65.020.20B39四川省地方标准DB51DB51/T1027—2010出口姬菇菌种cultureofPleurotuscornucopiae(jigu)forexport2010-2-10发布2010-3-1实施四川省质量技术监督局发布DB51/T1027—2010I目次前言.................................................................................II1范围................................................................................12规范性引用文件......................................................................13术语和定义..........................................................................14要求................................................................................25抽样................................................................................46试验方法............................................................................47检验规则............................................................................58标签、标志、包装、运输、贮存........................................................5附录A..............................................................................7附录B..............................................................................7DB51/T1027—2010II前言本标准附录A、附录B为规范性附录。本标准由四川省农业厅提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准。本标准由四川省农业科学院食用菌开发研究中心负责起草。本标准主要起草人:唐利民、姜邻、张思林、鲜灵。DB51/T1027—20101出口姬菇菌种1范围本标准规定了姬菇菌种的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、判定规则及标签、标志、包装、运输和贮存。本标准适用于姬菇母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T191包装储运图示标志GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB/T12728食用菌术语NY/T528食用菌菌种生产技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1母种经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物,也称一级种。[GB/T12728术语和定义2.5.7]3.2原种由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物,也称二级种。[GB/T12728术语和定义2.5.8]3.3栽培种由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物,也称三级种。栽培种只能用于栽培,不可再次扩大繁殖菌种。[GB/T12728术语和定义2.5.9]3.4拮抗现象具有不同遗传基因的菌落间产生不生长区带或形成不同形式线形边缘的现象。[GB/T12728术语和定义2.3.21]3.5角变因菌丝体局部变异或感染病毒而导致菌丝变细、生长缓慢、菌丝体表面特征成角状异常的现象。[GB/T12728术语和定义2.5.17]DB51/T1027—201023.6锁状联合为双核菌丝体进行细胞分裂时产生的一种锁状桥接的菌丝结构,常发生在菌丝顶端,开始时在细胞上产生突起,并向下弯曲,与下部细胞连接,形如锁状。3.7生物学效率子实体质量(鲜重)与培养料质量(风干重)之间的比率。3.8种性姬菇的品种特性,是鉴别姬菇菌种或品种优劣的重要标准之一。一般包括对温度、湿度、酸碱度、光线和氧气的要求,抗逆性、丰产性、稳定性、出菇迟早、出菇潮数、栽培周期、质地及栽培习性等农艺性状。4要求4.1菌种分级姬菇菌种按繁育程序分为母种(一级种)、原种(二级种)、栽培种(三级种)三级。4.2菌种生物学要求各级菌种生物学要求应符合表1规定。表1菌种生物学要求项目要求菌丝生长状态粗壮、丰满、均匀锁状联合有杂菌无害虫无4.3母种4.3.1容器及规格应符合NY/T528规定。4.3.2感官要求应符合表2规定。表2母种感官要求项目要求容器洁净、完整、无破损棉塞或硅胶塞干燥、洁净、松紧适度,能满足透气和滤菌要求培养基斜面长度顶端距棉塞(40~50)㎜接种量(接种块大小)(3~5)㎜×(3~5)㎜菌丝生长量占斜面2/3以上至长满斜面菌丝体表面特征洁白、浓密、均匀、边缘整齐、无角变菌丝分泌物无斜面背面外观培养基不干缩,颜色均匀、无暗斑、无色素杂菌菌落无菌种外观拮抗现象无子实体原基无或少量气味有姬菇菌种特有的香味,无酸、臭、霉等异味4.3.3菌丝生长速度DB51/T1027—20103在PDA培养基上,在25℃±2℃的温度条件下培养,菌丝长满斜面的时间为6d~8d。4.3.4母种栽培性状姬菇母种需经出菇试验确证其农艺性状和商品性状等种性合格,其中商品性状符合出口要求后,方可用于扩大繁殖或出售。4.4原种4.4.1容器及规格应符合NY/T528规定。4.4.2感官要求应符合表3规定。表3原种感官要求项目要求容器洁净、完整、无破损棉塞或无棉塑料盖干燥、洁净、松紧适度、能满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶(袋)口的距离(30~50)mm接种量(每支母种接原种数,接种块大小)(3~5)瓶(袋),≥12㎜×12㎜菌丝生长量占容器2/3以上至长满容器菌丝体特征洁白均匀、致密,无角变,无菌皮培养基及菌丝体紧贴瓶(袋)壁,无明显干缩培养物表面分泌物无或少量杂菌菌落无虫(螨)体无拮抗现象无菌种外观子实体原基无或少量气味有姬菇菌种特有的香味,无酸、臭、霉等异味4.4.3菌丝生长速度在适宜培养基上,在25℃±2℃的温度条件下培养,菌丝长满容器的时间为25d~30d。4.5栽培种表4栽培种感官要求项目要求容器洁净、完整、无破损棉塞或无棉塑料盖干燥、洁净、松紧适度、能满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶(袋)口的距离(30~50)mm接种量(每瓶原种接栽培种数)(30~50)瓶(袋),接入菌种封住瓶(袋)口菌丝生长量占容器2/3以上至长满容器菌丝体特征洁白均匀、致密,无角变,无菌皮培养基及菌丝体紧贴瓶(袋)壁,无明显干缩培养物表面分泌物无或少量杂菌菌落无虫(螨)体无拮抗现象无菌种外观子实体原基无或少量气味有姬菇菌种特有的香味,无酸、臭、霉等异味4.5.1容器及规格DB51/T1027—20104应符合NY/T528规定。4.5.2感官要求应符合表4规定。4.5.3菌丝生长速度在适宜培养基上,在25℃±2℃的温度条件下培养,菌丝长满容器的时间为30d以内。5抽样5.1母种按品种、接种时间分批编号,原种、栽培种按菌种来源、制种方法和接种时间分批编号。按批随机抽取被检样品。5.2母种、原种、栽培种的抽样量分别为该批菌种量的10%、5%、1%。但每批抽样数量不得少于10支(瓶、袋);抽样量超过100支(瓶、袋)的,可进行两级抽样。6试验方法6.1感官要求感官要求试验方法按表5逐项进行。表5感官要求试验方法检验项目检验方法检验项目检验方法容器肉眼观察母种、原种肉眼观察棉塞、无棉塑料盖、硅胶塞肉眼观察接种量栽培种检查生产记录母种斜面长度肉眼观察菌种外观各项(杂菌菌落除外)肉眼观察母种斜面背面外观肉眼观察杂菌菌落肉眼观察,必要时用5倍放大镜观察培养基上表面距离瓶(袋)口的距离肉眼观察气味鼻嗅6.2菌种生物学要求6.2.1菌丝生长状态、锁状联合和害虫检验用放大倍数不低于10×40的光学显微镜对培养物的水封片进行观察,每一检样应观察不少于50个视野。6.2.2细菌检验将检验样本按无菌操作接种于GB/T4789.28中4.7规定的营养琼脂培养基或PDA培养基中,25℃~28℃培养2d~3d,培养基上出现细菌菌落者为有细菌污染。6.2.3霉菌检验将检验样本按无菌操作接种于PDA培养基中,25℃~28℃培养5d~7d,培养基上出现霉菌菌落者为受霉菌污染,必要时进行水封片镜检。6.3菌丝生长速度6.3.1母种附录A中配方任选其一,在25℃±3℃的温度条件下培养,计算菌丝长满斜面的天数。6.3.2原种和栽培种附录B中配方任选其一,在25℃±3℃的温度条件下培养,计算菌丝长满容器的天数。6.4母种栽培性状将被检母种制成原种。在附录B中任选一个配方,制作菌袋45袋。接种后平均分三组进行常规管理,根据表6所列项目,做好栽培记录,统计检验结果。同时将该母种的出发菌株设为对照,亦做同样处理。对比二者的检验结果,以时间计的检验项目中,被检母种的任何一项时间较对照菌株推迟5d以DB51/T1027—20105上(含5d)者,为不合格;产量显著低于对照菌株者,为不合格;菇形外观形态与对照明显不同或畸形者,为不合格。表6母种栽培性状检验记录检验项目检验结果检验项目检验结果母种长满所需时间,d总产,kg原种长满所需时间,d平均单产,kg栽培种长满所需时间,d生物学效率,%菌袋长满所需时间,d菇形、色泽出第一潮菇所需时间,d菇盖直径,㎝第一潮菇产量,kg菌柄长度,㎝6.5留样各级菌种要留样备查,留样的数量应每个批号母种3支~5支,原种和栽培种5瓶(袋)~7瓶(袋),于4℃~6℃下贮存,贮存至使用者在正常生产条件下该批菌种出第一潮菇。7判定规则判定规则按要求指标进行。检验项目全部符合要求指标时,为合格菌种,其中任何一项不符合要求,均为不合格菌种。8标签、标志、包装、运输、贮存8.1标签8.1.1产品标签每支(瓶、袋)菌种要贴有清晰注明以下要素的标签:a)产品名称(如姬菇母种);b)品种名称(如姬菇×号);c)生产单位(如××菌种厂);d)接种日期(如××年×月×日);e)执行标准。8.1.2包装标签每箱菌种要贴有清晰注明以下要素的包装标签:a)产品名称、品种名称;b)厂名、厂址、联系电话;c)出厂日期;d)贮存条件、保质期;e)数量;f)执行标准;g)菌种生产经营许可证编号。8.2储运图示标志按GB/T191规定注明以下图示标志:a)小心轻放标志;b)防水、防潮、防冻标志;c)防晒、防高温标志;d)防止倒置标志;e)防止重压标志。8.3包装8.3.1母种外包装采用木盒或有足够强度的纸箱,内部用棉花、碎纸、报纸等具有缓冲作用的轻质材DB51/T1027—20106料填满。8.3.2原种、栽培种外包装采用有足够强度的纸材制作的纸箱,并留有通气孔。菌种间用碎纸、报纸等具有缓冲作用的轻质材料填满。箱内附产品合格证和使用说明(包括菌种种性、培养基配方及适用范围)。纸箱上部和底部用胶带封口,并用打包带捆扎。8.4运输8.4.1不得与有毒、有害、有污染、有异味的物品混装、混运,不得挤压。8.4.2在低于30℃条件下运输。8.4.3运输过程中应有防震、防晒、防雨淋、防冻、防杂菌污染的措施。8.5贮存8.5.1按计划生产各级菌种,菌丝长满试管(瓶、袋)后尽快使用,尽量减少贮存时间。8.5.2母种在4℃~6℃条