搜索
书书书中国肿瘤生物治疗杂志摇澡贼贼责：辕辕憎憎憎援遭蚤燥贼澡藻则援燥则早悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则，允怎灶援圆园员猿，灾燥造援圆园，晕燥援猿凿燥蚤：员园援猿愿苑圆辕躁援蚤泽泽灶援员园园苑鄄猿愿缘载援圆园员猿援园猿援园员源·技术方法·四种晕运细胞体外扩增方案及其杀伤活性的比较王晓梦员，，李玲圆，于津浦员，李慧员，齐静员，张澎员，于文文员，任秀宝员，曹水员△（员援天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科，天津市肿瘤防治重点实验室，天津猿园园园远园；圆援天津医科大学附属肿瘤医院中西医结合科，天津猿园园园远园）［基金项目］摇天津市科委应用基础面上项目基金资助（晕燥援员员允悦再月允悦员猿圆园园）；天津医科大学附属肿瘤医院临床试验专项基金资助（晕燥援员员蕴园员）。孕则燥躁藻糟贼泽怎责责燥则贼藻凿遭赠贼澡藻栽蚤葬灶躁蚤灶酝怎灶蚤糟蚤责葬造杂糟蚤藻灶糟藻葬灶凿栽藻糟澡灶燥造燥早赠悦燥皂皂蚤灶泽泽蚤燥灶郧藻灶藻则葬造云燥怎灶凿葬贼蚤燥灶燥枣粤责责造蚤糟葬贼蚤燥灶葬造月葬泽蚤泽（晕燥援员员允悦再月允悦员猿圆园园），葬灶凿贼澡藻栽蚤葬灶躁蚤灶酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠悦葬灶糟藻则陨灶泽贼蚤贼怎凿藻葬灶凿匀燥泽责蚤贼葬造杂责藻糟蚤葬造云燥怎灶凿葬贼蚤燥灶枣燥则悦造蚤灶蚤糟葬造栽则蚤葬造（晕燥援员员蕴园员）［作者简介］摇王晓梦（员怨愿愿鄄），女，山东省滨州市人，硕士生，主要从事肿瘤生物治疗的基础和临床研究。耘鄄皂葬蚤造：憎曾皂凿则藻葬皂员岳员远猿援糟燥皂［通信作者］摇任秀宝（砸藻灶载蚤怎遭葬燥，糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则），耘鄄皂葬蚤造：则憎扎蚤赠蚤岳赠葬澡燥燥援糟燥皂；曹水（悦葬燥杂澡怎蚤，糟燥鄄糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则），耘鄄皂葬蚤造：糟葬燥泽澡怎蚤岳赠葬澡燥燥援糟燥皂。△共同通信作者［网络出版］摇［摘摇要］摇目的：通过对不同晕运细胞培养方案体外扩增产物的细胞免疫表型、扩增倍数以及杀伤活性进行比较，确定一种高效的晕运细胞体外扩增方案。方法：建立源种晕运细胞体外培养方案：方案员为经典的晕运细胞体外扩增方案（陨蕴鄄圆垣陨蕴鄄员缘）；方案圆为陨蕴鄄圆垣陨蕴鄄员缘垣陨蕴鄄员愿；方案猿为陨蕴鄄圆垣陨蕴鄄员缘垣陨蕴鄄苑；方案源为新型晕运培养基（陨蕴鄄圆垣韵运栽猿）。收集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科圆园员圆年圆月至圆园员圆年源月间晚期实体瘤员园例患者的孕月酝悦，按照源种方案进行体外扩增。在体外扩增的园、缘、员园、员缘凿，采用流式细胞仪检测各淋巴细胞亚群（尤其是晕运细胞）的比例；比较各方案体外扩增员缘凿后的晕运细胞的扩增倍数、淋巴细胞亚群比例变化，并采用蕴阅匀法检测各方案扩增产物的晕运细胞杀伤人白血病运缘远圆细胞的活性。结果：各培养方案组体外扩增员缘凿后，细胞总扩增分别为（源园援员依圆园援园园）、（源源援园愿依圆圆援园怨）、（源源援愿圆依圆猿援远苑）、（源远援愿圆依圆缘援园圆）倍。晕运细胞比例由园凿的（圆园援源源依圆援圆猿）豫分别扩增至员缘凿的（源愿援猿园依员猿援怨园）豫、（缘源援苑圆依员圆援圆缘）豫、（缘缘援怨源依员圆援苑园）豫和（缘源援缘依员源援怨猿）豫；晕运细胞的扩增倍数分别为（苑缘援愿远依圆愿援缘苑）、（怨猿援猿圆依猿圆援员远）、（愿愿援远远依圆源援怨源），（缘愿援愿愿依源员援缘猿）。各培养方案组在总细胞扩增倍数、晕运细胞扩增倍数上的差异均无统计学意义（孕跃园援园缘）。前猿种培养方案体外扩增产物的杀伤活性明显高于方案源［（远猿援源园依缘郾园园）豫、（苑苑援猿园依怨援源园）豫、（远圆援员苑依缘援远园）豫增泽（猿苑援猿怨依员园援源圆）豫，均孕约园援园缘］，而方案员、圆、猿之间体外扩增产物杀伤活性的差异则无统计学意义（孕跃园援园缘）。结论：细胞因子组合对于体外大规模培养晕运细胞有着一定的优势，但不同的细胞因子组合（方案员中是否加入陨蕴鄄员愿或陨蕴鄄苑）对晕运细胞体外大规模扩增的影响差异并不显著；但前猿个方案扩增产物对运缘远圆细胞的杀伤活性明显强于方案源。［关键词］摇晕运细胞；陨蕴鄄圆；陨蕴鄄员缘；陨蕴鄄员愿；陨蕴鄄苑；扩增；白血病；运缘远圆细胞；杀伤活性［中图分类号］摇砸怨苑怨援员；砸苑猿园援缘摇摇摇摇［文献标志码］摇粤摇摇摇摇［文章编号］摇员园园苑鄄猿愿缘载（圆园员猿）园猿鄄园猿猿远鄄园远悦燥皂责葬则蚤泽蚤燥灶燥枣枣燥怎则蚤灶增蚤贼则燥晕运糟藻造造藻曾责葬灶泽蚤燥灶泽燥造怎贼蚤燥灶泽葬灶凿蚤贼泽糟赠贼燥贼燥曾蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠宰葬灶早载蚤葬燥皂藻灶早员，蕴蚤蕴蚤灶早圆，再怎允蚤灶责怎员，蕴蚤匀怎蚤员，匝蚤允蚤灶早员，在澡葬灶早孕藻灶早员，再怎宰藻灶憎藻灶员，砸藻灶载蚤怎遭葬燥员，悦葬燥杂澡怎蚤员△（员援运藻赠蕴葬遭燥则葬贼燥则赠燥枣悦葬灶糟藻则孕则藻增藻灶贼蚤燥灶葬灶凿栽澡藻则葬责赠燥枣栽蚤葬灶躁蚤灶悦蚤贼赠，阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣月蚤燥贼澡藻则葬责赠，悦葬灶糟藻则匀燥泽责蚤贼葬造粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿贼燥栽蚤葬灶躁蚤灶酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，栽蚤葬灶躁蚤灶猿园园园远园，悦澡蚤灶葬；圆援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣陨灶贼藻早则葬贼藻凿栽则葬凿蚤贼蚤燥灶葬造葬灶凿宰藻泽贼藻则灶酝藻凿蚤糟蚤灶藻，悦葬灶糟藻则匀燥泽责蚤贼葬造粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿贼燥栽蚤葬灶躁蚤灶酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，栽蚤葬灶躁蚤灶猿园园园远园，悦澡蚤灶葬）［粤遭泽贼则葬糟贼］摇韵遭躁藻糟贼蚤增藻：月赠糟燥皂责葬则蚤灶早贼澡藻糟藻造造蚤皂皂怎灶燥责澡藻灶燥贼赠责藻，贼澡藻藻曾责葬灶泽蚤燥灶枣燥造凿葬灶凿贼澡藻糟赠贼燥贼燥曾蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠燥枣贼澡藻藻曾鄄责葬灶泽蚤燥灶责则燥凿怎糟贼泽蚤灶增葬则蚤燥怎泽糟藻造造糟怎造贼怎则藻泽燥造怎贼蚤燥灶泽贼燥蚤凿藻灶贼蚤枣赠葬皂燥则藻藻枣枣藻糟贼蚤增藻泽燥造怎贼蚤燥灶枣燥则贼澡藻蚤灶增蚤贼则燥藻曾责葬灶泽蚤燥灶燥枣晕运糟藻造造泽援酝藻贼澡燥凿泽：云燥怎则泽燥造怎贼蚤燥灶泽枣燥则藻曾责葬灶泽蚤燥灶燥枣晕运糟藻造造泽枣则燥皂责藻则蚤责澡藻则葬造遭造燥燥凿憎藻则藻藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿，蚤灶糟造怎凿蚤灶早泽燥造怎贼蚤燥灶燥灶藻，葬糟造葬泽鄄泽蚤糟葬造糟怎造贼怎则藻责则燥贼燥糟燥造枣燥则晕运糟藻造造泽（陨蕴鄄圆垣陨蕴鄄员缘），泽燥造怎贼蚤燥灶贼憎燥（陨蕴鄄圆垣陨蕴鄄员缘垣陨蕴鄄员愿），泽燥造怎贼蚤燥灶贼澡则藻藻（陨蕴鄄圆垣陨蕴鄄员缘垣陨蕴鄄苑），葬灶凿泽燥造怎贼蚤燥灶枣燥怎则，葬灶燥增藻造晕运鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟糟怎造贼怎则藻皂藻凿蚤怎皂（陨蕴鄄圆垣韵运栽猿）援员园责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡葬凿增葬灶糟藻凿泽燥造蚤凿贼怎皂燥则泽蚤灶阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣月蚤燥贼澡藻则葬赠，悦葬灶糟藻则匀燥泽责蚤贼葬造粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿贼燥栽蚤葬灶躁蚤灶酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠枣则燥皂云藻遭则怎葬则赠圆园员圆贼燥粤责则蚤造圆园员圆憎藻则藻燥遭贼葬蚤灶藻凿，葬灶凿孕月酝悦泽枣则燥皂贼澡燥泽藻责葬贼蚤藻灶贼泽憎藻则藻蚤泽燥造葬贼藻凿遭赠云蚤糟燥造造鄄匀赠责葬择怎藻凿藻灶泽蚤贼赠早则葬凿蚤藻灶贼糟藻灶贼则蚤枣怎早葬贼蚤燥灶援栽澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣凿蚤枣枣藻则藻灶贼造赠皂责澡燥糟赠贼藻泽怎遭泽藻贼泽（藻泽责藻糟蚤葬造造赠枣燥则晕运糟藻造造泽）憎藻则藻凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠枣造燥憎糟赠贼燥皂藻贼则赠燥灶园，缘，员园葬灶凿员缘凿葬赠援栽澡藻·远猿猿·2013-06-0509:22王晓梦，等援四种晕运细胞体外扩增方案及其杀伤活性的比较糟澡葬灶早藻泽燥枣晕运糟藻造造藻曾责葬灶泽蚤燥灶枣燥造凿葬灶凿贼澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶憎藻则藻凿藻贼藻糟贼藻凿葬皂燥灶早源早则燥怎责泽葬枣贼藻则藻曾责葬灶泽蚤燥灶蚤灶增蚤贼则燥枣燥则员缘凿葬赠泽援栽澡藻葬灶贼蚤鄄贼怎皂燥则糟赠贼燥贼燥曾蚤糟蚤贼赠葬早葬蚤灶泽贼澡怎皂葬灶运缘远圆糟藻造造造蚤灶藻葬皂燥灶早源早则燥怎责泽憎藻则藻皂藻葬泽怎则藻凿怎泽蚤灶早蕴阅匀葬泽泽葬赠援砸藻泽怎造贼泽：粤枣贼藻则藻曾责葬灶泽蚤燥灶枣燥则员缘凿葬赠泽，贼澡藻藻曾责葬灶泽蚤燥灶枣燥造凿泽蚤灶源早则燥怎责泽憎藻则藻（源园援员依圆园援园园），（源源援园愿依圆圆援园怨），（源源援愿圆依圆猿援远苑）葬灶凿（源远援愿圆依圆缘援园圆），则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援栽澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣晕运糟藻造造泽蚤灶源早则燥怎责泽蚤灶糟则藻葬泽藻凿枣则燥皂（圆园援源源依圆援圆猿）豫燥灶凿葬赠园贼燥（源愿援猿园依员猿援怨园）豫，（缘源援苑圆依员圆援圆缘）豫，（缘缘援怨源依员圆援苑园）豫葬灶凿（缘源援缘依员源援怨猿）豫燥灶凿葬赠员缘，则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援栽澡藻藻曾责葬灶泽蚤燥灶枣燥造凿泽燥枣晕运糟藻造造泽蚤灶源早则燥怎责泽憎藻则藻（苑缘援愿远依圆愿援缘苑），（怨猿援猿圆依猿圆援员远），（愿愿援远远依圆源援怨源）葬灶凿（缘愿援愿愿依源员援缘猿），则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援晕燥泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻燥枣贼澡藻贼燥贼葬造糟藻造造藻曾责葬灶泽蚤燥灶，晕运糟藻造造泽藻曾责葬灶泽蚤燥灶枣燥造凿泽葬灶凿贼澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶泽燥枣凿蚤枣枣藻则藻灶贼栽糟藻造造泽泽怎遭泽藻贼泽（悦阅猿，悦阅源葬灶凿悦阅愿）憎葬泽燥遭泽藻则增藻凿葬皂燥灶早贼澡藻源早则燥怎责泽援栽澡藻糟赠贼燥贼燥曾蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠燥枣贼澡藻藻曾责葬灶泽蚤燥灶责则燥凿怎糟贼泽蚤灶泽燥造怎贼蚤燥灶燥灶藻，贼憎燥葬灶凿贼澡则藻藻憎藻则藻澡蚤早澡藻则贼澡葬灶贼澡葬贼燥枣泽燥造怎贼蚤燥灶枣燥怎则蚤灶增蚤贼则燥（［远猿援源园依缘援园园］豫，［苑苑援猿园依怨援源园］豫，［远圆援员苑依缘援远园］豫增泽［猿苑援猿怨依员园援源圆］豫，孕约园援园缘）援栽澡藻则藻憎葬泽灶燥泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻葬皂燥灶早贼澡藻猿早则燥怎责泽遭藻枣燥则藻（孕跃园援园缘）援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶：晕运鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟糟赠贼燥噪蚤灶藻澡葬增藻早则藻葬贼蚤灶枣造怎藻灶糟藻燥灶贼澡藻藻曾责葬灶泽蚤燥灶燥枣晕运糟藻造造泽蚤灶增蚤贼则燥援匀燥憎藻增鄄藻则，灶燥泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻憎葬泽枣燥怎灶凿葬皂燥灶早增葬则蚤燥怎泽糟赠贼燥噪蚤灶藻糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶泽泽燥造怎贼蚤燥灶泽援栽澡藻糟赠贼燥贼燥曾蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠燥枣贼澡藻藻曾责葬灶鄄泽蚤燥灶责则燥凿怎糟贼泽蚤灶泽燥造怎贼蚤燥灶燥灶藻，贼憎燥葬灶凿贼澡则藻藻燥灶运缘远圆糟藻造造泽憎藻则藻泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠澡蚤早澡藻则贼澡葬灶贼澡葬贼燥枣泽燥造怎泽蚤燥灶枣燥怎则援［运藻赠憎燥则凿泽］摇晕运糟藻造造；陨蕴鄄圆；陨蕴鄄员缘；陨蕴鄄员愿；陨蕴鄄苑；藻曾责葬灶泽蚤燥灶；造藻怎噪藻皂蚤葬；运缘远圆糟藻造造；糟赠贼燥贼燥曾蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠［悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则，圆园员猿，圆园（猿）：猿猿远鄄猿源员］摇摇摇摇晕运细胞是机体重要的免疫细胞，是机体抵抗肿瘤和病毒感染的第一道防线。晕运细胞在杀伤靶细胞的过程中无酝匀悦限制性，可有效杀伤多种肿瘤细胞［员］。目前，随着临床生物治疗的广泛开展，晕运细胞治疗取得了一定的临床疗效。但是正常人体外周血中晕运细胞数量较少，仅占外周血淋巴细胞的员园豫耀圆园豫［圆］。因此，如何获得高质量高纯度的晕运细胞成为其临床应用最为关键的问题之一［猿］。据报道［源鄄缘］，多种细胞因子组合被广泛应用于晕运细胞的体外扩增。陨蕴鄄圆和陨蕴鄄员缘的联合应用已经作为体外扩增晕运细胞的经典方案，陨蕴鄄圆是重要的诱导晕运细胞增殖的细胞因子；陨蕴鄄员缘可以上调晕运细胞表面受体的表达，同时促进悦阅缘远垣细胞的扩增［远］。除此之外，近年来发现其他细胞因子同样可以调节晕运细胞的活性以及分化。陨蕴鄄苑可以促进晕运细胞分化和诱导产生细胞毒性淋巴细胞的标志蛋白［苑］；陨蕴鄄员愿能够诱导员型辅助性栽细胞（栽澡藻造责鄄藻则糟藻造造贼赠责藻员，栽澡员细胞）的活化，提高晕运细胞的杀伤活性［愿］。研究者在探讨不同细胞因子组合对于晕运细胞体外扩增影响的同时，也对培养基的选择进行了研