叫受控j321F中华人民共和国国家计量技术规范JJF1402-2013生物显微镜校准规范CalibrationSpecificationforBiologicalMicroscopes2013-04-27发布2013-07-27实施国家质量监督检验检痊总局发布JJF1402-2013生物显微镜校准规范BiologicalMicroscopes飞-O·G-O·G-。-dd3吨。uι叫到吁…�…GOOR4白1·GWUGJOJF·O-G·O-o-o-hCalibrationSpecificationfor归口单位:全国几何量工程参量计量技术委员会主要起草单位:工业和信息化部电子五所赛宝计量检测中心贵州省计量测试院江苏省计量科学研究院河南省医疗器械检验所参加起草单位:安阳市质量技术监督检验测试中心本规范委托全国几何量工程参量计量技术委员会负责解释JJF1402-2013本规范主要起草人:常青(工业和信息化部电子五所赛宝计量检测中心)吕小洁(贵州省计量测试院)王晓飞(江苏省计量科学研究院)梁额方(河南省医疗器械检验所)参加起草人:李拥军(安阳市质量技术监督检验测试中心)王冬梅(河南省医疗器械检验所)JJF1402-2013目录引言………………………………………………………………………………………CID1范围……………………………………………………………………………………(1)2引用文件………………………………………………………………………………(门3概述……………………………………………………………………………………(门4计量特性………………………………………………………………………………(2)4.1显微镜物镜放大倍数误差…………………………………………………………(2)4.2双目显微镜左右两系统放大倍数差………………………………………………(2)4.3双目显微镜左右视场中心偏差……………………………………………………(幻4.4示值误差……………………………………………………………………………(幻5校准条件………………………………………………………………………………(幻5.1环境条件……………………………………………………………………………(川5.2校准用标准器及相应设备………………………........………………………….(2)6校准项目和校准方法…………………………………………………………………(幻6.1校准项目……………………………………………………………………………(幻6.2校准方法……………………………………………………………………………(3)7校准结果表达…………………………………………………………………………(4)8复校时间间隔…………………………………………………………………………(5)附录A示值误差测量结果不确定度评定……………………………………………(们附录B显微镜物镜放大倍数误差测量结果不确定度评定…………………………(们附录C校准证书内容及内页格式……………………………………………………(10)IJJF1402-2013引JJF1402-2013((生物显微镜校准规范))(以下简称本规范)是针对生物显微镜校准制定的计量技术规范。本规范的编写以JJF1071-2010((国家计量校准规范编写规则》、JJF1001-2011((通用计量术语及定义》和JJF1059.1-2012测量不确定度评定与表示》为基础和依据。本规范主要参务提准是GB/T2985-2008((生物显微镜》。本规范为首次发布。EJJF1402-2013生物显微镜校准规范1范围本规范适用于生物显微镜的校准。2~I用文件本规范引用下列文件:GB/T2985-2008生物显微镜凡是注日期的引用文件,仅注目期的版本适用于本规范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。3概述生物显微镜(以下简称显微镜)是一种观察和测量生物切片、生物细胞、细菌的结构尺寸,以及用于活体组织培养、流质沉淀量、粉末及细小颗粒的粒度等参数的测量仪器。其主要由目镜、物镜、载物台和反光镜(或者内置光源和聚光镜)等组成,有的显微镜具有照明部分(聚光镜),替代了反光镜的作用。使用时,将被测物体放在显微镜载物台上,通过调焦手轮调整载物台的位置,使物体在显微镜目镜分划板上成清晰的像,以便于观察和测量。显微镜按结构分为单目显微镜和双目显微镜,按用途分为普及显微镜、实验室和研究用显微镜。具体结构见图1、图20图1单目显微镜结构图图2双目显微镜结构图1目镜2←目镜筒3一物镜转盘和物镜4一载物台一目镜2二日镜筒3一物镜转盘和物镜4载物台;5一照明光源或反光镜6调焦手轮5→照明光源或反光镜6→载物台移动钮7一调焦手轮1JJF1402-20134计量特性4.1显微镜物镜放大倍数误差显微镜物镜放大倍数误差的最大允许误差一般不超过土5%。4.2双目显微镜左右两系统放大倍数差双目显微镜左右两系统放大倍数差一般不超过2%。1I显微镜物镜放大口1口1方位左右方向内侧0.44.4示值误差5校准条件5.2校准用校准用标序号0.01mm,MPE:士2μm;2双目显微镜左右两系统放|倍率计z分度值0.1mm,MPE:士10μm;大倍数差|标准玻璃线纹尺z分度值0.1mm和0.01mm,MPE:土2μm3双目显微镜左右视场中心110X十字分划目镜,十字线分划板偏差4I示值误差标准玻璃线纹尺:分度值0.1mm和0.01mm,MPE:士2μm法方准校和目目项项准准校校在UPOJJF1402-2013校准项目见表2。校准前,对仪器的外观、各部分相互作用及光学系统进行检查,各移动、转动部位应灵活,元过松过紧及滞涩急跳现象,视场内应照明均匀、成像清晰,无影响测量的霉斑、阴影、色差、场曲等因素。带有摄影、摄像功能的显微镜,其显示屏视场内应洁净、亮度均匀,无影响观察的阴影、斑点、反射光斑等因素;用目镜观察与用显示屏观察的图像应同步、方位基本一致。6.2校准方法6.2.1显微镜物镜放大倍数误差6.2.1.1对于目镜可拆卸的显微镜物镜放大倍数,使用10X十字分划目镜和标准玻璃线纹尺进行测量。首先将显微镜目镜视度调节至O位置,标准玻璃线纹尺置于被测显微镜的载物台上,调节物镜的像面距离,使标准玻璃线纹尺在目镜分划尺上成清晰像,取下显微镜的目镜,装上10X十字分划目镜,在该目镜分划尺上读得标准玻璃线纹尺所用间距像的示值,依据公式。)计算物镜放大倍数。卢物=号(1)式中:Y一一一标准玻璃线纹尺所用间距,mm;y'一一目镜分划尺上读得标准玻璃线纹尺所用间距像的实际值mm。物镜放大倍数误差以实测放大倍数与名义放大倍数之差的相对误差确定,具体计算见公式(2)。A卢=肖功;-P标准X100%=丛X100%=Li二主X100%(2)目标准L0~--,ULo式中:A卢→一物镜放大倍数误差;F物一二物镜放大倍数实测值;卢标准一一物镜放大倍数标准值;b.L~--目镜分划尺刻线与标准玻璃线纹尺像的相应刻线不重合的偏差值,mm;Li-一一标准玻璃线纹尺所用间距的像在目镜分划尺的实际长度,mm;Lo-~标准玻璃线纹尺所用间距的像在目镜分划尺的标称长度,mm。6.2.1.2对于目镜不可拆卸的显微镜的物镜放大倍数,使用倍率计和标准玻璃线纹尺进行测量。将倍率计置于目镜上,显微镜目镜视度调节至O位置,调节物镜的像面距离,使标准玻璃线纹尺在倍率计分划尺上成清晰像,读得分划尺刻线与标准玻璃线纹尺像的相应刻线的示值,参考公式。)计算总放大倍数,然后按照公式(3)计算物镜放大倍数。再按照公式(2)计算物镜放大倍数误差。单一臼ρυ--nHMa一一物βua(3)式中:卢总一-显微镜总放大倍数实测值;3JJF1402-2013卢目一一目镜放大倍数实测值。6.2.1.3也可用显微镜自带刻度分划尺的目镜直接在仪器上测量物镜放大倍数误差。显微镜物镜放大倍数误差以显微镜各倍数物镜放大倍数误差作为校准结果。6.2.2双目显微镜左右两系统放大倍数差在不拆卸显微镜目镜的情况下,按照6.2.1.2的步骤,对左右两个观察系统的放大倍数分别进行测量,依据公式(1)计算得到两观察系统放大倍数,其差值的绝对值即为校准结果。6.2.3双目显微镜左右视场中心偏差将十字分划板置于被测生物显微镜的载物台上,左筒内装十字分划目镜,并对十字分划板调焦,使十字分划板像中心的十字与十字分划目镜镜筒内的十字中心重合,然后将十字分划目镜从左筒放人右筒,在右筒观察十字分划板的十字线像中心在目镜分划板上的位置(见图3),读出其与分划板中心(上,下,左右外侧,左右内侧)偏离值即为校准结果。左侧目镜右侧目镜左右外侧允许区域图3视场中心偏差区域6.2.4示值误差根据物镜的不同放大倍数,在工作台上放置分度值为0.1mm或0.01mm的标准玻璃线纹尺,调焦至目镜视场清晰,移动工作台,调整标准玻璃线纹尺的刻线方向与目镜标尺刻线平行,将目镜中标尺的左端零刻线对准标准玻璃线纹尺零刻线,观察目镜中标尺上被测点的刻线与标准玻璃线纹尺的对应刻线的一致性,在目镜标尺上估读出误差值ßL,按照公式(4)计算显微镜的示值误差。ßL=L;-Ls(4)式中zßL-.测量点的示值误差,mm;L;测量点的标称长度,mm;Ls一一对应测量点的标准线纹尺长度,mm。显微镜的示值误差测量需在目镜标尺全长范围内均匀分布的5点进行,取最大误差值作为校准结果。注:对于目镜带有刻度标尺的生物显微镜,在物镜放大倍数误差和示值误差校准中,可任选一项技准。7校准结果表达经校准的生物显微镜出具校准证书。校准证书内容见附录C。4JJF1402-20138复校时间间隔由于复校时间间隔的长短是由仪器的使用情况、使用者、仪器本身质量等诸因素所决定的,因此送校单位可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔,建议为1年。5JJF1402-2013附录A示值误差测量结果不确定度评定A.1测量方法根据物镜的不同放大倍数,在载物台上放置分度值为0.1mm或0.01mm的标准玻璃线纹尺,调焦至目镜视场清晰,移动工作台,使目镜中标尺的左端零刻线对准标准玻璃线纹尺零刻线,观察目镜中标尺上被测点的刻线与标准玻璃线纹尺的对应刻线的一致性,在目镜标尺上估读出误差值t:J.L即为显微镜的示值误差。A.2测量模型t:J.L=L;-Ls式中:t:J.L-测量点的示值误差,mm;L;测量点的标称长度,mm;Ls对应测量点的标准线纹尺长度mmoA.3方差和灵敏系数考虑各分量彼此独立得=u~=u2(t:J.L)二d.u2(L;)+d.u2(Ls)3t:J.L式(A.2)中Cl=-,,-;-=1;3LA.4计算分量的标准不确定度3t:J.L咱C2=3ζ二-.1A.4.1目镜标尺刻线测量时的标准不确定度分量以L;)(A.1)(A.2)该项不确定度分量包含测量时对零瞄准的影响及相应被测刻线测量时的估读误差两项。对零瞄准时采用单线瞄准,其瞄准精度α=60,其影响最大的是使用5X物镜时,对于10X的目镜,其整体放大倍率为K=50,其瞄准误差为8_250α250X6o俨=再Z一2X105X50μm=l.:该项瞄准误差主要以均匀分布的方式影响,所以其标准不确定度为'Ul(Li)=~-主互卫旦=0.87μm'-'-.j3.j3相应刻线间隔点测量时,采用观察标准刻线与被测刻线的符合程度确定示值误差,当存在不符合情况时,需要读出被测刻线与标准刻线的间隔量作为示值误差,读数时采用估读的方式,其估读误差为自镜标尺分度的1/10,即1μm,均匀分布,其标准不确定度为6U2(L;)二生二1f1-旦=0.58μmJ3.j3u(L;)二';u~(L;)十u~(L;)=';0.872+O.582μm=1.05μmJJF1402-2013A.4.2标准玻璃线纹尺引人的标准不确定度分量以Ls)所用标准玻璃线纹尺刻线的MPE为土2μm,其标准不确定度为:u(L,)=IMPEI主丘旦=1.μ13J言'由于测量长度在2mm以内,因此温度影响带来的不确定度在此影响很小,故忽略不计。A.5合成标准不确定度1)2X1.152μm=1.56μ