电子垃圾拆解区新生儿体内重金属负荷及其对生长发育的

博士学位论文电子垃圾拆解区新生儿体内重金属负荷及其对生长发育的影响ElevatedHeavyMetalsLevelsanditsEffectonGrowthandDevelopmentofNeonatesinanE-wasteRecyclingTown博士研究生：李燕专业：病理学与病理生理学导师：霍霞教授基金项目：教育部留学回国人员科研启动基金资助项目汕头大学医学院2008年4月中国.汕头汕头大学医学院博士学位论文目录中文摘要………………………………………………………………………………………3英文摘要………………………………………………………………………………………7缩写词…………………………………………………………………………………………12前言……………………………………………………………………………………………14第一部分电子垃圾拆解区新生儿出生情况调查…………………………………………22（一）引言…………………………………………………………………………………22（二）材料与方法…………………………………………………………………………22（三）结果…………………………………………………………………………………23（四）讨论…………………………………………………………………………………24（五）参考文献……………………………………………………………………………25第二部分电子垃圾拆解区新生儿铅、镉和铬负荷的检测及其影响因素………………27第一节铅负荷的检测及其影响因素………………………………………………………27（一）引言…………………………………………………………………………………27（二）材料与方法…………………………………………………………………………28（三）结果…………………………………………………………………………………31（四）讨论…………………………………………………………………………………41（五）参考文献……………………………………………………………………………44第二节镉负荷的检测及其影响因素………………………………………………………48（一）引言…………………………………………………………………………………48（二）材料与方法…………………………………………………………………………48（三）结果…………………………………………………………………………………52（四）讨论…………………………………………………………………………………59（五）参考文献……………………………………………………………………………62第三节铬负荷的检测及其影响因素………………………………………………………65（一）引言…………………………………………………………………………………65（二）材料与方法…………………………………………………………………………65（三）结果…………………………………………………………………………………68（四）讨论…………………………………………………………………………………72（五）参考文献……………………………………………………………………………74第三部分电子垃圾拆解区新生儿铅、镉易感性的研究…………………………………77第一节ALAD基因多态性…………………………………………………………………771汕头大学医学院博士学位论文（一）引言…………………………………………………………………………………77（二）材料与方法…………………………………………………………………………78（三）结果…………………………………………………………………………………82（四）讨论…………………………………………………………………………………84（五）参考文献……………………………………………………………………………85第二节胎盘金属硫蛋白的表达……………………………………………………………88（一）引言…………………………………………………………………………………88（二）材料与方法…………………………………………………………………………88（三）结果…………………………………………………………………………………91（四）讨论…………………………………………………………………………………93（五）参考文献……………………………………………………………………………94第四部分电子垃圾拆解区新生儿生长发育状况的研究…………………………………96第一节神经行为发育的检测………………………………………………………………96（一）引言…………………………………………………………………………………96（二）材料与方法…………………………………………………………………………96（三）结果…………………………………………………………………………………100（四）讨论…………………………………………………………………………………103（五）参考文献……………………………………………………………………………104第二节脐带血淋巴细胞DNA损伤的检测………………………………………………106（一）引言…………………………………………………………………………………106（二）材料与方法…………………………………………………………………………106（三）结果…………………………………………………………………………………108（四）讨论…………………………………………………………………………………109（五）参考文献……………………………………………………………………………111全文总结………………………………………………………………………………………113综述…………………………………………………………………………………………115个人简介及发表论文…………………………………………………………………………122致谢……………………………………………………………………………………………125附录1：新生儿出生情况调查表……………………………………………………………126附录2：产妇情况调查表……………………………………………………………………127附录3：新生儿行为神经评分表……………………………………………………………1292汕头大学医学院博士学位论文中文摘要研究背景现代科技飞速发展促使电子产品频繁地更新换代，一系列范围广泛且不断增加的电子淘汰品正以惊人的速度增长，已成为世界上增长昀快的垃圾。全世界数量惊人的电子废弃物大多数出口至亚洲，这其中大部分进入中国，广东汕头贵屿镇就是世界电子废弃物终点站之一。电子废弃物又叫电子垃圾，其中含有种类繁多的有毒有害物，以重金属的危害尤为突出，如铅、镉、汞和六价铬等。如果回收处理不当，将给社会、环境、健康带来一系列严重问题，对当地环境和居民健康构成一定的威胁。贵屿镇有着近20年的电子垃圾回收拆解历史，以手工拆解为主的简单落后的处理方式已使当地环境中多种重金属的含量严重超标。而胎儿期是生长发育的关键时期，对有毒有害物质极为敏感，上述物质会对胎儿的生长发育造成极大的伤害。但迄今为止，针对电子垃圾回收拆解地区胎儿或新生儿体内重金属负荷水平的相关研究还未见报道。为此，我们以广东省汕头市贵屿镇作为研究现场，在对贵屿地区03年到07年新生儿出生情况进行调查之后，以当地新生儿为研究对象，结合母亲的问卷调查，先后2年对该镇新生儿体内的铅、镉和铬负荷状况进行监测；同时对δ氨基-γ-酮戊酸脱水酶(δ-aminolevulinicaciddehydratase,ALAD)基因多态性、胎盘金属硫蛋白（Metallothionein,MT）表达、新生儿神经行为发育和脐带血淋巴细胞DNA损伤情况进行研究，探讨环境重金属污染对新生儿生长发育的影响，综合评估不科学的电子垃圾回收拆解方式对这个人群健康的危害。目的调查贵屿电子垃圾回收拆解区新生儿出生情况；监测当地新生儿铅、镉和铬负荷，分析其变化趋势；探讨影响新生儿铅、镉和铬负荷的因素；初步评估当地新生儿生长发育情况，评估不科学的电子垃圾回收处理方式对新生儿生长发育的影响。方法首先采用回顾性调查的方式，以厦门妇幼保健院数据为对照组调查2003～2007年贵屿地区产妇及新生儿的生育和出生情况。其次以贵屿镇当地医院妇产科出生新生儿为暴露组研究对象，以潮南民生医院妇产科出生新生儿为对照组，采用石墨炉原子吸收光谱法，分别对贵屿镇2006年及2007年当地出生新生儿脐带血铅、胎粪铅、脐带血镉、胎盘镉和脐带血铬水平进行监测，并以问卷形式对新生儿父母的家庭和工作环境状况进行调查。以限制性片段长度多态性（Restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）方法对新生儿ALAD基因型进行分析，采用链霉菌素-生物素(S-P)免疫组化技术检测新生儿胎盘MT的表达，采用国际认可的鲍秀兰20项新生儿神经行为检查法对新生儿神经行为能力评分，用彗星实验检测新生儿脐带血淋巴细胞DNA的损伤情况。3汕头大学医学院博士学位论文结果1.调查数据显示从03年到07年及5年总和死胎率贵屿组明显高于厦门对照组。早产率除05年数据厦门组略高于贵屿组外，其它03年、04年、06年、07年、5年总和均为贵屿组高于厦门组。低体重儿发生率03年到07年及5年总和均为贵屿组高于厦门组。双胎率03年、04年、05年、07年、5年总和为贵屿组高于厦门组，而06年为厦门组高于贵屿组。05年死胎率、06年低体重儿发生率、除04年外的双胎率差异无统计学意义（χ2检验，P0.05），其余所有差异均有统计学意义（χ2检验，P0.05）。03到07年每年总异常出生情况均为贵屿组高于厦门组，05年差异无统计学意义（χ2检验，P0.05），其余每年差异均有统计学意义（χ2检验，P0.05）。2．1）2006年贵屿地区新生儿脐带血铅值（均数为113.28μg/L）明显高于贵屿周边其它乡镇（平均值为60.43μg/L），差别具有统计学意义(P＜0.01)。超过目前认为的安全临界线（100μg/L）者48例，占该组的48％。2007年贵屿地区新生儿脐带血铅值（均数为110.86μg/L）也明显高于贵屿周边其它乡镇（平均值为53.38μg/L），差别具有统计学意义(P＜0.01)。超过目前认为的安全临界线（100μg/L）者59例，占该组的59％。2007年贵屿组脐带血铅均值低于2006年，但两组铅水平分布无显著性差异（P0.05）。2006年贵屿地区新生儿胎粪铅值均数为2.50μg/g，明显高于贵屿周边其它乡镇新生儿胎粪铅值（均数为1.20μg/g），差别具有统计学意义(P0.01)。2007年因取材原因无对照组数据，贵屿实验组新生儿胎粪铅均数为4.54μg/g。贵屿地区2007年胎粪铅值高于2006年，分布有显著性差异（P0.01）。父母从事电子垃圾相关工作、在贵屿居住时间等是导致贵屿地区新生儿高铅负荷的相关因素。2）2006年贵屿组新生儿脐带血镉均值为5.30μg/L，超标率为29%；2007年均值3.47μg/L，超标率为10%，两年均值和超标率均高于同年对照组（P0.01）。并且贵屿组2007年均值与超标率均低于2006年，差异具有统计学意义（P＜0.01）。2006年实验组新生儿胎盘镉均值为0.17μg/g，明显高于对照组（0.10μg/g），差异具有统计学意义（P0.01）。父母从事电子垃圾相关工作、在贵屿居住时间等是导致贵屿地区新生儿高镉负荷的相关因素。3）贵屿实验组2006年脐带血铬水平（均值为303.38μg/L，中位数93.89μg/L），超过目前认为相对安全界限（0.20μg/L）为29例，超标率29％；对照组脐带血铬水平（均数20.30μg/L，中位数18.10μg/L）均未超过目前认为的相对安全界限；无论是铬的超标率还是均值及中位数，贵屿实验组和对照组比较，差别均有统计学意义（P0.01）。2007实验组年脐带血铬水平（均值为99.90μg/L，中位数70.60μg/L），