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DBS22吉林省地方标准DBS22/011—2013食品安全地方标准病死畜禽肉鉴别技术规范2013-12-31发布2013-12-31实施吉林省卫生和计划生育委员会发布DBS22/011—2013I前言本标准起草单位：吉林省动物疫病预防控制中心。本标准主要起草人：王楠、邵洪泽、于钦磊、王晓锋、阮书祥、柴方红、高春生、刘芳、王欣睿、石春军、江希玲、蒋云岩、于冰。DBS22/011—20131吉林省食品安全地方标准病死畜禽肉鉴别技术规范1警告使用本标准中理化检验方法的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的生物安全问题。实验室应有程序和适当的措施避免被检样品在存储、检查和检验过程中发生腐败变质、丢失或损坏，同时保证样品的生物安全，保障相关人员、环境的安全，并保证符合国家有关法规规定的条件。2范围本标准规定了未经检疫的没有浸泡、熟制及化学药品处理的猪、牛、羊及家禽等病死动物胴体、分割肉品的感官检查、理化检验方法。本标准适用于病死畜禽肉的鉴别。3规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB27401实验室质量控制规范动物检疫GB16548病害动物和病害动物产品生物安全处理规程4术语和定义下列术语和定义适用于本标准。4.1病死畜禽肉指因病死亡的畜禽胴体及分割的肉品。5样品采集、运输及保存采畜禽胴体腿部、背部、胸部等肌肉各150g，或已分割肉品300g，装入编号的采样瓶中，冷藏运输。样品到达实验室应在24h内进行理化检验，如不能及时检验应于-20℃保存。6感官检查6.1方法6.1.1视检DBS22/011—20132肉眼观察畜禽肉的皮肤、肌肉、脂肪的色泽、组织性状及深层组织的变化。6.1.2嗅检通过嗅觉器官检查畜禽肉有无异常气味。6.1.3触检以手触摸检查组织的弹性、粘性、软硬度及肿物。6.1.4剖检解剖若干部位的皮肤、肌肉、脂肪、淋巴结等，以检查其形状、色泽是否正常。6.2内容6.2.1放血状况畜禽肉呈暗红色或黑红色，脂肪染成淡红色，肌肉断面上可见一处或多处暗红色血液浸润区；血管内有较多血液，呈紫红色；血液中有时可见气泡；宰杀刀口切面平整不外翻，刀口周围组织稍有或全无血液浸润现象；有血液坠积性淤血。6.2.2皮肤畜禽皮肤有出血点、淤血点（出血斑）、坏死、结痂和黄染等变化；禽皮肤呈紫红色、暗黑色、铁青色，冠、髯呈紫红色、青紫色、紫黑色，拔毛不净，毛孔突出，一侧性血液沉积；典型的可见到全身皮肤呈紫红色或青紫色。6.2.3肌肉畜禽肌肉无弹性，灰暗无光，或暗红色、黑红色，松软发粘；剥皮肉的表面常见血珠渗出；切面呈暗红色或紫色，常有暗红色或黑红色血珠渗出。6.2.4脂肪畜禽脂肪呈淡红色、黄红色或绿色。6.2.5淋巴结畜禽淋巴结肿胀、充血、出血；切面呈紫红色、暗红色或黑红色。7理化检验7.1滤纸条血液浸润法见附录A中A.2.1。7.2愈创木脂酊反应法见附录A中A.2.2。7.3硫酸铜肉浸液（肉汤）反应法见附录A中A.2.3。7.4微生物内毒素呈色反应法见附录A中A.2.4。8结果判定8.1感官检查中，符合6.2.1、6.2.2其中一项的判定为病死畜禽肉。DBS22/011—201338.2感官检查中，符合6.2.3、6.2.4、6.2.5其中一项的判定为疑似病死畜禽肉。疑似病死畜禽肉应进行理化检验。8.3疑似病死畜禽肉理化检验，符合下列结果之一的，判定为病死畜禽肉。a)7.1或7.2检验结果为阳性（＋）的。b)7.3检验结果为阳性（＋）的。c)7.4检验结果为阳性（＋）的。9被检样品及废弃物的处理被检样品自发出检验报告后，需保存6个月方可进行无害化处理。检测废弃物及到期的样品需经高温高压等无害化处理。DBS22/011—20134A附录A（规范性附录）病死畜禽肉理化检验方法A.1材料A.1.1器材检验刀、剪刀、镊子、微型天平、微型绞肉机、试管架、试管、小滴管、带塞试管、100mL三角烧瓶、100mL烧杯、培养皿、酒精灯、样品瓶、样品稀释瓶、微量加样器、滤纸条、记号笔。A.1.2试剂5%愈创木脂酊，3%过氧化氢溶液，5%硫酸铜溶液，5%草酸溶液，4%氢氧化钠溶液，1%甲酚蓝乙醇溶液，0.5%硝酸银溶液，40%盐酸溶液，1%高锰酸钾溶液。A.2方法A.2.1滤纸条血液浸润法A.2.1.1操作方法将试验用干滤纸条裁成长5cm、宽0.5cm的滤纸条，取滤纸条一张将其一端插入被检肉品的新切口内1cm-2cm深，经2min-3min观察浸润情况。A.2.1.2结果判定滤纸条被血样液浸润且超出插入部分2mm以上为阳性（＋）；无血样浸润为阴性(－)。A.2.2愈创木脂酊反应法A.2.2.1操作方法从采样肉品切取片状肌肉（3cm×2cm×0.5cm）一块，新鲜切面朝上平置于培养皿中，在肉片上滴加5%愈创木脂酊5mL、3%过氧化氢溶液5～10滴。A.2.2.2结果判定被检肉片变为深蓝色，肉片周围溶液呈深蓝色为阳性（＋）；被检肉片不变颜色，肉片周围溶液呈淡蓝色环或无变化为阴性（－）。A.2.3硫酸铜浸液（肉汤）反应法A.2.3.1操作方法A.2.3.1.1称取样品肌肉10g，剪碎，置于100mL三角烧瓶中，加入蒸馏水30mL，搅均后加塞，置水浴中煮沸10min，趁热过滤，即为10:30肉汤，冷却至室温，待检。A.2.3.1.2已知健康动物肉品肉汤制作方法同被检样品肉汤。A.2.3.1.3取试管3支，分别设定为试验管、对照管Ⅰ、对照管Ⅱ：A.2.3.1.4试验管加入被检肉品肉汤2mL，对照管Ⅰ加入已知健康动物肉品肉汤2mL，对照管Ⅱ加入蒸馏水2mL。A.2.3.1.5分别向3支试管加入5%硫酸铜溶液5滴，混均，静置，观察反应。A.2.3.2结果判定DBS22/011—20135A.2.3.2.1试管内肉汤出现明显浑浊为阳性（＋）。A.2.3.2.2试管内肉汤澄清透明为阴性（－）。A.2.3.2.3加入蒸馏水的试管内液体颜色不发生变化。A.2.4微生物内毒素呈色反应法A.2.4.1操作方法A.2.4.1.1无菌称取样品肌肉10g，剪碎；加入灭菌生理盐水20mL，4%氢氧化钠溶液10滴，研磨成粥状；置于100mL三角烧瓶中，加热至沸，冷却，滴加5%草酸溶液5滴，过滤，即为10:20提取液，待检。A.2.4.1.2已知健康动物肉品提取液制作方法同被检样品提取液。A.2.4.1.3取灭菌试管3支，分别设定为试验管、对照管Ⅰ、对照管Ⅱ：A.2.4.1.4试验管加入待检样品提取液2mL、对照管Ⅰ加入健康动物肉品提取液2mL、对照管Ⅱ加入灭菌生理盐水2mL；A.2.4.1.5分别向3支试管滴加1%甲酚蓝乙醇溶液1滴；A.2.4.1.6分别向3支试管滴加0.5%硝酸银溶液3滴；A.2.4.1.7分别向3支试管滴加40%盐酸溶液1滴；A.2.4.1.8将3支试管振摇混均后，分别滴加1%高锰酸钾溶液2～3滴，振摇混均，观察结果。A.2.4.2结果判定A.2.4.2.1试管内肉品提取液显示蓝紫色或蓝绿色为阳性（＋）。A.2.4.2.2试管内提取液猪肉显红紫色或红褐色，牛、羊肉显浅褐色，禽肉显灰白色为阴性（－）。A.2.4.2.3加入蒸馏水的试管内液体颜色不发生变化。