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ICS65.020.30B43宁波市地方标准DB3302DB3302/T072—2008猪人工授精技术操作规范2008-12-30发布2009-01-01实施宁波市质量技术监督局发布食品伙伴网—2008I前言本标准由宁波市农业局提出并归口。本标准负责起草单位：宁波市鄞州区畜牧业技术服务站、宁波市畜牧兽医局、宁波爱卡畜牧科技有限公司。本标准主要起草人：孙时军、王伟国、徐孝毛、赵陈锋、曾宏杰、项益锋、李俊婷、周浩、刘军阳。食品伙伴网—20081猪人工授精技术操作规范1范围本标准规定了猪人工授精技术的种公猪站站址选择、种公猪站设计建造、实验室与采精室建设、种公猪的调教与采精、精液品质检查、稀释液的配制、精液的稀释、保存和运输以及输精等技术要点。本标准适用于存栏种公猪50以上种公猪站建设和猪人工授精技术操作。50头以下规模的猪人工授精站可以参照执行。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。NY/T388畜禽养殖场环境质量标准NY5027无公害食品畜禽饮用水水质3猪人工授精站站址选择3.1站址选择必须符合当地城乡发展总体规划。3.2环境质量符合NY/T388的规定。3.3离集镇5公里以上。3.4离大自然村落（人口1000人以上）3km以上。3.5离小自然村落（人口1000人以下）1km以上。3.6周边5km范围内无规模养殖场、屠宰场、畜产品加工厂等其它有可能危害种公猪站生物安全的企业。3.7有专用水源，最理想的是有专用小水库或一定容量的山塘。饮水质量应达到NY5027的规定。3.8地势高燥的山区最理想，以座北朝南的山岙为首选地。3.9交通设施条件良好。4种公猪站设计建造4.1种公猪站功能布局4.1.1种公猪站设办公生活区、生产区和对外接待区。办公生活区设在站内上风向。对外接待区设在站外，与办公生活区和生产区彻底隔离。4.1.2各功能区之间设隔离带（围墙或绿化带），设唯一出入口，并设立消毒池。4.1.3与外界连接的道路实行净道和污道分离。4.1.4在站外紧邻生产区的适当位置建粪便堆积棚舍，并设单向通道，用卸粪平台和门与之隔离。4.2种公猪舍的设计4.2.1种公猪站建筑密度控制在20%～30%左右，容积率0.2～0.3之间。4.2.2种公猪舍分为生产种公猪舍、后备种公猪舍和种公猪隔离舍，生产种公猪与后备种公猪舍可以合二为一，种公猪隔离舍处生产和后备种公猪舍下风向，距离越远越好，并完全隔离，有条件的最好建在站外适当位置。食品伙伴网—200824.2.3种公猪舍与实验室紧邻，采精室或设在种公猪舍内，或在种公猪舍与实验室之间单独设立采精室。4.2.4种公猪舍出入口必须设淋浴房和消毒池（盆），种公猪舍设二道门，分别是供饲养人员和粪便出入。4.2.5种公猪舍正面一侧离地75cm设高165cm×宽150cm的传递窗，供如饲料等物品的出入。种公猪舍侧面一侧设高150cm×宽77cm的种公猪出入口，平时关闭，只在种公猪进出时开启。4.2.6根据气候条件选择适当通风降温和加热方式，其设备安装根据说明书要求进行设计。种公猪舍必须有良好的隔热和密封性能，用塑料扣扳或其它隔热材料做种公猪舍的顶棚隔热。设有窗户的种公猪舍，其窗户离地高度必须低于种公猪的背部。4.2.7种公猪舍高度（屋檐到地面之间的距离）3m～3.2m，长度不超过60m。4.2.8种公猪栏面积每头7m2～9m2，栏高1.2m。猪栏地面坡度为1.5%～2%，地面三分之一为漏缝地板，为了便于清粪，种公猪栏地面高出清粪通道地面至少50cm。5实验室与采精室的建设5.1实验室建设与管理5.1.1实验室与采精室相邻，在实验室干燥区、工作台上方的墙上设高60cm×宽50cm传递窗与采精室相通，窗口两侧设门。窗内温度控制在36℃～37℃，只有在传递物品时，二侧的门才能按先后顺序开启，不能同时开启此二扇门。5.1.2实验室地面铺设防滑地砖，工作台和室内四周的墙壁应贴磁砖。工作人员应保持实验室的整洁、干净、卫生，每周彻底清洁一次，地面每周消毒一次，实验室门口设消毒池（盆），每天更换消毒液，室内应安装紫外线灯，每天下午下班时开启，通宵照射消毒。5.1.3实验室分成干燥区和潮湿区，干燥区用于稀释液的配制和精液的检查、稀释、分装，潮湿区安放水槽，用于清洗器械和制备双蒸水。5.1.4非实验室工作人员不准进入实验室。5.1.5各种电器设备应按其要求选择相应插座，除冰箱、精液保存箱、恒温培养箱等外，一般电器要求人走电断，干燥箱无人时设定温度不应高于100℃。5.2器械的清洗与消毒5.2.1尽量使用一次性用品，对于不能用一次性用品代替的器械使用后必须清洗消毒。5.2.2器械的清洗方法：所有器械应以洗洁精或其它去污剂清洗，用自来水冲洗干净，再用蒸馏水漂洗二遍。5.2.3器械的消毒方法：玻璃、金属类器械可采用高压蒸汽10min～15min消毒。对于不能用高压蒸汽消毒而又不便于煮沸消毒的器械，可用湿热蒸汽30min消毒。5.3采精室的建设与管理5.3.1采精室应与实验室相邻，面积大约10m2，地面要求平整、防滑、清洁。5.3.2采精室中间放采精架，采精架的后方地面放置防滑垫（麻袋）。左右两边用直径10cm钢管隔开作为安全区，钢管高0.75m，距墙壁0.6m，间隔0.3m。5.3.3每次采精后必须清洗地面，特别清除精液胶体，采精室内安装紫外线灯，下午下班时开启，通宵照射消毒。6种公猪的调教与采精6.1种公猪的调教6.1.1对种公猪进行调教时应做到胆大心细、动作轻柔、环境安静，禁止粗暴对待种公猪。食品伙伴网—200836.1.2后备公猪8月龄开始调教，每天一次，每次15min～20min。调教成功后应连续采精2d～3d，以形成条件反射。6.1.3在台畜背部洒上发情母猪的尿液，能有效刺激新公猪的性欲，促使其爬跨。6.1.4让新公猪经历几次自然交配或观察其它公猪的爬跨动作，有利于调教。6.1.5先让新公猪爬跨发情母猪，以激发公猪的性欲，待公猪阴茎充分勃起，性欲十分旺盛时将母猪赶走，引导公猪爬跨台畜。6.1.6经过上述方法训练调教仍不能爬跨的，则放弃对该公猪的调教。6.2采精6.2.1采精员穿戴工作服和工作帽，一手带双层手套，另一手持37℃保温杯(内装1次性食品袋)用于收集精液。6.2.2饲养员将待采精的公猪赶至采精栏，用0.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮，再用温水（夏天用自来水）清洗干净，避免药物残留对精子的伤害。6.2.3采精员挤出公猪包皮积液，按摩公猪包皮部，刺激其爬跨假台畜，待公猪爬跨逐步伸出阴茎，脱去外层手套，将公猪阴茎龟头导入空拳，轻握龟头，让其抽动片刻，然后紧握公猪阴茎螺旋状龟头，不让其转动并顺其向前冲力将阴茎顺势拉出。6.2.4在射精前，有节奏的按压龟头能促进射精，弃去最初射出的清亮液体部分，用四层沙布或过滤纸过滤收集浓份精液。当公猪停止射精时可再次有节奏按压龟头，促使公猪第二、三次射精。不能让精液顺手指流入集精杯中，禁止中途终止采精。6.2.5采精员应注意安全，一旦公猪出现攻击行为，采精员应立刻避至安全区。6.2.6采精频率：成年公猪每周1次～2次，青年公猪每周1次。7精液的品质检查7.1精液量以电子天平称量精液，按每克1ml计量精液容积。7.2颜色正常的精液是乳白色或浅灰白，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。如带有绿色或黄色是混有脓液或尿液，若带有淡红色或红褐色是含有血液。这样的精液应舍弃不用，并会同兽医查找原因。7.3气味猪精液略带腥味，如有异常气味，则废弃。7.4pH值用pH试纸测定pH值，用滴管吸取一滴精液滴在试纸上，1min后与标准比色版对比，确定PH值。也可用pH计测量（pH计使用见说明书）。7.5精子活力检查在37℃环境温度、400倍显微镜下对精子活力进行检查，活力是指呈直线运动的精子百分率，在显微镜下观察精子活率，按0.1～1.0的十级评分法进行，鲜精活力要求不低于0.7。7.6精子密度指每毫升精液中所含的精子数，是确定稀释倍数的重要指标。要求用血细胞计数板进行计数或精液密度仪测定。有经验的技术人员可以应用目测法，但每一个月必须对精子进行一次密度测定。7.7精子畸形率必须对新公猪的最初几次射精进行形态检查，以后每个月检查一次。要求畸形率不超过18％。畸形精子种类有：巨型精子、短小精子、双头或双尾精子，顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或与尾部分离、尾部变曲。7.8对精液品质检查结果进行详细的登记。8稀释液的配制和精液的稀释食品伙伴网—200848.1稀释液的配制8.1.1配制稀释液的药品选用分析纯试剂，对含有结晶水的试剂要按摩尔浓度进行换算（如含水葡萄糖和无水葡萄糖）。8.1.2按稀释液配方，准确称量药品，将称量好的稀释粉溶于定量的双蒸水中，用搅拌器助其溶解。8.1.3液态状稀释液冰箱4℃保存，不得超过24h，超过有效贮存期的变质稀释液应废弃。8.2精液的稀释8.2.1精液采集后应尽快稀释，原精液贮存不超过30min。8.2.2稀释液与精液要求等温，两者温差不超过1℃，以精液温度为标准来调节稀释液的温度，绝不能反过来操作。8.2.3稀释时，尽量减少精液的转移，将稀释液沿杯(瓶)壁缓慢加入到精液中，然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌，使之混合均匀。如作高倍稀释时，应先进行低倍稀释（1：1～2），稍待片刻后再将余下的稀释液沿壁缓慢加入，以防造成“稀释打击”。8.2.4稀释倍数的确定：活率≥0.7的精液，按每个输精剂量含40亿个总精子，输精量为80ml～90ml确定稀释倍数。8.2.5稀释后要求静置片刻再作一次精子活力检查，如果稀释前后活力一样，即可进行分装与保存，如果活力下降，说明稀释液的配制或稀释操作有问题，不宜使用，并应查明原因加以改进。9精液的常温保存和运输9.1精液分装后在贮精瓶（袋）上贴好标签，并写清楚公猪的品种、耳号、采精日期（月、日、时）及有关说明。9.2用几层与精液同温的毛巾包被好精液，直接放置17℃精液保存箱中，避免精液温度的突然变化。尽量减少精液保存箱的开关次数，以免造成温度变化对精子的打击。9.3保存过程中每12h将贮精瓶（袋）反转一次，防止精子沉淀而引起死亡。9.4每天检查精液保存箱温度并进行记录，若出现停电应全面检查贮存的精液品质。9.5精液在运输过程中，要保证温度的恒定，并避免精液的震荡。10母猪的输精技术10.1母猪的发情鉴定10.1.1发情鉴定断奶后3d～5d母猪开始发情。在断奶后第三天起必须注意观察母猪的行为。每日早、晚两次对母猪进行试情（上午6：30～8：30和下午16：00～17：30），试情选用善于交谈、唾液分泌旺盛、行动缓慢的老公猪，在安静的环境下，当母猪出现站立不动并接受公猪的爬跨（静立反射）时，即可判断母猪发情成熟。此时即把母猪赶开，以便让公猪集中精力来检查和刺激其它母猪的发情。10.1.2配种适期以如下三个标准来判断母猪的配种适期：——第一是母猪出现静立反射时间；——第二是母猪阴户的颜色由潮红逐渐变成紫红色；——第三是母猪的精神状态由不安转为安静。如果在上午出现“静立反射”，则当天下午输精一次，第二天上午再输精一次。如果在下午出现“静立反谢”，则第二天上午第一次输精，第二天下午第二次输精，二次输精间隔时间必须在8h～18h之间。对于个别发情异常的母猪应根据个体不同情况决定配种时间。10.2