痢疾。[5]稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感染。[6]米泔样便并有大量肠粘膜脱落,见于霍乱、副霍乱等。[7]扁平带状便:可能因直肠或肛门狭窄所致。3、寄生虫虫体蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辨。钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。4、直接涂片镜检[1]洁净玻片上加等渗盐水1—2滴,选择粪便的不正常部分,或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。[2]最好取大玻片,制成涂片后,应覆以盖片。涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。[3]在涂片中如发现疑似包囊,则在该涂片上加1滴碘液,在高倍下仔细鉴别,如仍不能决定时,可取全量粪便浓缩法检查。岳阳市一人民医院TheFirstPeople’sHospitalofYueyang文件编号:SOP-JZ-006.00第1版/第0次修改文件名称:大便常规和隐血试验标准操作维护规程编写人:李林审核人:彭进批准人:刘培香第3页,共4页实施日期:2011-9-1[4]虫卵的报告方式:未找到者注明“未找到虫卵”,找到一种报告一种,找到几种报告几种,并在该虫卵后面注明数量若干,以低倍视野计算。[5]应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别,并应注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。若大量出现,则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。[6]细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。[7]夏科—雷登(Charcot—Leyden)结晶:为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶,大小不一。常见于肠道溃疡,尤以阿米巴感染粪便中最易检出。过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。[8]细菌:占粪便净重的l/3(4000亿/g干粪),正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌,占80%;而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10%;芽胞茵(如梭状菌)和酵母菌为常住菌,但总量不超过10%。正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致,除涂片染色找细菌外,应采用不同培养基培养鉴定。六隐血试验上消化道有少量出血时,红细胞被消化而分解破坏,由于显微镜下不能发现,故称为隐血。1、原理(免疫层析法)隐血试验是利用免疫胶体金技术,用双抗体夹心法来检测人粪便中的血红蛋白(Hb)。检测时,当样本中含有血红蛋白,将与标记的Hb2单克隆抗体反应复合物,在层析作用下反应复合物沿着硝酸纤维膜向前推动至检验区,被硝酸纤维膜上的Hbl单克隆抗体捕获,在检验区上最终形成一条红色反应线,此时结果为阳性。当样本不含血红蛋白时,则检验区无红色反应线出现,此时结果为阴性。无论样品中是否含有血红蛋白,质控区都会显色。2、储存条件4℃~30℃保存,产品有效期24个月。铝箔袋开封后,试纸条尽快在1小时内用完。岳阳市一人民医院TheFirstPeople’sHospitalofYueyang文件编号:SOP-JZ-006.00第1版/第0次修改文件名称:大便常规和隐血试验标准操作维护规程编写人:李林审核人:彭进批准人:刘培香第4页,共4页实施日期:2011-9-13、操作⑴样本收集管的操作:将样本收集管的盖子拧开,用取样棒在大便6个不同的地方取样,然后插回样本收集管中拧紧,充分混匀待用。标本提取后应该马上做测试,如不能马上测试可将其防在4℃冰箱保存,测试前注意恢复室温。⑵沿铝箔袋切口部位撕开,取出测试试纸条放在平台上,做好标记。⑶将样品收集管的尖端拧断,垂直滴加3滴(约80ul)样本稀释液于试纸条加样区。⑷10分钟观察显示结果,15分钟后显示结果无临床意义。结果判断:阳性:两条红色反应线,即在检测区(T)和对照区(C)各出现一条红色反应线。阴性:一条红色反应线,即仅在对照区(C)出现一条红色反应线。无效:对照区(C)无红色反应线出现,检测无效,建议此时用新试纸条重测,尤其注意加样量是否足够。4、临床意义⑴消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试验可阳性。⑵消化道恶性肿瘤时,粪便隐血可持续阳性,溃疡病时呈间断性阳性。⑶本法可作为消化道恶性肿瘤普查初筛试验。