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B41河北省地方标准DB13/T795—2006仔猪黄白痢病的防治技术规程2006-11-11发布2006-11-20实施DB13河北省质量技术监督局发布食品伙伴网—2006I前言本标准由河北省畜牧兽医局提出。本标准起草单位：河北裕丰实业公司、河北省动物检疫站。本标准主要起草人：王健诚、侯玉漂、孔令聪、马志华、崔红英、李海龙、锡建中、陈建华、陈东来、李海涛、范炜、丁红田、王玉然、王瑞红。食品伙伴网—20061仔猪黄白痢病的防治技术规程1范围本标准规定了仔猪黄白痢病的诊断、预防和治疗技术。本标准适用于养猪场（户）、动物诊疗单位。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB16548畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程GB/T17824.1中、小型集约化养猪场建设GB/T17824.3中、小型集约化养猪场设备GB/T17824.4中、小型集约化养猪场环境参数及环境管理NY5027无公害食品畜禽饮用水水质NY5030无公害食品畜禽饲养兽药使用准则NY5031无公害食品生猪饲养兽医防疫准则NY5032无公害食品畜禽饲料和饲料添加剂使用准则NY/T5033无公害食品生猪饲养管理准则3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1仔猪黄痢是由致病性大肠杆菌感染引起的多见于1日龄到7日龄仔猪的一种急性、传染性肠炎。3.2仔猪白痢由致病性大肠杆菌感染所引起的多见于7日龄到30日龄仔猪的肠炎。4诊断4.1流行特点4.1.1仔猪黄痢4.1.1.1本病可常年发生。4.1.1.2易感性与日龄关系密切，3日龄内发病率可达到90％，7日龄以后的猪很少发病。4.1.1.3规模化饲养较分散饲养多发；初产母猪的仔猪较经产母猪的仔猪易发。4.1.1.4多有既往病史,在猪场内一次流行后，一般经久不断。4.1.2仔猪白痢4.1.2.1本病可常年发生，但冬、春两季气温剧变，阴雨连绵或保暖不良、饲养管理失调及母猪乳汁缺乏时多发。4.1.2.2发病仔猪的日龄比较集中，7d～30d仔猪发病最多，并且病情较重。4.1.2.3发病仔猪胎次区别不明显，但是新场或新引进种猪的猪场多发。4.1.2.4同窝仔猪中存在已发病猪临床痊愈后，其他猪可再发病，时发时愈，此愈彼发。4.1.2.5发病率高，但病死率比较低；可自行康复，对仔猪的生长发育影响较大。4.2临床症状4.2.1仔猪黄痢a)突然下痢，随后严重，次数频繁；食品伙伴网—20062b)排出黄色至灰黄色水样粪便，内混有小气泡并带有腥臭味；c)肛门松弛，不断流出稀粪，粘污后躯及尾部；d)口渴，精神沉郁，停止吮乳；e)脱水，双眼塌陷；f)阴户、肛门周围、腹股沟等处皮肤发绀，可休克死亡。4.2.2仔猪白痢a)突然下痢，白色、灰白以至黄色糊状或浆状有特殊腥臭味的粪便；b)拱背、行动缓慢，皮毛粗糙无光；c)畏寒、呼吸次数增加；d)脱水。4.3病理变化4.3.1仔猪黄痢a)皮肤干燥，皱缩，可视黏膜苍白、干燥；猪体严重脱水；b)肠道黏膜的急性卡他性炎症明显，表现为肠黏膜肿胀、充血、出血；其中以十二指肠最严重，空肠和回肠次之，结肠较轻；c)肠管充气；d)肠系膜淋巴结充血、肿大、多汁；e)实质器官点状出血；f)胃膨胀，充满酸臭的白、黄以至混有暗红血液的凝固乳块；g)胃底腺区黏膜红色以至暗红或褐红色，可见出血斑点，出血区可形成溃疡灶。4.3.2仔猪白痢a)体表苍白、消瘦、脱水；b)肠黏膜有卡他性炎症变化；c)结肠内容物为浆糊状或油膏状，色乳白或灰白，粘腻，部分粘附于黏膜上，不易完全擦掉。4.4病原学诊断4.4.1病料的采集4.4.1.1病料采集应选择症状典型的病猪或死亡时间短的猪。4.4.1.2用无菌棉试子采集直肠内容物，或无菌采集小肠前段内容物、肠系膜淋巴结。4.4.2病原学检验程序病原学检验程序按照图1所示进行。待检病料鉴别培养：麦康凯、伊红美蓝平板可疑菌落纯培养动物接种试验发病动物直接涂片革兰氏染色镜检报告生化鉴别：MR、VP、靛基质、西蒙氏柠檬酸盐血清学试验报告菌落特征图1仔猪黄白痢病原学检验程序4.4.3致病菌的分离培养4.4.3.1病料处理食品伙伴网—20063将病料混悬于装有1ml灭菌生理盐水的试管中，若为水样粪便可不加生理盐水，待用。4.4.3.2直接接种法取待检液体在麦康凯或伊红美蓝琼脂平板培养基上，做分离画线后37oC培养18h～24h选取麦康凯琼脂培养基上的红色菌落，伊红美蓝琼脂培养基上的黑色带金属光泽的菌落，接种于营养琼脂斜面或三糖铁琼脂斜面高层37oC培养18h～24h，营养琼脂培养基上形成灰白色半透明或不透明的菌苔；三糖铁琼脂培养基为斜面与高层均呈黄色并有气体产生，某些大肠杆菌菌株不产气，不发酵或迟发酵乳糖，在三糖铁琼脂培养基上表现为斜面黄色高层红色。4.4.3.3增菌培养法将经过治疗的个体、含菌量低的样本，可于普通营养肉汤中增菌后接种麦康凯或伊红美蓝琼脂培养基，画线后37oC分离培养，其余同4.4.3.2。4.4.4病原体形态4.4.4.1菌落形态大肠杆菌在营养琼脂平板上形成的菌落边缘整齐、表面光滑、湿润、低而微隆、中等大小、无色半透明、露珠杨菌落；在麦康凯琼脂培养基上菌落呈粉红色；在伊红美蓝琼脂平板上菌落呈紫红色、隆起、表面湿润、带有蓝绿色的金属光泽。4.4.4.2细菌形态经革兰氏染色，大肠杆菌为革兰氏阴性、无芽孢的短小杆菌，多单在或成双而不形成长链，多数有鞭毛，能运动。4.4.5生化鉴别生化鉴别见表1。如果出现表1以外的生化反应类型，表明培养物可能不纯，应重新划线分离，必要时做重复试验。表1大肠杆菌鉴别结果靛基质MRVP西蒙氏柠檬酸盐鉴定结果（型别）＋＋--典型大肠埃希氏杆菌-＋--沸点性大肠埃希氏杆菌＋＋-＋典型柠檬酸盐杆菌-＋-＋非典型柠檬酸杆菌---＋典型产气肠杆菌＋--＋非典型产气肠杆菌4.4.6血清学检验4.4.6.1O抗原的鉴定4.4.6.1.1O凝集抗原制备将生化反应确认的大肠杆菌菌落接种于琼脂斜面37℃培养18h，刮取菌苔并混悬于适量的0.5％氯化钠溶液中制成浓厚的菌液，100℃加热10min～15min，冷却后供玻板凝集试验用。如要使K抗原的O不凝集性彻底消除，须将上述制备的O抗原121OC加热处理15min～30min后使用。4.4.6.1.2玻板凝集试验雷同分别取多价血清各1滴于洁净的玻板上，然后取供试菌株的O凝集抗原悬液与多价血清分别混均，室温下1min～3min内观察并判定结果，一般阳性凝集结果是在混均后即刻出现。其凝集结果按“++++、+++、++、+、-”标记，并以“++”以上判为阳性。++++：100％菌体被凝集，凝集速度快，出现粗大凝集颗粒，液体透明。+++：75％菌体被凝集，凝集速度快，出现较大凝集颗粒，液体透明。++：50％菌体被凝集，凝集速度较快，出现明显的凝集颗粒，液体稍透明。+：25％菌体被凝集，凝集速度慢，仅见少而细小的凝集颗粒，液体混浊。-：菌体不被凝集，仍均匀混浊。当与多价血清凝集试验确定组别后，再分别与该组内各O抗原单价血清按上述方法试验并判断，最后确定其O群。4.4.6.2K抗原的鉴定4.4.6.2.1K凝集抗原的制备将生化试验确认的大肠杆菌接种于琼脂斜面，37℃培养12h～24h，用少量生理盐水洗下菌苔并制备成浓厚的菌悬液即可。4.4.6.2.2玻板凝集试验食品伙伴网—20064同4.4.6.1.2。应用时要设立同份经加热处理的抗原作对照组。4.4.7动物接种试验4.4.7.1动物的选择可用仔猪或小白鼠、豚鼠。试验动物需是SPF动物或经提前饲养观察确认临床健康的，而且从未接种过相应疫苗和未发生过特定传染病，以及32日未用过抗生素类药物的动物。4.4.7.2接种剂量采用固定培养条件和时间的大肠杆菌悬液(如营养肉汤37℃培养18h)；有时需要进行细菌计数，来决定接种菌数。4.4.7.3接种途径和剂量仔猪采用消化道（口服或灌胃）接种0.5ml；小白鼠腹腔接种0.2ml；豚鼠眼结膜囊接种0.1ml。4.4.7.4结果判定接种动物后，每天定时观察并记录临床反应、发病及死亡情况，并对死亡动物及时剖检和进行细菌回收检验。必要时做试验动物病料的分离鉴定。5预防与治疗5.1猪场的选址与工艺布局5.1.1猪场的建设须符合GB/T17824.1的要求。5.1.2养猪场的环境参数及环境管理须符合GB/T17824.4的要求。5.1.3养猪场的设备型式和参数须符合GB/T17824.3的要求，并在哺乳仔猪栏内设置仔猪保温箱。5.2饲养管理5.2.1场区兽医防疫工作严格按NY5031执行。5.2.2生产及饮用水、生猪饲养饲料、生猪饲养管理应按照NY5027、NY5032、NY5033执行。5.2.3猪舍的内外环境定期消毒，消毒程序和消毒药物的使用按NY5030执行。5.2.4严禁从疫区引进猪只。5.2.5减少饥饿，惊吓等应激因素。5.3分娩管理5.3.1分娩房投入使用前应进行彻底消毒，并空置72h以上。5.3.2分娩时舍内的温度要恒定，保温箱温度恒定在30℃～34℃，环境温度变化须符合GB/T17824.4的要求。5.3.3分娩母猪要提前一周进入分娩舍，在分娩舍门口用消毒药物将母猪体表进行清洗、消毒；母猪腹部特别是乳头、乳房、外阴部用消毒药物进行擦洗、消毒。5.3.4母猪产仔前应将母猪的乳头、乳房和腹部擦净、消毒，把每个乳头的奶挤掉一点，再次消毒。5.3.5待产母猪分娩前2d减少饲喂量，出现分娩症状后停止饲喂。分娩后第一天，给予不多于2kg的湿拌饲料（冬季用温水），以后逐渐增加，至第7d～8d达标准饲喂量。带仔猪多的母猪分娩12d后应达到自由采食水平。5.3.6仔猪产出后，迅速逐一擦净、保温箱内晾干，断脐并严格消毒。5.3.7保证仔猪出生后1h～2h内吃到初乳。5.3.82～3日龄补铁、补硒。5.3.9产仔结束，将胎衣、污物清除，再清扫圈舍并消毒。5.4补料与管理5.4.1哺乳仔猪应供给适口性强、容易消化的饲料，蛋白质来源以动物性蛋白为主。5.4.2仔猪应及时补料、补水，仔猪的断奶、补料、调料、补水要逐步进行；断奶后的仔猪须在原圈舍饲养一周以上；转入保育舍后饲料维持1周～2周不变；断奶后一周内不改变管理人员、管理制度、管理习惯、周围环境，断奶后两周内不合并圈、不调群。5.4.3断奶后让仔猪自由采食。5.5治疗5.5.1对确诊为仔猪黄白痢的猪，立即隔离、消毒；5.5.2出现一头病仔猪，全窝用药。5.5.3严格按NY5030的规定使用兽药。5.5.4对分离到的致病菌，及时进行治疗药物敏感性试验，选择敏感药物2～3种。食品伙伴网—200655.5.5对发病猪进行药物治疗，推荐使用以下方法：a)对下痢较经的仔猪，可用0.1％的亚硒酸钠、0.05％的痢菌净和0.1％的高锰酸钾溶液各三分之一，混合饮用，连用1d～2d；b)恩诺沙星、环丙沙星，1次20mg/kg体重肌注或口服，加注复合维生素注射液1ml/头,每天2次，连用2d～3d；c)对有发热体征的，庆增安注射液每次O.2ml/kg体重，每天2次，肌肉注射或口服；d)腐殖酸钠250g、硫酸链霉素5g、亚硒酸钠2g，混匀，每头仔猪每次内服0.3g～0.5g，每天1～2次；e)硫酸多粘菌素B，1次50000U／kg体重，肌注，每天2次，连用2d～3d；f)庆大霉素或丁胺卡那霉素，肌注，1次0.5ml/kg体重，每天2次，连用2d～3d；g)维