10×TEBuffer1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1MTris-HCl配制量1L配制方法1.称量121.1gTris置于lL烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。pH值浓HCl7.4约70ml7.6约60ml8.0约42ml4.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。1.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度1.5MTris-HCl配制量1L配制方法1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.用浓HCl调节pH值至8.8。4.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后,室温保存注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。0.5MEDTA组份浓度0.5MEDTA(pH8.0)配制量1L配制方法1.称取186.1gNa2EDTA•2H2O,置于1L烧杯中。2.加入约800mL的去离水充分搅拌。3.用NaOH调节pH值值8.0(约20gNaOH)。注意:pH值至8.0时,EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后,高温高压灭菌。6.室温保存。10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度100mMTris-HCl(PH7.5),10mMEDTA配制量1L配制方法1.量取下列溶液,置于lL烧杯中。1MTris-HClBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100ml500mMEDTA(pH8.0)20ml2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。3.将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。4.室温保存。10×TE组份浓度100mMTris-HCl(PH7.5),10mMEDTA配制体积100ml配制方法Tris1.21g;EDTANa2•2H2O0.37g;ddH2O80ml;盐酸调pH7.5;ddH2O定容10×LiAc100mlLiAc•2H2O10.20g;ddH2O50ml,冰醋酸调pH7.5;ddH2O定容50%PEG100mlPEG335050.0g;ddH2O定容1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液YPDA液体培养基:1LPeptone20g葡萄糖20gYeastextract10gAdeninehemisulfate15mloffilter-sterilized0.2%Adeninehemisulfate108℃15min室温贮存固体:加入2%琼脂。108℃15min铺板4℃贮存SD液体培养基:1LYNB6.7g葡萄糖20g10×DO100ml108℃15min,室温贮存SD固体:加入2%琼脂108℃15min铺板4℃贮存(若要加入3-AT须在培养基自然冷却至约55℃加入所需量的3-AT贮存溶液或粉末,摇匀后铺板)质粒混合物:0.1ug待转化质粒+100ug鲑鱼精DNA1×TE/LiAc/ddH2O:1:1:850%PEG/LiAcTE:8:1:1