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65.020.30B47DB51四川省地方标准DB51/T917—2009桑蚕一代杂交种浸酸技术规程ThetechnicalrulesforacidtreatmentofsilkwormF1hybrideggs(Bombyxmori)2009-03-05发布2009-03-10实施四川省质量技术监督局发布DB51/T917-20091前言本标准附录A为资料性附录。本标准由四川省农业厅提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局发布。本标准起草单位：四川省蚕业管理总站、四川省阆中蚕种场、四川省南充蚕种场、绵阳市蚕种冷库、内江市蚕种冷库。本标准主要起草人：曾华明、杨彪、吴钢、谢忠良、朱洪顺、冯光樯、龚大刚、陈刚、骆文。DB51/T917-20092桑蚕一代杂交种浸酸技术规程1范围本标准规定了四川省桑蚕一代杂交种浸酸技术要求。本标准适用于四川省桑蚕一代杂交种的浸酸。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。NY326桑蚕一代杂交种NY/T327桑蚕一代杂交种检验规程NY/T979桑蚕一代杂交种繁育技术规程DB51/T845桑蚕一代杂交种冷藏技术规程DB51/T599桑蚕种包装、标志、运输3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1浸酸acidtreatment蚕卵产下后经特定温度保护，在适当时期内施以一定温度、浓度和时间的盐酸浸渍，促使胚胎继续发育的蚕种人工孵化处理方式。3.2即时浸酸instantacidtreatment蚕卵产下后经特定温度保护，在滞育卵发育达到胚胎形成期，施以一定温度、浓度和时间的盐酸浸渍，停止其滞育进程，促使继续发育的处理方式。3.3冷藏浸酸acidtreatmentofrefrigeratedeggs蚕卵产下后经特定温度保护，于滞育卵胚胎发育的早期入库冷藏，在冷藏的适当时间范围内出库，施以一定温度、浓度和时间的盐酸浸渍，促使继续发育的处理方式。3.4常温浸酸acidtreatmentatroom-temperature对适宜即时浸酸或冷藏浸酸的蚕卵，用不加温盐酸在一定浓度、时间范围内浸渍，促使继续发育的处理方式。4浸酸准备4.1主要消耗物资每10000张蚕种准备盐酸300kg～350kg、食盐35kg～40kg。4.2主要设施设备检修并试运行浸酸设施；检查水、电、空调和风干、脱水、脱粒设备，以及浸酸笼、浸酸架、尼龙纱袋、比重瓶、过筛篓；校对浸酸温度计、比重计、秒表等计量器具。4.3试酸DB51/T917-20093见附录A盐酸的生物鉴定。4.4预配盐酸浸酸前1d，在常温下预配盐酸。即时浸酸，盐酸比重配成1.080～1.082；冷藏浸酸，盐酸比重配成1.099～1.101。5浸酸5.1流程桑蚕一代杂交种浸酸流程见图1。出库外库保护自然温度保护及装笼浸酸脱酸脱粒脱水风干入库冷藏盐水比选脱盐脱水风干风选整理装盒入库冷藏出库发种入库冷藏过筛漂洗图1桑蚕一代杂交种浸酸流程5.2操作5.2.1蚕种出库计划浸酸的蚕种，于出库前夜按生产场别、品种、批次、数量，在库内清理、分批放置。浸酸前4h～5h开始第1批蚕种出库，以后每隔1h～2h出库1批。5.2.2外库保护每批蚕种由内库移至外库，经中间温度保护，再移至库外，置于自然温度。蚕种接触中间温度及时间，见DB51/T845桑蚕一代杂交种冷藏技术规程5.1、6.1.2。5.2.3自然温度保护及装笼置于库外的蚕种，及时解捆，感受自然温度（以不超过35℃为宜，避免太阳光直射），并装笼。具体步骤：每50大张摊放于1个蚕箔，散冷1h；将蚕种按100大张/笼插入浸酸笼，外套尼龙纱袋，扎紧袋口，悬挂标识牌，注明场别、品种、批次、数量，再将浸酸笼放入浸酸架，排队等候浸酸，时间1h。蚕种接触自然温度的时间，见DB51/T845桑蚕一代杂交种冷藏技术规程5.1、6.1.2。5.2.4浸酸5.2.4.1浸酸前，调节盐酸比重至6.2、7.2规定盐酸比重；调节液温，加温浸酸可比6.2.1、7.2.1规定液温高0.2℃～0.3℃。5.2.4.2将蚕种浸入酸缸，盐酸淹没完浸酸笼即开始计时。同时，将浸酸笼上下左右移动，排出空气。5.2.4.3浸酸1min内，可将浸酸笼提出液面滤酸1次～2次，再迅速浸入酸缸。未冷藏蚕种滤酸1次，冷藏蚕种滤酸2次。每次滤酸时间在10s内为宜。5.2.4.4浸酸1min时，测液温1次，以后每隔1min或2min测液温1次。每次测得的液温与目的温度比较，每升高或降低0.5℃，浸酸时间缩短或延长10s。5.2.4.5到达浸酸时间前10s，做好提种准备；时间到，立即提起蚕种，滤酸，时间30s；即行脱酸。5.2.4.6新1轮浸酸开始，重复上述操作。浸酸中，每浸5架蚕种，调节盐酸液温和比重。5.2.5脱酸脱粒蚕种起缸滤酸后，移入梯级脱酸池逐级脱酸，直至脱尽酸味。时间20min～30min。DB51/T917-20094脱酸后的蚕种，置于盛有清水的脱粒槽中，洗落蚕连纸上残留的蚕卵。5.2.6过筛漂洗收集洗落蚕卵，过筛，筛去纸屑杂物。将蚕卵置于清水中，轻揉轻洗，漂去纸浆、鳞毛等杂质和上浮的不良卵。5.2.7脱水风干5.2.7.1脱粒漂洗后的蚕卵，置于纱布袋、放入离心机脱水，时间3min。离心机转速控制在250r/min～300r/min为宜。5.2.7.2脱水后的蚕卵及时送至室温24℃～25℃的干燥室，按1kg/台将蚕卵摊放于特制尼龙纱干燥台上，开动电扇垂直吹风，轻翻蚕卵，直至干燥。干燥时间20min～30min。5.2.7.3风干后需及时入库冷藏的蚕卵，干燥室温度控制在20℃～21℃为宜。5.2.8盐水比选5.2.8.1将食盐与水按1∶4（W/W）的比例配制成比重为1.13～1.15的盐水母液，备用。按轻重比开差不超过0.010，配制轻比、重比盐水，同时根据不同品种、生产使用期别，通过试比，确定轻重比盐水比重。5.2.8.2将盐水注入比重瓶中约8成，倒入蚕卵，充分搅拌，校定盐水比重，待蚕卵沉浮稳定、层次分明后，即可分层放卵，收集良卵。重比淘汰下沉不良卵，轻比淘汰上浮不良卵，轻重比云层卵分别收集。5.2.8.3云层卵可放宽轻重比开差0.005进行复比。复比的良卵可合入该批次正批良卵中，复比云层卵应淘汰。5.2.8.4蚕卵在盐水中的时间以不超过1h为宜。5.2.9脱盐脱水盐水比选后的蚕卵，置于清水中轻轻翻动，多次换水，脱尽盐味后，按5.2.7.1进行脱水。5.2.10风干风选脱盐脱水后的蚕卵按照5.2.7.2进行第2次风干。蚕卵风干后，及时送至室温24℃～25℃的风选室，将蚕卵倒入长方形漏斗中，开动电扇水平吹风，同时放开底门，吹去轻轻落下蚕卵中夹杂的轻小卵、瘪卵及杂质。收集良卵，淘汰不良卵。5.2.11整理装盒5.2.11.1风干风选后的蚕卵，及时送至室温24℃～25℃的整理装盒室。5.2.11.2按照NY/T327桑蚕一代杂交种检验规程6.2.3.3第二款，逐批抽样、计算，调查良卵数、不良卵数，计算良卵率。凡批良卵率低于NY326桑蚕一代杂交种4.1.2规定的，按照5.2.8～5.2.10重新比选。5.2.11.3根据NY326桑蚕一代杂交种4.1.2规定每盒良卵数和调查的平均克良卵数，按式（1）计算批应装的每盒蚕卵重量:WS＝NH/NG………………………………（1）式中：WS——散卵种每盒应装蚕卵重量，单位为克（g）；NH——规定每盒良卵粒数；NG——平均克良卵粒数。5.2.11.4准备散卵盒、蚕种箱、合格证、蚕种标志，校对称量仪器，按照5.2.11.3计算的每盒蚕卵重量克数，称量装盒。封口、粘贴蚕种标志，按照DB51/T599桑蚕种包装、标志、运输5.1.2、5.1.3b)执行。5.2.11.5封口晾干后，及时捆扎蚕种，每10盒捆成1扎，放入蚕种专用箱。5.2.12出库发种整理装盒完毕的蚕种，按照DB51/T599桑蚕种包装、标志、运输6.1、6.2，出库发种运输。5.3入库冷藏蚕卵在浸酸操作流程的相关环节，可分别入库冷藏抑制，按预定时间出库，完成后续操作。5.3.1脱酸脱水风干后入库冷藏。见DB51/T845桑蚕一代杂交种冷藏技术规程5.2.1、6.2.1乙胚子冷DB51/T917-20095藏。5.3.2脱盐风干风选后入库冷藏。见DB51/T845桑蚕一代杂交种冷藏技术规程5.2.2、6.2.2丙胚子冷藏。5.3.3整理装盒后入库冷藏。见DB51/T845桑蚕一代杂交种冷藏技术规程5.2.3、6.2.3丁胚子冷藏。5.4脱粒浸酸上浆连纸（布）产卵的蚕种，浸酸前应先将蚕种分批置于盛有清水的脱粒槽中，洗落并收集蚕卵，按5.2.6、5.2.7.1，经过筛漂洗（脱浆）、脱水后，再浸酸。6即时浸酸6.1浸酸适期盛产卵开始，蚕卵于24℃～25℃保护，经过20h～30h，大部分卵呈淡黄色，少数呈黄色时为浸酸适期。6.2浸酸标准6.2.1加温浸酸即时浸酸种加温浸酸标准见表1。表1即时浸酸种加温浸酸标准品种盐酸比重盐酸液温℃浸渍时间min中系品种1.075465.0～5.5日系品种1.075465.5～6.06.2.2常温浸酸即时浸酸种常温浸酸标准见表2。表2即时浸酸种常温浸酸标准浸渍时间min盛产卵至浸酸经过时间h盐酸液温24℃盐酸液温27℃盐酸液温29℃盐酸比重1060～7040～70401560～8060～8040～5020～2560～10060～8040～501.100～1.1106.3浸酸操作操作方法同5.2，但不进行盐水比选。根据6.1蚕卵达到浸酸适期，可按5.2.3直接装笼浸酸。7冷藏浸酸7.1浸酸适期见DB51/T845桑蚕一代杂交种冷藏技术规程6.1.2。7.2浸酸标准7.2.1加温浸酸冷藏浸酸种加温浸酸标准见表3。DB51/T917-20096表3冷藏浸酸种加温浸酸标准品种盐酸比重盐酸液温℃浸渍时间min中系品种1.092～1.09447.85.5～6.0日系品种1.092～1.09447.86.0～6.5备注浸渍时间应按品种特性、入库卵色及冷藏日数适度调整7.2.2常温浸酸冷藏浸酸种常温浸酸标准见表4。表4冷藏浸酸种常温浸酸标准浸渍时间min冷藏日数（d）盐酸液温30℃盐酸液温29℃～30℃盐酸比重40～6030～50－60～70－20～401.140备注浸渍时间应按品种特性、入库卵色及冷藏日数适度调整7.3浸酸操作操作方法同5.2。DB51/T917-20097附录A（资料性附录）盐酸的生物鉴定A.1盐酸的特性蚕种浸酸用盐酸通常是工业粗盐酸。其HCL含量为26％～32％，比重为1.13～1.16。A.2鉴定方法A.2.1准备蚕种符合即时浸酸或冷藏浸酸适期的平附蚕种1张～2张。A.2.2准备盐酸新购盐酸，抽取5000mL/批。A.2.3鉴定步骤A.2.3.1甲醛固定将蚕种每张分成4份～8份，放入液温32℃左右、浓度2%～3％的甲醛溶液中，卵粒不露出液面，浸渍5min～6min后取出，滴去浸液20min左右，待浸酸。A.2.3.2浸酸a)根据蚕种类别，按6.2或7.2，将待鉴定的盐酸配制成目的比重、液温的盐酸溶液。b)将已甲醛固定的待浸蚕种，浸入盐酸溶液中，按照6.2或7.2确定浸酸时间浸酸。c)浸酸时间到，及时取出蚕种，脱酸、晾干。A.2.3.3催青调查孵化情况a)将脱酸、晾干的蚕种及时置于催青条件催青。b)观察浸酸效果，样卵孵化后，逐日调查孵化情况。c)若样卵孵化齐一，则该盐酸可以使用；若样卵孵化不齐，甚至不孵化，需分析原因并重新进行盐酸生物鉴定，如果出现同样结果，则该盐酸不能使用。A.2.4注意事项未经生物鉴定的盐酸不能使用。浸散卵种和浸框制种的盐酸不能混用。