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微生物的接种以及菌落和抗生素抑菌现象的观察实验目的1、掌握微生物接种的实验操作技能2、观察了解抗生素对细菌的抑制作用仪器试剂及实验材料接种环、无菌滴管、无菌玻璃刮铲、镊子、记号笔、直尺、酒精灯、牛肉膏蛋白胨固体培养基、分别浸过不同浓度抗生素和无菌水的圆纸片、大肠杆菌、枯草杆菌、滕黄八叠球菌等细菌菌种及其悬液实验步骤一、接种和菌落观察1、将菌种和接种工具置于启动的超净工作台5—10min2、点燃酒精灯，打开菌种试管封口并将管口在火焰上烧一下，并将试管口置于火焰附近。将灼烧过的接种环伸入培养基无菌落处冷却后刮取少许菌苔，用划线法在培养基上作连续划线。三次不同方向的划线使接种物逐渐稀释，培养后形成单个菌落。3、划线完毕后，盖上皿盖，倒置（防止冷凝水滴落在培养基上污染培养基）于37℃温室中培养，温室培养2—3d后观察和比较各种菌落的形态。二、抗生素对微生物的抑制作用1、用三支无菌滴管分别吸取三种细菌的悬浮液1—2滴，滴于三个平板培养基表面，然后分别用三个无菌玻璃刮铲涂匀。2、用无菌镊子将分别浸过不同浓度的某种抗生素和无菌水的圆纸片均匀置于上述三个平板培养基表面。3、在37℃恒温箱中培养2-3d后，在培养皿底部用直尺测量每个圆纸片周围清晰区的宽度，并记录。实验注意点整个实验过程要无菌操作。用酒精对手消毒，接种环要用火焰灼烧灭菌等。划线时，不可重复，以达到稀释菌种，经培养成为标准菌落。倒置培养皿，以防止冷凝水污染。练习1、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧几种不同处理，这些方法可依次用于杀灭哪些部位的细菌（C）A、接种针、手、培养基B、手、培养基、接种针C、培养基、手、接种针D、接种针、培养基、手2、将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置于不同的温度环境中，培养24小时后，观察所得结果列表如下。编号abcdef处理方法接种大肠杆菌接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素X的圆纸片接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素Y的圆纸片接种大肠杆菌，表面全被醋覆盖接种大肠杆菌无接种菌温度40℃40℃40℃40℃0℃40℃观察结果全表面呈浑浊纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊全表面呈浑浊全表面清晰全表面清晰全表面清晰根据上述实验结果所作出的下列判断中，错误的是（B）A、编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面回变浑浊B、根据编号b和c的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强C、将编号e和a的结果比较可知，0℃的环境不合适大肠杆菌生长D、若揭开编号f的盖子，24小时后可观察到培养基表面会出现浑浊