NYT 2024-2011 农作物优异种质资源评价规范 柿

ICS65.020.20B05中华人民共和国农业行业标准NY／T2024—2011农作物优异种质资源评价规范柿Evaluatingstandardsforeliteandrarecropgermplasmresources—Persimmon(DiospyrosL.)2011-09-01发布2011-12-01实施中华人民共和国农业部发布NY／T2024—2011前言本标准按照GB／T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。本标准由全国果品标准化技术委员会(SAC／TC510)归口。本标准起草单位：中国农业科学院茶叶研究所、西北农林科技大学。本标准主要起草人：杨勇、江用文、李高潮、阮小凤、熊兴平、王建平。ⅠNY／T2024—2011农作物优异种质资源评价规范柿1范围本标准规定了柿属(DiospyrosL．)优异种质资源评价的术语定义、技术要求、鉴定方法和判定。本标准适用于柿属(DiospyrosL．)优异种质资源评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB／T20453柿子产品质量等级NY／T1309农作物种质资源鉴定技术规程柿3术语和定义GB／T20453和NY／T1309中界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1优良种质资源elitegermplasmresources主要经济性状表现好且具有重要价值的种质资源。3.2特异种质资源raregermplasmresources性状表现特殊的、稀有的种质资源。3.3优异种质资源eliteandraregermplasmresources优良种质资源和特异种质资源的总称。4技术要求4.1样本采集按NY／T1309的规定执行。4.2鉴定数据每个性状至少应在同一地点进行3年的重复鉴定。性状观测值取其3年平均值进行判定。4.3指标4.3.1优良种质资源指标优良种质资源指标见表1。表1优良种质资源指标序号性状指标1果实颜色橙，橙黄，橙红，朱红，颜色均一2果实纵沟无或极浅3软柿质地黏、稍黏或水4果实风味浓甜或甜1NY／T2024—2011表1（续）序号性状指标5可溶性固形物含量脱涩后口J浴性崮彤仞笛量≥l7加6果肉中褐斑无或少7种子数量≤2粒8耐贮性硬果期≥16d9丰产性中或高10炭疽病抗性中抗、抗或高抗11耐寒性中或强4.3.2特异种质资源指标特异种质资源指标见表2。表2特异种质资源指标序号性状指标1新叶颜色金黄微红（牛头柿）2花瓣颜色橙黑色，肉红色（黑柿）3果实形状果形指数≥1.6或≤0.6（西炉2号或七月鲜）4单果重平均单果重≥350g，或≤6.0g（斤柿或老鸦柿）5果实颜色黑色（黑柿）6心皮数量＞4，多余心皮外散生（疣柿）7萼片数量＞4（蜜蜜罐）8性型柿种内纯雄株（华中雄株8号）9花序类型边花有完全花；雌花型完全花（台湾正柿）10甜柿类型显性遗传甜柿（罗田甜柿）11染色体倍性除君迁子、浙江柿外的非六倍体（金枣柿）12果实发育期≤115d或≥154d（七月早或元宵柿）13可溶性固形物含量30.0%（澄江牛心柿）14可溶性单宁含量≥2.0%(浙江野柿)注：括号内提供的信息是为了方便本标准的使用，不代表对该品种的认可和推荐。任何可以得到与该品种相同结果的品种（系）均可作为对照样品。5鉴定方法5.1新叶颜色展叶至现蕾期以资源单株为观察对象，在正常光照条件下，采用目测法观察树体中部正常生长枝条抽生新叶的颜色。根据观测结果，并与标准色卡上相应代码的颜色进行比较，按照最大相似原则，确定种质新叶的颜色。5.2花瓣颜色按NY／T1309的规定执行。5.3果实形状按NY／T1309的规定执行。5.4单果重按NY／T1309的规定执行。5.5果实颜色按NY／T1309的规定执行。5.6心皮2NY／T2024—2011果实成熟期在2株相同资源树上随即抽取20个果实，观察果实心皮分离状况，相同状况的果实数量达到80%以上。根据观察结果及下列说明，确定心皮类型。a)4心皮合生（外观发育正常，横切面正常8心室）；b)多心皮内包（外观发育正常，横切后多于8心室并有内生小果）；c)多心皮外散生（外观特异，柿蒂周围有数量不等的多余心皮发育成的肉瘤）。5.7果实纵沟按NY／T1309的规定执行。5.8萼片数量果实成熟期以资源单株为观测对象，采集10个正常发育的果实，用目测法观察萼片的数量。以相同萼片数量的果实达到80%以上为准。a)4枚；b)大于4枚。5.9性型在盛花期以资源单株为观测对象，目测法观测花类型。根据观察结果及下列说明，确定种质的性型。a)仅有雌花；b)雌雄同株；c)杂性同株；d)纯雄株。5.10甜柿类型在果实成熟期根据果实特征、树体长势及单宁细胞特征观察所有甜柿资源，根据观察结果及下列说明，确定甜柿类型。a)显性遗传甜柿（中国原产完全甜柿）；b)隐性遗传甜柿（日本原产完全甜柿）。5.11花序类型在盛花期，以资源单株为观察对象，目测法观察花序中花的类型。以下列标准确定花序类型：a)3朵全雄花（3朵花中只有雄蕊，无子房）；b)雌花型完全花（中间花形似雌花，具子房及雄蕊，两侧花为雄花，只有雄蕊）；c)雄花型完全花（中间花形似雄花，具子房和雄蕊，两侧花为雄花，只有雄蕊）；d)边花有完全花（中间花及两侧边花之一均具有子房及雄蕊）。5.12染色体倍性参见附录A。5.13果实发育期按NY／T1309的规定执行。5.14可溶性固形物含量脱涩硬柿或甜柿取果实中部果肉，用压榨器压出汁液；软柿取果实中部汁液，将汁液滴于手持糖量计，记录读数。结果以%表示，精确到0.1%。5.15单宁含量按NY／T1309的规定执行。5.16软柿质地按NY／T1309的规定执行。5.17果实风昧3NY／T2024—2011按NY／T1309的规定执行。5.8果肉中褐斑果实成熟期以单株树为观测对象,随机采取20个果实，用不锈钢刀横剖果实，用目测法观测横断面上褐斑数量。根据观测结果按下列标准确定种质果肉中褐斑。a)无（无黑斑出现）；b)少（只能见到零星分布，一个切面中褐斑数不足10个）；c)中（褐斑粒粒可数，数量超过10个或小而均匀）；d)多（果实横断面的中心和外围均有密集分布）。5.19种子数量按NY／T1309的规定执行。5.20耐贮性按NY／T1309的规定执行。5.21丰产性在不进行人工疏花疏果的情况下，果实成熟期采用单株果数估产，也可结合采收实际测产。以连续2年～3年鉴定结果的平均产量计算其丰产性。根据测产结果按以下指标确定种质的丰产性。a)低(≤15t／hm2)；b)中（产量在16.5t／hm2～30t／hm2之间）；c)高（产量≥31.5t／hm2）。5.22炭疽病抗性参见附录B。5.23耐寒性参见附录C。6判定6.1优良种质资源判定优良种质资源除符合表1中1项～6项之外，同时还应符合7项～11项中任意1项或多项指标。6.2特异种质资源判定特异种质资源应符合表2中任意1项以上（含1项）指标。4NY／T2024—2011附录A（资料性附录）柿染色体倍数鉴定A．1鉴定材料柿茎尖。A．2试剂A．2.1饱和对二氯苯溶液。A．2.20.075mol／LKCl。A．2.3甲醇：冰醋酸固定液：按体积3︰1配制而成，现用现配。A．2.45mol／LHCl。A．2.54%纤维素酶：2g纤维素酶溶于50mL蒸馏水中。A．2.61%果胶酶：0.5g果胶酶溶于50mL蒸馏水中。A．2.7丙酸—水合氯醛—苏木精染色液。A．3仪器设备A．3.1显微镜。A．3.2照相机。A．3.3可调移液器10µL～200µL。A．3.4电子天平，精密度为0.001g。A．3.5恒温培养箱。A．4操作步骤3月底采成年树刚开始萌动的腋芽或顶芽约3mm置于饱和对二氯苯溶液中预前处理3h～4h。于甲醇：冰醋酸=3:1的固定液中固定10h～24h，转入70%乙醇保存。用5mol／LHCI在室温下解离20min。蒸馏水冲洗后，4%纤维素酶＋1%果胶酶＋0.075mol／LKC1混合液在37℃下解离150min。蒸馏水洗涤30min，丙酸—水合氯醛—苏木精染色液染色3h后压片镜检。每个种质计数50个细胞以上确定该种质染色体数目，BH-2Olympus显微镜观察和照像记录。A．5结果记录根据染色体数目按下列方式确定种质的染色体倍性。a)2n=2X=30;b)2n=4X=60;c)2n=6X=90;d)2n=9X=135。5NY／T2024—2011附录B（资料性附录）柿种质资源炭疽病（Collectotrichumgloeosporioides）抗性鉴定B．1鉴定时期正常年份或发病重的年份，分别采用田间接种方法或田间调查方法进行鉴定。B．2调查方法在秋季生长期选取有代表性的植株2株，每株树按东西南北中5个方位，每个方位选取10枝当年抽生的新梢。B．3测定与计算采用目测法观察每个新枝的发病情况。根据病斑的总直径占枝条长度的的比率，按表B．1确定其炭疽病的抗性。表B．1柿种质资源炭疽病病情分级标准级别描述0枝条上无病斑；10%＜病斑总直径占枝条总长度的比率≤趵%220%＜病斑总直径占枝条总长度的比率≤40%340%＜病斑总直径占枝条总长度的比率≤60%460%＜病斑总直径占枝条总长度的比率≤80%580%＜病斑总直径占枝条总长度的比率≤100%B．3.1病情指数根据结果计算病情指数，病情指数以DI表示，按式(B．1)计算：………………………………………(B．1)()/5100iiDISnN=××∑式中：si——发病级别；ni——相应发病级别的枝数，单位为枝；i——病情分级的各个级别；N——调查总枝数，单位为枝；5——最高病级。计算结果表示到小数点后1位。B．3.2抗性级别抗性级别见表B．2。表B．2柿种质资源抗炭疽病鉴定病情级别划分抗性级别病情指数(DI)抗性*10＜DI≤5.0高抗Highresistant(HR)35.0＜DI≤10.0抗病Resistant(R)6NY／T2024—2011表B．2（续）抗性级别病情指数(DD抗性*510.0＜DI≤30.0中抗Mediumresistant(MR)730.0＜DI≤50.0感病Susceptible(S)950＜DI≤100.0高感Highsusceptible(HS)*根据重复抗性鉴定结果对材料进行抗病性评价，抗性以记载的最高病情级别为准。7NY／T2024—2011附录C（资料性附录）柿种质资源耐寒性鉴定C．1试材生长正常的柿树上的休眠枝条。C．2仪器低温冰箱、最低最高温度计、双筒立体解剖镜、载玻片、解剖针、镊子、标签和记号笔。C．3采样处理休眠期,在南向1.5m～3m处，用修枝剪剪取结果母枝若干，保证总芽数至少30个，用记号笔在标签上标明资源，不同资源分别捆扎，带回实验室。将不同资源枝条置于低温冰箱-18℃条件下处理12h，取出枝条使回升至室温。用镊子和解剖针剥剖枝条上20个以上的芽，在立体解剖镜下观察芽的冻害（变褐）程度。C．4结果计算根据在解剖镜下观察的芽受冻的情况，分为3个级别，见表C．1。表C．1柿种质资源冻害程度分级级别描述鲜活处理后生长锥仍保持鲜绿半活处理后生长锥微呈黄褐色或墨绿色死亡处理后生长锥严重变褐C．4.1受冻率根据以上标准计算受冻率，受冻率以FI表示，按式(C．1)计算。12212100nnFIN+=×…………………………………………(c．1)式中：FI——受冻率，单位为百分率(%)；n1——死亡芽数；n2——半活芽数；N2——观察总芽数。计算结果表示到小数点后1位。C．4.2抗性级别依据受冻率，按照表C．2标准确定抗性级别。8NY／T2024—2011表C．2柿种质资源耐寒性级别划分标准抗性级别受冻率(FD抗性1FI≤30%强331%＜FI≤70%中5FI≥71%弱9