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ICS67.050B50中华人民共和国国家标准农业部1077号公告-4-2008水产品中睡烯酣残留量的测定高效液相色谱法Determinationofquinocetoneresidueinfisheryproductsbyhighperformanceliquidchromatographymethod2008-08-11发布2008-08-11实施中华人民共和国农业部发布农业部1077号公告-4-2008目IJ昌本标准的附录:1\为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出e本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。木标准起草单位:农业部水产种质监督检验扭IJi式中心〔广州i)、中国水产科学研究院珠江水产研究所E本标准主要起草人:天l:s)t明、失仕辉、戴晓欣、朱新平、史燕、陈昆葱、糯德博、谢文平。I农业部1077号公告一4-200871产品中隆烯翻残留量的测定高效液捆色谱法1范围本标准规定了水产品中哇烯酣残留量测定的高效榄相色谱法。本标准适用于水产品中l璧烯酣残留茧的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通:i:ti二栋准的引用而成为本标iiI'(tj条款，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容〉耳目修订版『均不适用于本标准，然而.鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB!T6682分析实验室用水规格和试验方法SC/T3016水产品抽样方法3原理以乙酸乙黯提取样品中残留的哇烯脯，旋转蒸发浓缩，流动相榕解，正己;院脱脂，用液相色谱仪一紫外检测法检测，外标法定量。4试剂本标准所用民刑除标明外，其他均为分析纯或更高纯度。4.1水:符合GB/T6682中一级纯水的要求。4.2乙酸乙醋。4.3正己;境。4.4乙腊:色谱纯。4.5喳烯酣标准品:纯度注99.0%。4.6I噩烯酣标准:储备液:准确码:取标准I~10mg，加少盘乙腊梅解，用乙肺定容至100mL棕色容量瓶中.保存于2·C~8'C冰箱中(保存期不超过l个月)。该喳烯酣标准储备洛液浓度为100μg/mL.4.7喳烯酣系列标准工作液:用乙腊将标准储备被稀释至10，u..g/mL作为标准中间?夜，准确量取l璧烯酣标准中间液，用流动相稀释成O.02rIg/rnL,O.05μg!mL,O.l!J.g/mL,0.2μg/mL.O.5μg/mL.1.0μg/mL系列标准工作液，现配现用。5仪器和设备5.1诚相色谱仪，具紫外检测器。5.2高速匀浆机自5.3旋转蒸发仪。5.4分析天平，感盘0.0001go5.5天平，感盘0.01go5.6离心机;5000r/mina农业部1077号公告一4-20085.7离心机:14000rlmin。5.8旋涡泪合器。5.9具塞离心管:50mL.5.10离心管:2.5mL.5.11鸡心瓶:100mL.6试样制备6.1样品预处理水产品取可食肌肉部分，样品切成小块后混匀，均质成肉靡，置于0'C----4'C冰箱中备用，若不能及时检测时，放置一18'C冰箱中贮存备用。6.2 提取准确称取试样(5土o.02)g肉廉样品于50时，具塞玻璃离心管中，加入8时，水，匀浆30s，加入乙酸乙醋15mI.，旋涡棍合3min,4500rJmin?童H二、Gmin.取上清液于100mL鸡心瓶中。另取一SOmL离心智加人15mL乙酸、乙醋，清洗匀浆机刀头，清搅被移人前一离心管中.用玻璃棒捣散离心管中的沉淀，旋涡混合3min,4500r/min离心Smiu，上清液并人100mL鸡心瓶中。在50mL离心管中继续加入ISmL乙酸乙醋，重复上述操作一次。合并-次提取液备用6.3净化备用液于40'e水洛旋转蒸发至干，拥1.OmL流动相梅解，再加入1mL正己烧，旋涡混合lInin，转入2.5mL离心管中，10000r/min离心5min，弃去正己烧层，上清液经0.45Fm有机微孔捷膜过捷、后供攘相色谱分析。6.4色i曹条件6.4.1色谱柱:苯基柱，250mmX4.6mm，Sμm，或性能相当者。6.4.2流动相:乙腊+Jj(=50-L50(V+V)。6.4.3流速:1.0roLlmin.6.4.4柱温，.)0飞。6.4.5检测器波长:312日Ino6.4.6进样韭:20μL。6.5样品测定将20μL喳烯酣系列标准工作被及悴1日被分别注入液相色谱仪中，按上述色谱条件进行色谱分析，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性也因之内。根据标准样品的保留时间定性，外标法定虫。J璧烯固而被相色谱图见附录A，6.6 空白对照试验|撑不加试样外，均按上述测定步骤进行。7计算根据标准工作液的面积和浓度做工作曲线，根据样品提取液的峰面积，从工作曲统计算样品提取液中峰烯酣的残留量，按式(1)计算样品中i孽悔自同费留量。计算结果需扣除空白值。cxvX=一一--:-X1000……………………………..……….(口ηt式中lX一一寸式样巾的喳烯酬的战留盐，单位为微克每千克(f.tglkg);2农业部1077号公告-4-2008C一一样品提取液中喳烯闸的残留量，单位为微克每毫升(μg/mL);V一一最终定容体积，单位为毫升emL);m一一样品质量，单位为克(g)。结果保留三位有效数字。8方法灵敏度、准确度、精密度8. 1灵敏度本方法检1+\限为20μg/kg.定量限为50，.log/峙。8.2准确度标准添加战度为50μg/kg~200μg/kg时，嗤烯酣回收率在70%----120%之间。8,3精密度本方法批内相对标准偏差~10%，批间相对标准偏差~15%c3农业部1077号公告-4-2008附录A(资料性附录)液相色i曹图A.l睡烯酬标准溶班液相色谱圈O.25/J.g/mL哇烯酣标准榕液液相色潜图见图A.I。rnAU432o2嚷:烯。-1。246810mm圈A.l0.25附/mL睡烯酣标准溶液酒相色i曹图A.2空白样品液相色i普图在白样品被相色i曾因见图A.2.mAl!765432。O24图A.26空白样品渣相色谱图810mm4农业部1077号公告一4-2008A.3添加睡烯翻的加标液相色谱图添加50μg/kg喳烯翻的加标液相色谱图见八.3.rn!\U76543m-m.h·m2。-1烯略问。246810mill圈A.3添加50附/kg睡烯翻的加标灌相色谱图5