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一个小孔的巨大作用——ConfocalMicroscopy背景:折射密度不均导致的折射现象手工磨制的椭圆玻璃实现局部放大，制成最初的放大镜、远视镜（老花镜）背景:第一台显微镜世界上第一台真正意义上的显微镜出现在17世纪晚期，发明者是荷兰的布匹商人、显微镜的先驱人物：列文虎克(AntonivanLeeuwenhoek)其一生磨制了400多个透镜，有一架简单的透镜，其放大率竟达270倍。其主要成就：首次发现微生物，最早纪录肌纤维、微血管中血流。甲壳虫的眼睛背景:复式显微镜罗伯特·虎克(RobertHooke)1665年胡克设计了一台复杂的复合显微镜，观察到了植物细胞(已死亡)，并且使用cell一词命名植物细胞为cellua。是为史上第一次成功观察细胞，并出版了《显微术》一书。在物理学研究方面，他提出了描述材料弹性的基本定律-胡克定律，在机械制造方面，他设计制造了真空泵，显微镜和望远镜，在新技术发明方面，他发明的很多设备至今仍然在使用。除去科学技术，胡克还在城市设计和建筑方面有着重要的贡献。现代显微镜电子信息技术激光技术偏振光显微镜相差显微镜荧光显微镜共聚焦显微镜···偏振态相位振幅波长共聚焦显微镜原理共聚焦原理图抑制图像模糊confocalconventional共聚焦显微镜共聚焦装置图conventionalconfocal激光扫描共聚焦显微镜光源光纤跳线连续光源+滤光片也可产生单色光二色镜&滤光片激光器：468nm荧光工作示意图共聚焦原理图468nm激光器孔径光阑探测器物镜样品聚焦面扫描台滤光片468nm+508nm左右的荧光468nm+少量荧光荧光扫描振镜扫描振镜······XY512pixels······成像原理物镜小孔直径光斑大小：如：一个数值孔径NA=1.0的60X物镜，采用488纳米激发波长(Thorlabs公司的共焦扫描头的放大率为Mscanhead=1.07)，其合适的针孔尺寸为38.2微米，可计为一个1AU直径的针孔。荧光采集：PMT光电倍增管共聚焦显微镜的优越性连续动态扫描及三维成像同时多种物质标记高分辨率···共聚焦显微镜的应用双光子激光扫描共聚焦显微镜且听下回分解···