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中华人民共和国专业标准色度测定法SB/T10323-1999Measurementofcolorintensity━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━本方法适用于酿造酱油半成品、副产品的色度测定。1仪器a.圆底烧瓶:500mL;b.容量瓶:100mL、500mL;c.移液管:5mL;d.刻度吸管:2mL、5mL、10mL;e.比色管:100mL;f.油浴锅;g.分析天平:感量0.1mg。2试剂分析纯蔗糖、分析纯氨水、分析纯苯酚、分析纯碘、分析纯碘化钾。3标准曲线的绘制精确称取碘1.0000g,称取碘化钾2g,先将碘化钾盛于烧杯内,加入少量蒸馏水溶解,再倾入精确称取的碘中,用玻璃棒轻轻搅拌、使碘全部溶解后移入100mL容量瓶内,以蒸馏水稀释至刻度,摇匀,即成1%碘液。再按下表进一步稀释成100mL各种色度的标准色液(每个稀释液都须加4g碘化钾)。4mL1%碘液稀释液的色度定义为1.1。8、12、16mL1%碘液稀释液的色度分别为2.1、3.0、4.0。将表中不同毫升1%碘液的稀释液进行光电比色计比色(581-G型光电比色计用50**#滤色片;72型分光光度计用波长为520nm)。根据色度(即碘液的不同毫升数)与消光度的关系,以色度为纵坐标,消光度为横坐坐标绘制成标准曲线。色度与1%碘液对照表(20℃)───────┬─────┬───────┬───────色度│1%碘液│加入碘化钾,g│稀释至mL数───────┼─────┼───────┼───────1.1│4│4│1002.1│8│4│1003.0│12│4│1004.0│16│4│100───────┴─────┴───────┴───────4标准色的配制称取蔗糖100g,置于圆底烧瓶内。放在200℃油浴中,10min左右待糖溶化后,逐步滴入氨水(1∶1)8mL。等几分钟后,再滴入氨水(1∶1)4mL,氨水滴入后注意泡沫上升(如溢入油浴中会发生危险)。总共反应30min后即成焦糖色。冷却后移入500mL容量瓶内。用热蒸馏水冲洗容器,洗液也并入容量瓶中。冷至20℃后加蒸馏水稀释至500mL,摇匀。为了防止变质,须加苯酚2mL。吸取2mL或3mL上述的焦糖色,置于100mL容量瓶内,再以蒸馏水稀释至刻度。用滤纸过滤。弃去初滤液20mL左右。收集以后的滤液在光电比色计中进行校正:看2mL或3mL焦糖色稀释后滤液(即色度为2.1或3.0)的消光度(OD值)与上述标准曲线(即8mL或12mL1%碘液稀释液的OD值)是否符合。如有深浅,用添加水或加未稀释的焦糖色进行调整,直至该焦糖色稀释液的消光度(OD值)与标准曲线相符为止。此即标准色(吸取CmL的标准液稀释至100mL,与此稀释液色度相同者,其色度即为C)。焦糖色也可用市售的成品,稀释8～10倍即成标准色(校正同上)。5操作方法吸取经离心的样品5mL,置入100mL比色管中,以蒸馏水稀释至100mL。在另一比色管中加入蒸馏水95mL,由滴定管滴入标准色,随滴随搅拌,至色度与样品比色管色度基本相仿时,再加水至刻度,再滴入标准色1～2滴,至二管色度相同后为止。读取滴定管中标准色的耗用毫升数。即为酱油的色度(如3.1mL即3.1°)。6注意事项目测比色时,由于标准色澄清、杂质少、色泽与酱油样品稍有差异,应观察红色相仿后作为终点。酱醅测定用10%稀释液,吸取5mL入比色管。其余同上。附录A原料、在制品、副产品检测项目(参考件)A.1粮食原料(豆粕、小麦、夫皮等)A.1.1水分A.1.2粗蛋白A.1.3粗淀粉A.2食盐A.2.1水分A.2.2氯化物A.3三角瓶菌种(二级菌种)A.3.1水分A.3.2孢子数A.3.3菌落总数A.4种曲(三级菌种)A.4.1水分A.4.2孢子数A.4.3发芽率A.4.4蛋白酶活力A.4.5菌落总数A.5熟料A.5.1水分A.5.2熟料消化率A.5.3N型蛋白A.6成曲A.6.1水分A.6.2蛋白酶活力A.6.3菌落总数A.6.4氨基氮A.7拌曲盐水A.7.1氯化物A.7.2比重A.8酱醅及酱醪A.8.1水分A.8.2水溶性全氮A.8.3氯化物A.8.4总酸(或pH)A.8.5氨基氮A.8.6色度A.8.7水溶性无盐固形物A.8.8还原糖A.9半成品酱油(包括二油、三油)A.9.1全氮A.9.2总酸A.9.3氨基氮A.9.4氯化物A.9.5无盐固形物A.9.6还原糖A.9.7比重A.9.8pHA.9.9色度A.9.10氨基氮A.10酱渣A.10.1水分A.10.2氯化物A.10.3水溶性无盐固形物A.10.4全氮━━━━━━━━━━━附加说明:本标准由商业部副食品局提出。本标准由上海酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━中华人民共和国商业部1987-11-20批准1988-07-01实施