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ICS65.020.01B05DB13河北省地方标准DB13/T1402—2011白梨花粉Pollenofpyrusbretschncideri2011-05-10发布2011-05-20实施河北省质量技术监督局发布DB13/T1402—20111前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河北农业大学提出。本标准起草单位：河北农业大学。本标准主要起草人：乔进春，许建辉，朱梅玲，朱玲欣，许建锋，张江红，张殿生，王君。DB13/T1402—20112白梨花粉1范围本标准规定了白梨花粉的适采品种、制取方法、贮存、包装、运输、复原、检验及等级划分。本标准适用于白梨花粉的制取和应用。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1白梨pyrusbretschncideri中国原产，主要分布在华北。蔷薇科梨属植物。乔木。花序有花6～10朵；花白色，雄蕊20，花药浅紫红色；果实卵形或近球形，果皮黄绿色，皮孔细密，萼片脱落。果倒卵形至长圆形，果皮黄色，子房4～5室。2.2大蕾期单花的花瓣膨大露出花萼至花瓣绽开前。2.3初花期树上5%～10%的花开放。2.4花药长在花丝顶端的囊状体。2.5花粉花药里的粉粒。2.6粗花粉花药开裂散出花粉现成的花药壳与花粉的混合物。2.7精花粉将粗花粉中花药壳等杂质后获得的纯净花粉。2.8花粉发芽率花粉在适宜的条件下培育一定的时间，长出花粉管（亦称花粉发芽）的花粉粒数占培育花粉粒数的比值，以百分率表示。用于指示该批花粉的生活力。DB13/T1402—201133适采品种本种品种较多，栽培较为广泛的有鸭梨、雪花梨、酥梨、茌梨、蜜梨、秋白梨等品种均适宜采集。河北省适宜采集花粉的品种是本地区广泛栽培的鸭梨和雪花梨。4花朵采集4.1采集时期花朵大蕾期开始采集，直至初花期，采集大蕾期至当天上午开放的花朵。4.2花朵采集花朵采集时，间隔20cm左右留一花序，每花序留基部2朵花，采下的花朵收集起来，放入干净容器。收集的花朵应及时脱出花药，如来不及脱出，临时存放在阴凉处，不得过厚堆压或暴晒，并每间隔1小时翻动一次。5花药脱出与精选5.1脱出花药将收集到的花朵用电动碎花机打碎，使花药与花萼、花瓣分离。同时联动孔距5mm的粗筛，分离出花柄、花托、花瓣等，收集脱出花药。5.2筛分精选将脱出的雄蕊、花药放入孔距2.2mm圆筒筛中分离杂质。将筛出的花药经过孔距1.25mm的细筛，筛出花丝，剩余基本纯净的花药。6粗花粉制取6.1除湿将精选出的纯净花药均匀摊放在干燥室内的凉架牛皮纸上，厚度不超过1cm，间隔1小时用小耙子翻动一次，共翻动3～4次。6.2干燥花药经除湿可转入干燥室处理，保持干燥室内温度24～26℃，排风扇不间断排风，间隔1～1.5小时用小耙子耙划一次，经36～48小时干燥，花药完全爆开散粉。7精花粉的制取粗花粉内包含花药壳和极少量的其他杂质，为了方便贮存和长途运输，将杂质分离，获取精花粉。将粗花粉平摊在牛皮纸上，上覆80目细筛，用吸尘器在筛上面来回滑动，把筛网下面的花粉吸净，收集吸尘器内的花粉，即得到精花粉。DB13/T1402—201148花粉的贮存、包装、运输与复原8.1粗花粉的贮存、包装和运输装8.1.1贮存粗花粉制取后置于通气性好的纸质容器内，暂存放于阴凉、通风、干燥的室内，可存放7～10天。过久存放会降低花粉的生活力。8.1.2包装和运输运输前，用纸袋包装，每袋装500g，订书机单钉封口，放入塑膜自封袋，再加入50g变色硅胶（干燥剂），封口，装入纸箱。粗花粉可进行常温运输，7天内送达。8.2精花粉的包装、贮存、运输和复原8.2.1包装精花粉包装前再用吸尘器再吸滤一次，用纸袋包装，每包100g，订书机单钉封口，每5包装入一个塑膜自封袋内，加入250g变色硅胶（干燥剂），封口。8.2.2贮存放入冰柜或冰箱冷冻室贮藏，冷藏温度-21℃～-27℃，可存放至翌年授粉用。8.2.3运输必须在低温下进行，在外包装内加入干冰块，用泡沫箱或小型保温箱运输。8.2.4复原将冷藏的精花粉从冷藏环境中取出，打开密封口，取出干燥剂，将纸质包装置于阴凉通风的常温室内放置24，即可恢复正常生活力。9花粉检验与等级划分9.1形态检验以主要白梨品种花粉为标样，在100×10倍显微镜下观察，如检验样品的形态、大小、色泽与标样一致，可判定为白梨花粉。9.2花粉发芽率检测9.2.1材料与仪器琼脂1g，蔗糖11g，蒸馏水100ml；显微镜，培养皿，载玻片，500ml烧杯，50ml三角瓶，100ml量杯，玻璃棒，小药勺，加热炉，恒温箱，吸水纸，棉球棒，电子天平，牙签。9.2.2花粉吸湿处理DB13/T1402—20115将充分吸水的吸水纸3～4层放于烧杯底部，取待测花粉少许放入50ml三角瓶（开口），然后放进烧杯中，用纸板盖上烧杯，使花粉吸湿24～36小时。9.2.3培养基的制备将称好的1g琼脂和100ml蒸馏水倒入烧杯杯中，放到加热炉上边搅动边加热至沸腾成透明状液体，停止加热，倒入11g蔗糖，继续搅拌，至蔗糖完全溶解。9.2.4载玻片的制备培养皿底部铺上两层吸水纸，吸足水，放上两根小木棍（或干净牙签）。用玻璃棒蘸取培养基液适量，涂布到载玻片上，以2mm厚为宜，放置在培养皿的小木棍上，盖好盖子备用。9.2.5花粉播撒用棉棒沾取待检花粉适量，在涂好培养基的载玻片上方，用手指轻轻弹动，使花粉颗粒均匀地散布到培养基表面，盖上培养皿盖。9.2.6恒温培养将播好花粉的培养皿放入27℃的恒温箱中培养3小时。9.2.7镜鉴取出载玻片放在100倍的显微镜下观察花粉的发芽情况，在每个培养基的中心区域选3个点观察，分别记录每个观察点的发芽花粉数和花粉总数。9.2.8发芽率的计算花粉发芽率=发芽的花粉粒数/（发芽的花粉粒数+没发芽的花粉粒数）×100%。9.3等级划分按照花粉发芽率的高低划分白梨花粉等级。见表1。表1花粉等级等级发芽率（%）一级≥80二级65～79.9三级50～64.9合格30～49.9不合格＜30花粉发芽率低于30%，判定为不合格花粉，不得用于授粉。