高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸-学生用

整理文档很辛苦,赏杯茶钱您下走!

免费阅读已结束,点击下载阅读编辑剩下 ...

阅读已结束,您可以下载文档离线阅读编辑

资源描述

实验饮料中苯甲酸的测定——高效液相色谱法【实验目的】掌握高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸的原理和方法;熟悉实验操作步骤、高效液色谱仪及紫外检测器的使用;了解饮料中苯甲酸测定方法的注意事项。【实验原理】提取饮料中苯甲酸,将提取液过滤后,经反相高效液相色谱分离,紫外检测器测定吸光度,根据保留时间定性,外标峰面积定量。【仪器与试剂】1.仪器高效液相色谱仪,配有紫外检测器;分析天平,感量为0.1mg,0.45μm水系微孔。2.试剂(1)甲醇:色谱纯(2)乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵,加水溶解并稀释至1000ml,经微孔滤膜过滤。(3)氨水(1+1):氨水与水等体积混合。(4)标准溶液:1.0mg/ml苯甲酸标准储备液:准确称取0.118g苯甲酸钠(精确到0.0001g),用水溶解并定容至100ml。于4℃贮存,保存期为6个月。0.2mg/ml苯甲酸标准中间液:准确吸取苯甲酸标准储备液10.0ml于50ml容量瓶中,用水定容。于4℃贮存,保存期为3个月。苯甲酸标准系列工作溶液:准确吸取苯甲酸标准中间液0ml、0.05ml、0.25ml、0.50ml、1.00ml和2.50ml,用水定容至10.0ml,配制成质量浓度分别为0mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L和50.0mg/L的标准系列工作溶液。临用现配。(5)20g/L碳酸氢钠溶液(6)实验用水:一级水(超纯水)【实验步骤】1.样品处理:称取20g样品(精确至0.001g),放入小烧杯中,超声5min以除去二氧化碳,用氨水(1+1)调pH约7。加水定容至50ml容量瓶中,经0.45um滤膜过滤,滤液用于色谱分析。2.参考色谱条件:C18色谱柱(250mm×4.6mm,5um);流动相:甲醇:0.02mol/L乙酸胺=55:45;流速:0.8ml/min;检测波长:UV230nm;进样量:20μl。3.标准曲线绘制及样品测定(1)标准曲线的绘制:将苯甲酸标准系列工作溶液,取20μl分别注入高效液相色谱仪,以标准系列工作溶液的质量浓度为横坐标,,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。(2)样品分析:在相同的色谱条件下,取20μl样品处理液注入,高效液相色谱仪,以保留时间定性,以峰面积通过标准曲线计算出待测液中苯甲酸的质量浓度。。【数据处理】样品中苯甲酸的含量按照下式计算:X=ρ×V/m式中,X——样品中待测成分含量,g/kg;ρ——由标准曲线上计算的待测物浓度,mg/ml;V——样品定容体积,ml;m——样品质量,g。【注意事项】1.饮料类食品中,国家标准允许最大使用量:苯甲酸≤0.2g/kg。

1 / 2
下载文档,编辑使用

©2015-2020 m.777doc.com 三七文档.

备案号:鲁ICP备2024069028号-1 客服联系 QQ:2149211541

×
保存成功