SemenAnalysis精子质量分析何时需要进行精子检测?不育输精管结扎后检测优生优育用什么方法检测?•精液常规(手工)•精液动态分析精液常规(手工)参考值•1颜色:淡黄色或乳白色•2精液量:3.0-5.0ml•3粘稠度:•4液化时间:5-30min•5精子计数:10-130X109/L•6精子活力:≧Ⅲ•7精子活动率:60-100%•8畸形率:0-20%•9红细胞:5/HP•10:白细胞:5/HP手工法检测精液的显微镜检查:在做显微镜检查前,应将精液标本充分混匀,避免抽样误差影响精子活力及计数,将混匀的精液1滴滴在玻片上(滴的直径为2-3mm),通常在低倍镜下粗略观察有无精子,是活动精子还是不活动精子,若遇无精子症,应将标本离心沉淀后重复检查1次,除精子外,精液内还混有各种细胞成分,如细菌、上皮细胞、红细胞、白细胞和不成熟生精原细胞等,都应如实描述。(一)精子活率•是以活动精子百分率计数的。所有尾部有运动的精子都属于活动精子。具体的方法是:取液化混匀精液1滴,滴在玻片上立即进行观察,需避免室温过低,防止精液干燥,最好将精液放在有温度调控显微镜下观察,或置25度恒温箱内观察,随意计数5-10个不同视野内活动及不活动精子,不要选择边缘视野,计数100条精子活动精子的数目即为精子活动率(活率)。(二)精子活力•WHO分级标准:•a级:呈高速直线运动•b级:呈中速直线运动•c级:呈缓慢或非前向运动•d级:呈不动状态(三)精子密度•密度就是每毫升内精子数目,也称为精子计数或精子浓度。精子总数表示全部射出精液量的精子数目,即精子密度乘以精液量•精子密度的粗略估计法将液化精液混匀直接涂片,用普通光学显微镜(40X)观察5个视野,取其平均数乘以10的6次方,即为大概的精子数。如5个视野平均为60,则精子计数大约为60X10的六次方精子密度•精子密度精确计数法通常采用计算血液白细胞的方法,使用血细胞计数器来检验。有条件的单位可用Makler计数器来检验。•常用精子稀释液配方NaHCO35克,35%甲醛1ml,蒸馏水加至100ml。为了增加观察时精子的清晰度,可在上述100ml溶液中加入龙胆紫饱和水溶液0.5ml。另一种配方是:尿素40g,蒸馏水100ml。精子密度•方法精液20微升+380微升精子稀释液(精液10微升+190微升精子稀释液)。稀释液破坏粘稠性并固定精子。精液与稀释液混匀后滴入计数池内,静止5min左右,让所有精子细胞下沉后进行计数•计算方法标准牛鲍(Neubauer)血细胞计数板,中间一个大格为25个中方格,在计算精子数时仅计算中间大格中4个角和中央的1个中格。Neubauer计数板长•结果精子计数=5个中方格内精子数X50000X稀释倍数(习惯上稀释20倍即1:20)。即每ml精子计数等于观察到的5个中方格内的精子数,加上6个0,注意计数时只计算正常精子(具有尾部的、成熟的、形态正常的精子),以精子头做计数范围,精子头不在格内的不计。精子形态分析非常困难,难以做到客观,并且不同的操作人员结论各不相同符合WHO第5版的正常形态的精子包含:头部、颈部、中部、尾部。•正常精子头部呈现椭圆形,还有尾部。•尾部长度45µm,呈弯曲状,不应当有呈现尖角。•前端呈浅色(顶体:为头部尺寸的40-70%)。后补呈深色。•剩余细胞浆部分不应当超过头部的三分之一。中部轴线应当与头部轴线处于同一水平线。(四)精子形态分析MorphologyDefects形态缺陷头部缺陷尾部缺陷精液动态分析仪准备开始系统启动打开SQA-V后面板的开关电源指示灯将亮起显示屏上显示在SQA-V键盘上按ON/OFF按钮SQA-VVERSION2.60STANDBYPOSITIONPRESSON/OFFKEYTOACTIVATETHEUNIT稳定性自动校正系统稳定性和自动校正将开始在稳定性过程中不要触摸SQA-V键盘或插入采样管或插入装置这个过程大概需要5分钟时间SQA-VVERSION2.60PLEASEWAITSYSTEMSTABILIZATIONANDAUTOCALIBRATION主菜单屏幕上显示主菜单,SQA-V做好了样品测试的准备MAINMENUTESTNEWPATIENTRUNCONTROLSSERVICE取样.mp4输入病人和样品的信息病人和样品的信息从主菜单选择TESTNEWPATIENTMAINMENUTESTNEWPATIENTCONTROLSERVICE病人和样品的信息病人数据•病人ID–-使用唯一的数字ID鉴别受检者•出生日–受检者出生日期•节欲–受检者节欲天样品的处理样品/登记号--参考具体的样品•采集–样品采集时间•接收–接收到样品时间ENTERPATIENT/SAMPLEDATAPATIENTID:5788BIRTHDATE:01/01/01ABSTINENCE:XXXDAYSSAMPLEPROCESSINGSAMPLE/ACCESSION#:88COLLECTED:DD/MM/YYHH:MMRECEIVED:DD/MM/YYHH:MM病人和样品信息•SampleType:样品类型•FRESH:新鲜的:没有经任何方式处理过的和液化了的•WASHED:洗精–样品处理过的或用其他媒介替代精液乳浆。•FROZEN:冷冻–冷冻和解冻了的样品.只报告精子活动率参数•POSTVASECTOMY:绝育手术后的–绝育手术后检测,在1小时内测试•Volume:样品量–完全采集的样品量•WBCCONC:Selector≥1M/mlWBC白细胞浓度:选择or≥1M/ml•APPEARANCE;LIQUEFACTION;VISCOSITY外观;液化;黏性----观察样品输入正常/不正常SAMPLETYPESELECT:FRESH/WASHED/FROZEN/POSTVASVOLUME:2.5mlWBCCONC.SELECT1M/ml/OR=1M/mlPH7.0APPEARANCENORM/ABNORMLIQUEFACTIONNORM/ABNORMVISCOSITYNORM/ABNORM病人和样品信息选择样品量如果样品量=.5ml选择YES如果样品量.5ml选择NO运行一个低样品运行稀释样品ISSAMPLEVOLUMESUFFICIENTFORCOMPLETETESTING=.5ml?YES/NO运行正常量的样品如果样品量大于0.5ml,选择YESISSAMPLEVOLUMESUFFICIENTFORCOMPLETETESTING=.5ml?YES/NO正常量样品根据屏幕上的提示插入装载有样品的采样管只有当显示屏提示你的时候才能插入采样管测试将自动开始FRESHNORMALVOLUMESPECIMEN1.MIXSAMPLETHOROUGHLY2.FILL,CLEANANDWIPECAPILLARY3.WAITFORAUTOCALIBRATIONAUTOCALIBRATION–DONOTTOUCHUNITFRESHNORMALVOLUMESPECIMEN1.MIXSAMPLETHOROUGHLY2.FILL,CLEANANDWIPECAPILLARY3.WAITFORAUTOCALIBRATIONINSERTCAPILLARYINTOCHAMBER样品测试屏幕一个进度条标示样品正在测试中一个正常的测试大概运行70秒钟一个低质量的样品预计需要附加的2分钟时间DONOTMOVECAPILLARYOROPERATEDEVICEDURINGTESTINGTESTING正常量样品的测试结果屏幕上显示完整测试后的结果传送结果到V-Sperm存档中TESTRESULTSSPERMCONC.32.6M/mlTOTALMOTILITYPR+NP28%PROG.MOTILITYPR20%NONPROG.MOTILITYNP8%IMMOTILITYIM72%MORPH.NORM.FORMS,WHO5th7%TESTRESULTSMSC9.1M/mlFSC3.2M/mlPMSC6.4M/mlVELOCITY20mic/secSMI72TOTALSPEREJACULATESPERM#81.5MMOT.SPERM22.8MPROG.SPERM16.0MFUNCSPERM8.0MMORPH.NORM.SPERM5.7M•如果精液量小于0.5ml或者低质量样本该怎么处理?低量的样品如果样品量小于0.5ml,选择NOISSAMPLEVOLUMESUFFICIENTFORCOMPLETETESTING=.5ml?YES/NO低样品量对低量样品有二种选择:使用QwikCheck™稀释模式对样品1:1稀释来获取完整的报告运行一个20µl低量样品模式,只获得运动参数的报告。LOWVOLUMESPECIMENPLEASESELECTSAMPLETESTINGOPTION:DILUTESEMEN1:1WITHMEDIALOWVOLUME–20MICROLITERSONLYMOTILITYPARAMETERSONLY低量:稀释样品如果需要一个完整的报告参数选择稀释模式用QwikCheck™稀释液以1:1稀释样品根据屏幕上的指示准备参数采样管当屏幕上提示的时候插入参数采样管测试将自动开始LOWVOLUMESPECIMEN1.DILUTESEMEN1:1WITHMEDIA2.MIXSAMPLETHOROUGHLY3.FILL,CLEANANDWIPECAPILLARYINSERTCAPILLARYINTOCHAMBERLOWVOLUMESPECIMEN1.DILUTESEMEN1:1WITHMEDIA2.MIXSAMPLETHOROUGHLY3.FILL,CLEANANDWIPECAPILLARYAUTOCALIBRATION–DONOTTOUCHUNIT测试样品一个进度条标示样品正在测试中一个正常的测试大概需要70秒时间DONOTMOVECAPILLARYOROPERATEDEVICEDURINGTESTINGTESTING1+1稀释结果屏幕上显示完整测试后的结果传送结果到V-Sperm存档中TESTRESULTSSPERMCONC.32.6M/mlTOTALMOTILITYPR+NP28%PROG.MOTILITYPR20%NONPROG.MOTILITYNP8%IMMOTILITYIM72%MORPH.NORM.FORMS,WHO5th7%TESTRESULTSMSC9.1M/mlFSC3.2M/mlPMSC6.4M/mlVELOCITY20mic/secSMI72TOTALSPEREJACULATESPERM#81.5MMOT.SPERM22.8MPROG.SPERM16.0MFUNCSPERM8.0MMORPH.NORM.SPERM5.7M低量样品如果样品量小于0.5ml,选择NOISSAMPLEVOLUMESUFFICIENTFORCOMPLETETESTING=.5ml?YES/NO对低量样品有二种选择:•Dilutethesample1:1withQwikCheck™Dilutionmediaandobtainacompletereport.使用QwikCheck™稀释模式对样品1:1稀释来获取完整的报告运行一个20µl低量样品模式,只获得运动参数的报告。LOWVOLUMESPECIMENPLEASESELECTSAMPLETESTINGOPTION:DILUTESEMEN1:1WITHMEDIALOWVOLUME–20MICROLITERSONLYMOTILITYPARAMETERSONLY低量:20µl样品•吸取20µl到采样管的运动区域当屏幕提示的时候插入测试采样管测试将自动开始LOWVOLUMESAMPLEINSERTCAPILLARYINTOCHAMBERFILLCAPILLARY–20MICROLITERSCLEANANDWIPECAPILLARYLOWVOLUMESAMPLEAUTOCALIBRATION-DONOTT