第1页共11页武汉大学动物实验中心实验动物使用计划(AnimalUsingProtocol,AUP)(201710版)此栏信息由IACUC办公室填写,申请者请勿填写IACUC批准编号:修订号:收件日期:批准日期:失效日期:申请者须知1.为了节省纸张和时间,请申请者先提交电子版AUP至武汉大学实验动物管理与使用委员会(IACUC)的邮箱(lac@whu.edu.cn);2.IACUC秘书首先对收到的AUP进行形式审查,符合要求的将提交给IACUC审查,审核时间需要2周,之后会及时向申请者反馈结果;3.申请者根据审查反馈情况修改完善AUP,在IACUC确认后打印一式两份,项目负责人在AUP上签字,送至中心行政楼301室;4.本AUP表审核通过后,方可订购实验动物!!!一、项目信息(在合适的选择项前打“”)□初次申请□年度复审,原AUP号是:()项目名称(中文):项目名称(English):项目类型:□科学研究□教学训练□其它:()单位(院系):项目负责人(PI)中文:职称/职务:拼音/英文:Email:办公(实验室)电话:实验室地址:动物项目负责人:职称/职务:Email:手机:联系人:职称/职务:Email:手机:二、项目来源:项目类型课题编号课题名称课题负责人第2页共11页项目类型请填写:国家重大专项、973计划、863计划、国家/省/市/校级自然科学基金或其它类型基金三、动物实验操作人员经历和培训:1.所列人员必须经过培训或在经培训的工作人员陪同下开展工作。姓名专业实验动物从业人员上岗证编号手机Email在本项目中的职责(实验设计、实验管理、主操作、操作助手、手术者、麻醉师、动物管理等)2.列出每个人在各自职责领域的实验经历和资质,外科手术人员请重点描述姓名实验经历和资质四、使用动物的目的和意义:以一般非生物医学背景人员为对象,用通俗的语言描述研究目的,对人类、动物的健康或科学的贡献。(,避免使用简写和缩写)研究背景:用动物做什么:解决什么问题:必要性和重要性:第3页共11页五、危险性物质的使用(在合适的选择项前打“”)1.根据本计划中的危险物质的使用情况填写□不使用□使用本计划中的有害物质属于:□放射性同位素□致癌物/致突变物□化学有害物□感染性物质□重组DNA□病理组织□肿瘤细胞□其他有害物质()2.详细描述有害物质的名称、剂量、给药途径、频率名称来源剂量给药途径频率3.详细描述对人、动物、环境的危害性,以及采取的个人防护措施和废弃物处理方法危害性:个人防护措施:废弃物处理方式:4.项目负责人承诺承诺:本项目组及其成员已了解国家对危险品管理的法规以及武汉大学和中心的相关管理规定,不违规使用危险物质,如需使用,一定按正规程序申报,并严格按照正确的个人防护和处置方式开展实验。若因违法违规使用危险性物质而产生严重后果,本人愿承担所有责任。项目负责人(签字):日期:年月日六、非药品级物质在动物体内的使用(在合适的选择项前打“”表示)1.使用情况(非药品级物质,指除未获得国家食药监局或兽药批文的药品或保健品或医疗器械)□不使用□使用本计划中的非药品级物质属于:□化学物质□生物制品□其它()2.描述物质的相关信息名称厂家/来源批号剂量给药途径频率质量凭证、除菌措施、保存条件第4页共11页七、实验动物信息(在所有适合的项目前打)针对使用的每一种动物的品系填写每一栏。如果使用了3种以上或3个品系以上的动物,可在后面增加列。内容ABC品种品系基因型(野生型可不填)性别年龄范围体重范围饲养环境(普通、屏障/IVC和隔离)是否要求繁殖.动物数量动物来源□中心统一采购:维通利华、华阜康、斯莱克□国内其它繁育机构,机构名称:()□国外引进,机构名称:()拟申请笼位数预计饲养时间开始时间:(年月日)结束时间:(年月日)特殊要求八、动物使用的理由和替代方法的检索(在所有适合的项目前打)1.通过何种方法得出实验所需的动物数量。□统计分析显示,实验计划的(动物)数量是最少的,符合统计学上对实验假设进行有效检验的要求。□实验将进行多个独立因素结果的对比,因此要求多组。□结果的检测或者被检测的现象是可变的,大样本量对于统计上有效的取样是必需的。□来自于对照组的差异预计是很小的。对于可靠地区分组间差异,大样本量是必需的。□实验具有技术上的困难,需要多次尝试以便从每一次实验中获得令人满意的数据。□其他(请解释):2.在本实验中使用活体动物的理由是什么?□本研究要求对活体动物进行行为测量。□本研究要求对活体动物进行生物学检测或活体动物的组织样本取材。□在本实验中,计算机或者其他模型不能代替动物。□本研究不能做离体实验。第5页共11页□其他(请解释):3.解释为什么你的研究中将要使用的动物种类是合理的。□本实验是以前使用该品种动物实验工作的直接延续。□本研究致力于扩展以前的从其它品种到这个品种的实验结果。□对于该品种动物很重要的生理/行为学现象,现在缺乏了解。□对于这个品种动物很重要的生理/行为学现象的相关内容比其他品种了解得更多。□这个品种的选择体现出了在能够使用的最低级的生物体和与人类的生理/行为最相近的模型系统中间最好的折衷方案。□对于计划开展的研究这个品种是最经济的。□其他(请解释):4.在实验设计开始前寻找活体动物使用的替代方法。至少选择2种查阅的数据库:□PubMed□WebofScienc□知网□万方□维普□其它数据库:()检索日期:()年()月()日检索涵盖的年份:()年至()年检索关键词(如:高血压动物模型,非动物模型,疼痛,紧张,在体外,培养):1.();2.();3.();4.();5.();6.()是否有活体动物实验的替代方法:□没有□有九、本实验可能造成的紧张和疼痛的处理(在合适的选择项前打“”)1.请描述本实验可能对动物造成哪些不良后果和护理措施选择项不良后果□呼吸困难□进食困难□体重快速下降□神经紊乱□行动困难□严重感染□肿瘤□剧烈疼痛□严重腹泻□大量失血□体温失调□营养不良/脱水□其它()护理措施□每天观察至少2次□每周称重至少2次□麻醉镇痛(详见麻醉镇痛部分)□治疗措施()2.参考美国农业部USDA分类标准,请选择疼痛级别:□C类:最小的,短暂的,一过性的或无疼痛或紧张□D类:有疼痛和紧张,通过麻醉、镇痛、镇静等适当的方式缓解疼痛和紧张□E类:有疼痛和紧张,但没有采取缓解的疼痛和紧张的措施3.描述麻醉剂的使用方法麻醉剂名称浓度剂量给药途径给药频率来源第6页共11页推荐麻醉剂列表种属异氟烷三溴乙醇戊巴比妥钠*氯胺酮*+赛拉嗪替来他明小鼠吸入1-4%240mg/kgIP,15-45min30-50mg/kg,IP,20-40min80-100mg/kg+10mg/kg,IP,20-30min不适用大鼠吸入1-4%不适用40-60mg/kg,IP,20-60min40-75mg/kg+5-10mg/kg,IP,20-40min不适用猕猴吸入1.28%不适用20-30mg/kg,IV,20-40min7-10mg/kg+0.6-2mg/kg,IM,20-30min4-6mg/kg,IM,30min*表示属于管制类药品注:本中心不推荐使用的麻醉剂:水合氯醛。2.描述镇痛剂的使用方法,术中和术后必须使用镇痛剂镇痛剂名称浓度剂量给药途径给药频率来源推荐镇痛剂列表镇痛剂品种剂量途径对乙酰氨基酚小鼠200mg/kgPO卡洛芬大鼠5mg/kgSC酮咯酸猴5-10mg/kgIM美洛昔康所有动物0.2-2mg/kgPOSC丁丙诺啡(管制类)小鼠0.05-0.1mg/kgIM,SC大鼠0.01-0.05mg/kgIM,SC猴0.015mg/kgIM,SC3.描述对动物造成疼痛,但没有使用麻醉剂和镇痛剂的科学理由科学理由:参考文献:十、需要说明的特殊情况(在合适的选择项前打“”)1.是否在本中心外的设施中开展部分动物实验□是□否,如果是,请在下面描述实验内容、地点、环境标准、时间2.是否存在单笼饲养第7页共11页□是□否,如果是,请在下面描述科学理由和如何增加环境丰富度的措施3.是否存在禁食禁水(手术前除外)□是□否,如果是,请在下面描述禁食禁水的科学理由、时间和如何保证动物不会出现危险状况4.自带饲料或使用特殊饲料□是□否,如果是,请在下面描述饲料的厂家或来源、灭菌方法、是否可以提供灭菌凭证5.是否自带仪器设备进入动物房□是□否,如果是,请在下面描述设备的名称、体积、电源要求、使用时间、消毒措施6.是否存在长时间保定□是□否,如果是,请在下面描述长时间保定的科学理由、方法、保定时间,如何保证动物的正常生理十一、实验设计和动物实验操作(在合适的选择项前打“”)根据实验内容填写以下实验信息:1.是否需要繁殖动物:□是□否,如果是,请描述繁殖动物的目的、数量和方法2.动物分组和动物数量(如列数不够可自行增加)组号1组2组3组4组5组6组组名动物数/组动物总数第8页共11页3.实验主要流程和步骤(下表为范例,请在下表中根据实验计划修改后填写)时间内容地点实验前3-7天适应期中心饲养间0天实验开始:注射肿瘤细胞建立动物模型中心操作室7天采血1中心操作室14天采血2中心操作室21天处死动物采集样本中心解剖间4.动物标记方法(禁止使用苦味酸!!!)□耳孔/耳标□剪脚趾(10天内的鼠适用)□按笼盒区分□动物专用标记笔□项圈(大动物,非铁丝)□纹身(大动物)5.是否对动物给药和接种□是□否,如果是,请描述下表中的信息物质名称浓度剂量体积ml/kg部位/途径针头大小时间点推荐最大给药体积(ml)和针头规格皮内(ID)皮下(SC)肌肉(IM)腹腔(IP)静脉(IV)灌胃(IG)小鼠0.05,≤4.5#2-3,≤7#0.05,≤5.5#2-3,≤6.5#0.2,≤4.5#1,9G,12G大鼠0.1,≤4.5#5-10,≤7#0.3,≤6.5#5-10,≤6.5#0.5,≤5.5#1-2,16G,20G猕猴0.1,≤4.5#10-30,≤7#1-2,≤7#50-100,≤7#10-20,≤7#10-20,胃管8mm#为中国标准,G为国际标准6.是否对活体动物采集血液□是□否,如果是,请描述下表中的信息采血量ml部位频率/时间点针头大小方法安全采血量品种循环血量(CBV)体重1次/周(7.5%CBV)1次/(2-4)周(10%CBV)小鼠75ml/kg20g0.11ml0.15ml大鼠65ml/kg200g0.97ml1.3ml猴70ml/kg3000g15.7521ml第9页共11页7.是否存在对活体动物其它类型样本的采集□是□否,如果是,请在下表描述相关信息样本名称采集量部位频率或时间点器械规格方法8.是否存在外科手术□是□否,如果是,请填下面手术属性和详细内容:(1)是否属于恢复性手术(恢复性:术后需要存活的)□是□否(2)是否需要对同一动物进行多次重大重复手术?□是□否:如果是,请说明充分的科学理由:()(3)参与手术人员和地点主手术者手术助手麻醉师记录员其他辅助人员术后护理人员手术地点(4)描述手术的详细方案和步骤术前准备:术中方案:术后护理:第10页共11页十、实验过程中动物安乐死标准和结束后动物的处置(在合适的选择项前打“”)1.请在下表中勾选至少2个可实施动物安乐死的指标体重□体重迅速下降超过20%外观□被毛杂乱、无光泽□消瘦□严重腹水行为□无法进食和饮水□昏迷□瘫痪□弓背蜷缩□颤抖□呼吸困难症状□严重腹泻且治疗无效□严重脱水□感染严重且治疗无效肿瘤相关□肿瘤直径超过20mm(小鼠)和40mm(大鼠)□肿瘤破溃和感染其它标准2.请描述实验结束后动物的处死方法或因动物意外必须提前实施安死术的方法□CO2(大小鼠、豚鼠,不适合新生动物)□麻醉后脱颈椎(小鼠)□过量注射麻醉剂(兔、犬、猪、猴)*□麻醉后断头(大小鼠,需断头器)*□麻醉后下放血(大小鼠、豚鼠)*□麻醉下灌流*(大小鼠)*□其它安乐死的方法***不推荐直接颈椎脱臼法,推荐CO2或异氟烷等麻醉后颈椎脱臼,如不先麻醉就行颈椎脱臼,请描述详细的科学理由*描述麻醉剂的用法,过量麻醉推荐