DAT 26-2000挥发性档案防霉剂防霉效果测定法

DA中华人民共和国档案行业标准DA/T26-2000挥发性档案防霉剂防霉效果测定方法2000-12-06批准2001-01-01实施中华人民共和国国家档案局发布I目录1范围...........................................................................................................................12测试用品与设备.......................................................................................................12·1用品..............................................................................................................12·2设备..............................................................................................................23测试条件...................................................................................................................24测试方法...................................................................................................................35结果测定...................................................................................................................5附录A..........................................................................................................................6Al培养基的配制..................................................................................................6A2霉菌培养基配方..............................................................................................7附录B..........................................................................................................................8Bl玻璃器皿的清洗...............................................................................................8B2玻璃器皿的灭菌...............................................................................................8附录C........................................................................................................................10C1步聚................................................................................................................10C2要求................................................................................................................10C3计数................................................................................................................11附录D........................................................................................................................12Dl接种................................................................................................................12D2保藏................................................................................................................12中华人民共和国国家档案局2000-12-06发布2001-01-01实施1中华人民共和国行业标准DA/T26-2000挥发性档案防霉剂防霉效果测定方法1范围本标准规定了挥发性档案防霉剂防霉效果测试材料、仪器设备、测试条件、测试方法、结果评定等内容。本标准适用于挥发性档案防霉剂防霉效果的测定。2测试用品与设备2·1用品2·1·1培养基2·1·2供试菌种2·1·3受试底物2·1·4医用喷雾器2·1·5医用剪刀2·1·6医用纱布2·1·7小试管(15mm╳15Omm)2·1·8培养皿(90mm)2·1·9移液管(吸管)(1mL)DA/T26-2000中华人民共和国国家档案局2000-12-06发布2001-01-01实施22·1.10三角烧瓶(25OmL、5OOmL)2·1·11烧杯(25OmL、5OOmL、10OOmL)2·1·12量筒(1OOmL、5OOmL、10OOmL)2·1·13带盖的圆柱形玻璃器皿(容积约为12OOmL)2·2设备2·2·1手提医用消毒器2·2·2架盘天平2·2·3电热干燥箱2·2·4恒温恒湿培养箱2·2·5电冰箱2·2·6无菌操作台或无菌室3测试条件3·1温度28℃±2℃。3·2湿度RH≥93%。3·3培养基土豆汁培养基(配方见附录A)。3·4菌种杂色曲霉(AspergillusVersicolor)黑曲霉(Aspergillusniger)产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)桔青霉(Penicilliumcitrinum)DA/T26-2000中华人民共和国国家档案局2000-12-06发布2001-01-01实施3球毛壳霉(Chaetomiumglobasum)腊叶芽枝霉(Cladosporiumherbarum)绿色木霉(Trichodermaviride)宛氏拟青霉(Paecilomycesvarioti)3·5菌量(见附录C)混合孢子悬浮液浓度:1╳lO5个/mL～1╳lO7个/mL。3·6底物宣纸、卡纸、书写纸、牛皮纸、漆纸、漆布(尺寸大小为2Omm╳3Omm)，胶片、录像带(尺寸大小为自然宽度╳3Omm)。3·7药量10OOmL体积中悬挂1.Og(即10OOmg)药物。3·8时间放置28天。4测试方法4·1消毒器皿先用清水中加入数滴洗涤剂的洗洁液浸洗圆柱玻璃器皿，再用清水冲洗，最后用75%乙醇涂擦消霉，待干，备用。4·2准备无菌水准备好带玻璃珠的无菌生理盐水和不带玻璃珠的无菌水若干瓶。即在25OmL三角瓶中注人1OOmL生理盐水，并放人几十粒玻璃珠，灭菌(参见附录B)。在25OmL三角瓶中注人2OOmL自来水，同样灭菌。4·3制备霉菌孢子悬浮液(见附录D)DA/T26-2000中华人民共和国国家档案局2000-12-06发布2001-01-01实施4在无菌室或无菌操作台，在火焰旁，用接种环分别挑取8株供试霉菌，接人带上述玻璃珠的无菌生理盐水中，用手振荡3min～5min，使孢子充分分散，复制成1╳lO5个/mL～1╳lO7个/mL的霉菌孢子悬浮液，备用。4·4放置样品(见图1)4·4·1在适当的玻璃器皿内，悬挂受试底物，并喷洒霉菌孢子悬浮液(以表面湿润为宜)，晾干，备用。4·4·2在圆柱形玻璃器皿底部倒人2OOmL左右的无菌水(其目的是保持湿度，同时占去多余容积，使玻璃器皿内的空间容积正好为10OOmL。4·4·3将1.0g挥发性防霉剂用二层纱布或无纺布包裹后悬挂于玻璃器皿中央部位。4·4·4在防霉剂周围悬挂受试底物(间隔至少1cm，不能相互接触)4·4·5将玻璃器皿瓶口用盖子盖紧(或用透明复合塑料膜包扎)，保持密封。4·4·6将玻璃器皿置于恒温恒湿培养箱内，在28℃±2℃，RH≥95%条件下，培养28天。4·5空白对照在圆柱形玻璃器皿中央部位不悬挂挥发性防霉剂，重复上述步聚，作空白对照。当空白对照容器内的受试底物发霉严重时(即长霉程度++～+++)，测试有效，否则必须重做。DA/T26-2000中华人民共和国国家档案局2000-12-06发布2001-01-01实施5图15结果测定用肉眼观察长霉程度并进行等级评定(见表1)。表1长霉程度和等级菌丝生长情况长霉程度长霉等级试样表面看不到菌丝生长-0级试样表面看到菌丝生长，但菌丝生长面积不超过全面积的三分之一+1级试样表面看到菌丝生长，菌丝生长面积超过全面积的三分之一，但不超过全面积的三分之二++2级试样表面看到菌丝生长，菌丝生长面积超过全面积的三分之二+++3级提示:长霉等级0级表示挥发性防霉剂防霉效果很好，1级表示效果较好，2级表示效果较差，3级表示效果很差。DA/T26-2000中华人民共和国国家档案局2000-12-06发布2001-01-01实施6附录A(标准的附录)培养基的配制与灭菌Al培养基的配制培养基从形式区分有固体培养基和液体培养基:从内容区分有合成培养基和天然培养基等。其配制步聚为:a)物料称量明确培养基的组成部分，根据需要配制的量计算好各成分的重量，逐一称取。b)溶解一般情况下，可将几种原料和药品一起放大烧杯内调匀，并定容到需要的体积。c)调节pH微生物生长需要合适的pH，通常用1mol/L(1N)NaOH，1mol/L(1N)HCl或0.5mol/L(lN)H2S04调节pH至5.0。调节时要慢慢滴入，不断用pH试纸检查，至所需要的pH为止。d)加热溶解配制固体培养基一般加入2%的琼脂(俗称洋菜)，与培养基一起加热溶解。加入琼脂后，须不断搅拌，以免琼脂粘底烧焦。e)过滤一般来说，培养基配制好后要过滤，滤去不溶物或块状物。过滤必须趁热进行，通常用4～6层纱布作滤层。无不溶物或块状物的培养基也可以不过滤。f)分装DA/T26-2000中华人民共和国国家档案局2000-12-06发布2001-01-01实施7按照需要，分装进试管、培养皿或三角烧瓶中。一般只装到试管的1/5，培养皿中装入15mL～2OmL，三角烧瓶装入一半量。g)加棉花塞或纱布、绒布扎口培养基灌装后，应在试管口或三角烧瓶口上加棉花塞或纱布、绒布扎口，其作用有二:一是阻止外界微生物进入，二是保证有良好的通气，以便微生物能不断获得无菌空气。h)包扎棉塞塞好后，试