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B52DB13河北省地方标准DB13/T792—2006太湖新银鱼人工繁殖技术规范2006-05-30发布2006-05-30实施河北省质量技术监督局发布食品伙伴网—2006I前言本标准由河北省水产局提出。本标准起草单位：河北省平山县岗南水库渔政站、平山县水产技术推广站、河北省标准化研究院。本标准主要起草人:高雪岭、檀英桃、康格平、宋俊石、闫立君、李红梅、鲁松、闫保国。食品伙伴网—20061太湖新银鱼人工繁殖技术规范1范围本标准规定了太湖新银鱼（N.taihuensisChen）人工繁殖的环境条件、亲鱼、人工授精、孵化及受精卵运输的操作技术规范。本规范适用于太湖新银鱼的人工繁殖。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB11607渔业水质标准NY5051无公害食品淡水养殖用水水质NY5071无公害食品渔用药物使用准则3环境条件3.1亲鱼生长发育水域的环境条件水域面积应在200hm2以上，平均水深1.5m以上。流域内没有对水域水质及生态环境构成威胁的污染源，水质符合GB11607的规定。3.1采卵室环境条件距亲鱼生长水域岸边500m以内，有足够的操作空间，室温17℃～23℃,水源方便，照明设施齐全。3.2孵化室环境条件孵化室内要洁净，通风，避免阳光直射，水源及排水方便，室内温度控制在17℃～23℃之间。4亲鱼4.1亲鱼成熟度的鉴别4.1.1雌鱼成熟的标志性成熟的雌鱼腹部饱满而柔软，鱼卵充分游离，轻压腹部可见卵粒从泄殖孔流出，雌鱼臀鳍中部的鳍条不延长，整个臀鳍呈三角形，且基部两侧无鳞，小黑点排列稀疏。4.1.2雄鱼成熟的标志性成熟的雄鱼，其臀鳍中部的鳍条较长，使整个臀鳍呈扇形。在解剖镜下可见臀鳍基部两侧各有一行排列整齐的鳞片。此外，臀鳍基部两侧各有一行排列整齐的小黑点。4.2亲鱼捕捞4.2.1成熟度检查3月中旬开始，每天采捕、检测亲鱼的成熟度和成熟百分比。当性腺发育到Ⅴ期的雌亲鱼比例达到20％即可进行大规模捕捞。4.2.2捕捞时间3月下旬至4月下旬。水温11℃～16℃为最佳捕捞时期。一般选择天气晴朗、有微风的下午进行捕捞作业。4.2.3捕捞地点在水深2m～3m，底质为沙石或硬泥易形成小银鱼产卵场的地方。4.2.4捕捞方法食品伙伴网—20062可用拖网、刺网、拉网等进行捕捞，并根据渔获量每30min左右收取亲鱼一次。起网后将亲鱼沥干水倒入保温桶或泡沫箱，快速运往采卵室。4.3亲鱼质量体长大于55mm，成熟度好，鱼体鲜亮透明，死亡时间不超过1.5h。5人工授精5.1授精用具培养皿或研钵；尖头镊子；干毛巾。5.2用具消毒清洗高锰酸钾20mg/L浸泡10min或甲醛50mg/L浸泡10min，再用清水冲洗、擦干。5.3授精过程5.3.1授精水温受精适宜水温13℃～20℃。5.3.2雌雄配比按1:1～1:4进行雌雄配比，以1:2为宜。5.3.3授精将选好的雄鱼洗净，擦干体表水分，用尖头镊子从生殖孔处将腹部挑开取出精巢放入擦干的培养皿或研钵内，将其捣碎；将选好的雌鱼擦去体表水分，一手提鱼头部，一手自上而下推压腹部，将卵子直接挤入盛精子的容器内，并用雌鱼尾部搅动卵子，使精卵充分混合，随即加入生理盐水30ml～60ml，同时晃动盛卵的容器10s～15s。从精子采集开始，整个过程要在40s内完成；然后静止3min，取出雌鱼，用40目滤网过滤掉杂物，再用清水漂洗2次～3次，去除污物后转入孵化室。6孵化6.1孵化池或孵化容器孵化池可用砖砌成长1.5m～2.0m，宽1.0m～1.5m，高20cm的水池，内铺塑料布，池底平坦。加水5cm～10cm。孵化容器可选用白磁盘、塑料盆等，并可制做容器架，多层立体存放。放卵前对孵化池或孵化容器按5.2的规定进行消毒。6.2孵化用水地表水或井水，水质符合NY5051的规定。地表水要经120目筛绢过滤，去除敌害生物；井水要经曝气（晒）？。水温15℃～20℃。6.3放卵密度每平方米放卵20万～30万粒。6.4日常管理水温控制在15℃～20℃之间，每天换水一次，每次换水量为1/2～1/3，温差不得超过±1.5℃，并轻轻搅动卵粒，使之分布均匀，避免卵粒过度堆积。每日用解剖镜或显微镜检查卵粒的发育情况，发现死卵、坏卵及时吸出。一般4d～6d破膜，孵化积温约2050度·时。鱼苗破膜后，每天换水2次～3次，排水时要用80目筛绢过滤，以阻挡鱼苗流出。2d后即可放流。做好孵化日志。6.5疾病防治高锰酸钾0.1mg/L浸泡10min～20min，每3d一次。发生水霉菌感染可用抗真菌药物或1％食盐与小苏打合剂（1:1）浸浴治疗。用药准则按NY5071的规定执行。6.6受精卵质量6.6.1受精率的计算时间受精率的计算应在受精卵发育至原肠中后期时进行。6.6.2受精率的计算方法食品伙伴网—20063用小捞海搅动卵粒，使之悬浮水中，然后捞取卵子放入培养皿中，加少许水，解剖镜下观察，分别计量受精卵数量和卵子总数量。每个孵化容器中抽样3次，每次捞取卵数不少于300粒，3次的平均受精率即为本容器卵的受精率。6.7授精卵质量要求肉眼观察近似圆形，色泽晶莹透明，卵粒饱满，沉性，略有吸附力；在解剖镜下观察，受精卵卵膜光滑，上有呈放射状的卵膜丝布散，卵周隙清晰；高囊胚及以后各期的受精卵，经静置沉淀3min后，每毫升受精卵数不超出4500粒；95％的受精卵卵径应达到0.6mm以上；受精率应大于60％。7受精卵运输7.1受精卵的运输时间受精卵的运输应在受精卵发育到原肠中后期,计算受精率后进行。7.2运输方法水温15℃～20℃时，短途运输可采用敞口容器或塑料袋，每升水装卵10万粒，不需充氧，4h内放流；长途运输采用塑料袋充氧，每升水装卵4万粒，装水体积占塑料袋有效容积的1/3，充氧2/3，12h内放流。食品伙伴网