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B41河北省地方标准DB13/T811—2006羊传染性胸膜肺炎防治技术规程2006-11-11发布2006-11-20实施DB13河北省质量技术监督局发布食品伙伴网—2006I前言本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E为规范性附录。本标准由河北省畜牧兽医局提出。本标准起草单位：河北农业大学。本标准主要起草人：汪恩强、袁万哲、钟秀会、孙继国、史万玉、黄会岭、金东航、郝满良、李铁拴、徐丰勋、刘小宝。食品伙伴网—20061羊传染性胸膜肺炎防治技术规程1范围本标准规定了羊传染性胸膜肺炎的诊断、预防和治疗。本标准适用于养羊场（户）和动物疾病防治单位对羊传染性胸膜肺炎的诊断和防治。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的昀新版本。凡是不注明日期的引用文件，其昀新版本适用于本标准。GB16548畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程GB16549畜禽产地检疫规范GB16567种畜禽调运检疫技术规范NY/T388畜禽场环境质量标准NY5027无公害食品畜禽饮用水水质NY5149无公害食品肉羊饲养兽医防疫准则NY/T5151无公害食品肉羊饲养管理准则3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。羊传染性胸膜肺炎Infectiouspleuropneumoniaofsheepandgoats又称羊支原体肺炎，是由支原体所引起的一种高度接触性传染病。4诊断4.1病原引起羊传染性胸膜肺炎的病原体为丝状支原体山羊亚种(Mycoplasmamycoidessubsp.capri)和绵羊肺炎支原体(Mycoplasmaovipneumoniae)。丝状支原体山羊亚种为细小、多变性的微生物，革兰氏染色阴性，用姬姆萨法、瑞氏法染色着色良好；绵羊肺炎支原体也呈细小而多形性，但在适宜培养基上生长的菌落很小，生长要求比丝状支原体山羊亚种苛刻。在琼脂浓度较低的培养基上生长时，可呈现一般支原体都具有的“降落伞”状菌落，但琼脂浓度较高时则无此表现。绵羊肺炎支原体与丝状支原体山羊亚种无交互免疫性。丝状支原体山羊亚种对理化因素的抵抗力很弱。4.2流行病学4.2.1易感动物不同品种、年龄、性别均会感染。在自然条件下，丝状支原体山羊亚种只感染山羊，3岁以下的山羊昀易感染，而绵羊肺炎支原体则可感染山羊和绵羊。4.2.2流行特点本病一年四季都可发生和流行，但在早春、秋末冬初昀常见。常呈地方流行性，冬季流行期平均为15d，夏季可维持60d以上。4.2.3传播途径本病接触传染性很强，发病后在羊群中传播迅速，20d左右可波及全群。病羊是主要的传染源，肺组织和胸腔渗出液中含有大量病原体，主要通过空气——飞沫经呼吸道传染。4.2.4发病率和病死率易感羊群发病率可达80％～100％，病死率达40％以上，体质弱者高达90％。4.3临床症状4.3.1潜伏期潜伏期短者5ｄ～6d，长者21d～28d。食品伙伴网—200624.3.2最急性型昀急性型可见如下临床症状：a)发病急骤，体温高达41℃～42℃，精神极度萎顿，食欲废绝，呼吸急促而有痛苦呻吟；b)数小时后出现肺炎症状，呼吸困难，咳嗽，流浆液带血鼻液，肺部叩诊呈浊音，听诊肺泡呼吸音减弱、消失或呈捻发音；c)病羊卧地不起，四肢伸直，呼吸极度困难，随着呼吸全身颤动；d)黏膜高度充血，发绀；e)病程一般不超过4d～5d，有的仅12h～24h，有的在没有任何征兆情况下突然倒地死亡；f)病死羊鼻孔中流出带血泡沫或血水，耳、颈下、腹部皮肤大片紫绀。4.3.3急性型急性型可见如下临床症状：a)患羊体温升高，精神沉郁，采食量逐渐减少；b)继之出现咳嗽，伴有浆液性鼻液，4d～5d后，咳嗽变干而痛苦，鼻液转为黏液—---脓性并呈铁锈色，黏附于鼻孔和上唇，结成干涸的棕色痂垢；c)眼睑肿胀，流泪，眼有黏液－--脓性分泌物；d)口半开张，流泡沫状唾液；e)头颈伸直，腰背拱起，腹肋紧缩，怀孕母羊大批发生流产；f)有的发生臌胀和腹泻；g)唇、乳房等部皮肤出现丘疹；h)濒死前体温降至常温以下。4.3.4慢性型患羊全身症状轻微，体温变化不明显，间歇性咳嗽和腹泻，鼻腔内流出黏液性鼻液，采食量减少，生长发育迟缓，身体衰弱，被毛粗乱无光,部分患羊有轻度瘤胃臌气、慢性眼结膜炎等症状。病程长者，可持续数月之久。4.4病理变化剖检可见如下病理变化：a)肺呈紫红色，切面呈大理石样，充血水肿，并有针尖状出血点；b)胸腔常有淡黄色液体，有时多至500ml～2000ml。胸膜变厚而粗糙，胸膜和肺表面有网状或条状的黄白色纤维素凝块；c)心包积液、黏连，心肌松弛、变软；d)急性病例还可见肝、肾、脾、胆囊肿胀。4.5病原学诊断4.5.1病料采集与保存无菌采集肺脏、胸腔渗出液、肺门淋巴结、心血等。肺病料剪成3cm～5cm方块，胸部淋巴结以整个淋巴结为好，胸腔渗出液用吸管吸入灭菌青霉素瓶内。肺和淋巴结保存在用茶色广口瓶盛装的灭菌50％甘油缓冲溶液中，胸腔渗出液不加任何保存液。病料冰冻保存。4.5.2显微镜检查将病料直接涂片，瑞氏或姬姆萨氏染色，由镜下按视野观察，羊传染性胸膜肺炎病原为细小的多形性菌体，呈球状、杆状、丝状等。革兰氏染色阴性。4.5.3病原分离培养取精氨酸支原体肉汤培养基4.1g，加100ml蒸馏水，加热溶解，分装，每支试管8ml，121℃高压灭菌15min，4℃保存，用前加入20％小牛血清及抑菌剂。取支原体半流体培养基3.9g，加100ml蒸馏水，加热溶解，分装，每支试管8ml，121℃高压灭菌15min。使用前应煮沸10min～15min，冷至56℃左右，每支试管内加入2ml灭活小牛血清，摇匀。分别取精氨酸支原体肉汤培养基和支原体半流体培养基各4支，每支培养基接种胸腔渗出液或病料乳化液0.5ml～1.0ml，于36±1℃培养21d。设生理盐水＋培养基作对照。在接种后的第七天，从4支中取2支进行次代培养，分别接种2支精氨酸支原体肉汤培养基和支原体半流体培养基，于36±1℃培养21d。若在支原体半流体培养基内见到“降落伞”样白色菌落；精氨酸支原体肉汤培养基由黄色变为粉红色，管底有颗粒沉淀，表明有羊传染性胸膜肺炎支原体。取精氨酸支原体肉汤培养物或支原体半流体培养基上的典型菌落涂片，瑞氏、姬姆萨和革兰氏染色镜检，结果同4.5.2。食品伙伴网—200634.5.4动物回归试验取精氨酸支原体肉汤培养物和生理盐水作1:1稀释，分别注射到健康羊、家兔气管内，羊多在1d～7d发病，表现与自然病例相同的症状和病理变化，而人工感染兔不发病。4.6血清学检测4.6.1微量间接血凝试验按附录B规定的方法执行。4.6.2生长抑制试验按附录C规定的方法执行。4.6.3代谢抑制试验按附录D规定的方法执行。4.6.4直接免疫荧光抗体试验按附录E规定的方法执行。5预防5.1加强羊群饲养加强饲养管理，增强羊群的抵抗力。饲料要求按照NY5150的规定执行；饮水要求按照NY5027的规定执行；饲养管理按照NY/T5151的规定执行；环境控制应符合NY/T388的规定。5.2严格羊群检疫建立基础母羊群，自繁自养。品种调整或补充种源，应按照GB16549和GB16567的规定，加强检疫。5.3隔离、封锁和消毒发现疫情及时上报，对发病羊群按NY5149的规定进行隔离、封锁，并做好消毒工作。消毒剂的使用应符合NY5148的规定。对病死、剖检羊尸体应按GB16548的规定，进行无害化处理。5.4免疫接种根据病原体分离结果选用适当的疫苗，按NY5149的规定进行免疫接种。5.4.1平时预防接种对健康羊群每年春季或秋季预防接种一次。山羊传染性胸膜肺炎氢氧化铝灭活疫苗，预防由丝状支原体山羊亚种引起的山羊传染性胸膜肺炎，6月龄以下山羊颈侧皮下注射3ml，6月龄以上山羊5ml，注射后14d产生免疫力，免疫期为1年。羊肺炎支原体氢氧化铝灭活疫苗，预防绵羊、山羊由绵羊肺炎支原体引起的传染性胸膜肺炎，成年羊颈侧皮下注射3ml，半岁以下幼羊2ml，免疫期可达1年半以上。对身体瘦弱、体温升高或有慢性疾病的羊，不宜注射。对怀孕母羊、新生羔羊和从异地引进的羊应及时补注射。5.4.2紧急免疫接种一旦发病，立即对未出现症状、体温低于40℃的假定健康羊全部注射山羊传染性胸膜肺炎氢氧化铝菌苗或羊肺炎支原体氢氧化铝灭活疫苗，疫区内或疫区周围的羊也应进行疫苗注射。待发病羊和可疑羊病情稳定后，再紧急注射疫苗。6治疗6.1抗菌消炎可采用下列药物进行治疗：a)大环内脂类:乳糖酸红霉素注射剂3mg/kg～5mg/kg体重，静脉注射，每天2次，连用2d～3d。泰乐菌素注射液5mg/kg～13mg/kg体重，肌肉注射，每日2次，连用5d～7d。b)广谱抗菌药类:长效土霉素注射液10mg/kg～20mg/kg体重，肌肉注射，每天1次，连用5d。土霉素片剂10mg/kg～25mg/kg体重，内服，每日1次，连用2d～3d。c)喹诺酮类:恩诺沙星注射液2.5mg/kg体重，肌肉或静脉注射，每天2次，连用5d～7d。d)氟苯尼考：20mg/kg体重，肌肉注射，每天1次。e)新砷矾纳明(914)：12mg/kg体重，以无菌生理盐水或葡萄糖生理盐水稀释为5％溶液（现配现用），一次缓慢静脉注射，3d～5d后对逐渐康复羊再注射一次，剂量减半。注意防治砷中毒。f)卡那霉素、丁胺卡那霉素、林可霉素、先锋霉素、磺胺制剂，用法及用量应符合《中华人民共和国兽药典》的规定。g)支原体易产生耐药性，治疗时要注意药物交替使用和较长时间用药。6.2制止渗出5％～10％氯化钙或葡萄糖酸钙注射液50ml～100ml、维生素C2g～4g，静脉注射。食品伙伴网—200646.3止咳平喘氯化铵片1g～5g、氨茶碱片0.2g～0.4g或复方甘草合剂10ml～20ml，内服。6.4对症治疗a)减轻炎症反应和缓解中毒，可静脉或肌肉注射地塞米松，每次4mg～12mg。b)增强心脏活动，可静脉注射10％安钠咖0.5g～2g或樟脑磺酸钠0.2g～1g，每天2次，连用2d。c)呼吸困难者，肌肉注射盐酸麻黄碱注射液0.02g～0.05g。d)体温升高者肌肉注射安乃近注射液1g～2g。6.5建立并保存治疗记录，并应在清群后继续保存2年。食品伙伴网—20065附录A（规范性附录）培养基A.1改良Hartley氏消化汤培养基（液体培养基）胰蛋白胨8g，灭菌Hartley氏消化汤600ml，灭菌0.5％水解乳蛋白Hank’s液1000ml，0.4％酚红20ml，混匀，加青霉素至200IU/ml，用3.5％NaHCO3调节pH至7.6，用单板式滤器过滤除菌后，加入无菌灭能的猪血清400ml，分装于10ml玻璃瓶中，放入37℃普通温箱做杂菌检验，待无菌生长便可使用。A.2改良Hartley氏琼脂培养基（固体培养基）改良Hartley氏消化汤培养基中加入琼脂，使其含量达1.3％～1.5％，经121kPa高压灭菌30min即成。A.3增菌培养基马丁肉汤加20％马血清和3g/100ml酵母浸膏。A.4选择性培养基系增菌培养基内加80:1的1％醋酸铊和青霉素200IU/ml；制作平板时加1％国产琼脂。食品伙伴网—20066附录B(规范性附录)微量间接血凝试验B.1方法提要微量间接血凝试验可用于羊传染性胸膜肺炎的诊断和监测。其原理是利用结合在红细胞上的羊传染性胸膜肺炎抗原在与血清中的抗体反应后，出现肉眼可见的凝集现象，据此便可判断被检者血清中是否含有