1.1.常用临床生化项目的分类1.1.1.按化学性质分类大概分为四类:酶类、底物代谢类、无机离子类、特种蛋白类。1.1.1.1.酶类包括ALT(谷丙转氨酶),AST(谷草转氨酶),ALP(碱性磷酸酶),ACP(酸性磷酸酶),r-GT(谷氨酰转移酶),α-HBDH(α羟丁酸脱氢酶),LDH(乳酸脱氢酶),CK(肌酸激酶),CK-MB(肌酸激酶同功酶),α-AMY(淀粉酶),ChE(胆碱脂酶)等。1.1.1.2.底物代谢类包括TG(甘油三脂),TC(总胆固醇),HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇),LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇),UA(尿酸),UREA(尿素氮),Cr(肌酐),Glu(葡萄糖),TP(总蛋白),Alb(白蛋白),T-Bil(总胆红素),D-Bil(直接胆红素),TBA(总胆汁酸),CO2(二氧化碳)等。1.1.1.3.无机离子类包括Ca(钙),P(磷),Mg(镁),Cl(氯),Fe(铁)等。1.1.1.4.特种蛋白类apoA1(载脂蛋白A1),apoB(载脂蛋白B),Lp(a)(脂蛋白a);补体C3,补体C4;免疫球蛋白IgA、IgG、IgM等。1.1.2.按临床性质分类无机离子:包括Ca,P,Mg,Cl等;肝功能:包括ALT,AST,r-GT,ALP,MSO,T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等;肾功能:UA,UREA,Cr等;心肌酶谱:CK,CK-MB,LDH,α-HBDH,AST,MSO等;糖尿病:GLU等;前列腺疾病:ACP,p-ACP等;胰腺炎:α-AMY;血脂:TC,TG,HDL-C,LDL-C,apoA1,apoB,Lp(a);痛风:UA;中毒:ChE;免疫性疾病:C3,C4,IgG,IgA,IgM;急性炎症反应:CRP(C反应蛋白),AAG(a1酸性糖蛋白),CER(铜蓝蛋白),ASO(抗链球菌溶血素O)。项目测定原理临床意义ALT谷丙转氨酶L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+HLDHL-乳酸+NAD+H2ONADH的减少,引起340nm吸光度的下降,下降速率与ALT活性成正比(动力学法)。ALT主要存在于肝细胞中,心肌细胞次之,活性升高表示有肝细胞损伤,也可见于心肌及骨骼肌损伤。AST谷草转氨酶L-门冬氨酸+α-酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+HMDHL-苹果酸+NAD++H2ONADH的减少,引起340nm吸光度的下降,下降速率与AST活性成正比(动力学法)。AST主要存在于心肌细胞中,肝细胞次之,活性升高表示有心肌损伤,也可见于肝细胞及骨骼肌损伤。ALP碱性磷酸酶磷酸对硝基苯+H20ALP磷酸盐+对硝基苯酚对硝基苯酚的生成,引起405nm吸光度的上升,上升速率与ALP活性成正比(动力学法)。ALP主要存在于骨、肝、肾和肠,活性升高见于肝胆及骨骼疾病等。r-GT谷氨酰转移酶L-r-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯氨+双苷肽r-GTr-谷氨酰双苷肽+5-氨基-2-硝基苯甲酸盐5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的生成,引起405nm吸光度的上升,上升速率与r-GT活性成正比(动力学法)。活性升高与肝胆疾病、心肌梗塞、脑损伤、慢性酒精中毒、苯妥英钠治疗有关。α-HBDHα羟丁酸脱氢酶α-酮丁酸+NADH+Hα-HBDHα-羟丁酸+NADNADH的减少,引起340nm吸光度的下降,下降速率与α-HBDH活性成正比(动力学法)。活性升高与急性心肌梗塞有关。LDH乳酸脱氢酶L-乳酸+NADLDH丙酮酸+NADH+HNADH的生成,引起340nm吸光度的上升,上升速率与LDH活性成正比(动力学法)。活性升高与心肌梗塞有关,也可见于肝脏疾病、未治愈的恶性贫血、巨幼红细胞贫血、肾脏疾病、恶性肿瘤等。CK肌酸激酶磷酸肌酸+ADPCK肌酸+ATP葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸+ADP葡萄糖-6-磷酸+NADPG6PDH6-磷酸-葡萄糖酸+NADPH+HNADPH的生成,引起340nm吸光度的上升,上升速率与CK活性成正比(动力学法)。活性升高与心肌梗塞有关,也可见于肌营养不良、甲状腺机能减退、肺梗塞、急性脑血管疾病等。CK-MB肌酸激酶同功酶先用CK-M的抗体抑制CK-M的活性,其余同CK的测定活性升高主要见于心肌梗塞。α-AMY淀粉酶1.用生色基团对-硝基酚修饰α-麦芽七糖苷(PNP-G7)作为底物,经α-淀粉酶水解成小分子的寡糖苷,再经辅助酶α-葡萄糖苷酶进一步水解释放出生色基团PNP,导致405nm吸光度增加,增加速率与α-AMY活性成正比,ROCHE公司等采用此法。2.用生色基团对-硝基酚修饰麦芽五糖苷(PNP-G5)作为底物,其余同1。日本第一化学采用此法,IFCC推荐。3.采用2-氯-4-硝基苯酚-α-麦芽三糖(CNP-G3)做底物,不需要用辅助酶,直接由淀粉水解产生CNP,导致405nm吸光度增加,增加速率与α-AMY活性成正比,科华采用此法。活性升高见于急性胰腺炎、胰腺管道阻塞、流行性腮腺炎、细菌性腮腺炎等。TG甘油三脂甘油三脂+H2O脂蛋白脂酶甘油+脂肪酸甘油+ATP甘油激酶L-α磷酸甘油+ADPL-α磷酸甘油+O2磷酸甘油氧化酶磷酸二羟丙酮+H2O2H2O2+4-AA+ESPAS过氧化物酶醌亚胺+H2O醌亚胺的生成,导致550nm吸光度的增加,增加的程度与TG的含量成正比(终点法)。升高见于肾病综合症、动脉粥样硬化、甲减、糖尿病、肝病等,降低见于营养不良、β脂蛋白缺乏、甲亢、恶液质等。TC总胆固醇总胆固醇+H2O胆固醇脂酶游离胆固醇+脂肪酸游离胆固醇+O2胆固醇氧化酶△4-胆甾烯酮+H2O2H2O2+4-AA+ESPAS过氧化物酶醌亚胺+H2O醌亚胺的生成,导致550nm吸光度的增加,增加的程度与TC的含量成正比(终点法)。升高见于动脉粥样硬化、肾病、糖尿病、粘液水肿等,降低见于甲亢、贫血、吸收障碍、恶液质等。HDL-C高密度脂蛋白胆固醇沉淀法:先用磷钨酸钠-镁沉淀LDL-C和VLDL-C,再按TC方法测定。均相法:先用多聚阴离子化合物选择性遮蔽LDL-C和VLDL-C,再按TC方法测定。含量越低,发生冠心病的危险越大。LDL-C低密度脂蛋白胆固醇沉淀法:先用PVS沉淀LDL-C,再按TC方法测定,TC值减去该测定值即为LDL-C。均相法:先用多聚阴离子化合物选择性遮蔽HDL-C和VLDL-C,再按TC方法测定。含量越高,发生冠心病的危险越大。UA尿酸尿酸+O2+H2O尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2H2O2+4-AA+ESPAS过氧化物酶醌亚胺+H2O醌亚胺的生成,导致550nm吸光度的增加,增加的程度与UA的含量成正比(终点法)。升高与痛风、白血病、妊毒血症、肾病有关。UREA尿素氮二乙酰—肟法:二乙酰—肟与强酸作用生成二乙酰,二乙酰与UREA在酸性条件下,缩合成红色的二嗪衍生物,导致520nm吸光度的增加,增加的程度与UAEA的含量成正比(终点法)。紫外-谷氨酸脱氢酶法:尿素+2H++H2O尿酸酶2NH4++CO2NH4++α-酮戊二酸+NADH谷氨酸脱氢酶谷氨酸+NAD++H2ONADH的减少,引起340nm吸光度的下降,单位时间内下降程度与UREA浓度成正比(固定时间法、两点速率法)。升高主要见于肾脏疾病,也可见于脱水、糖尿病昏迷、肾上腺危相、胃肠道出血、循环虚脱,下降见于严重的肝脏疾病。Cr肌酐碱性苦味酸法:肌酐+苦味酸碱性溶液肌酐-苦味酸复合物肌酐-苦味酸复合物的生成,导致510nm吸光度的增加,单位时间内增加量与Cr浓度成正比(固定时间法、两点速率法)。肌氨酸氧化酶法:肌酐+H2O肌酐氨基水解酶肌酸肌酸+O2+H2O肌酸眯基水解酶肌氨酸+尿素H2O2+4-AA+ESPAS过氧化物酶醌亚胺+H2O肌氨酸+O2+H2O肌氨酸氧化酶甘氨酸+HCHO+H2O2醌亚胺的生成,导致550nm吸光度的增加,增加的程度与Cr的含量成正比(终点法)。升高见于肾功能的损伤。Glu葡萄糖氧化酶法:H2O2+4-AA+ESPAS过氧化物酶醌亚胺+H2O葡萄糖+O2+H2O葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2醌亚胺的生成,导致500nm吸光度的增加,增加的程度与Glu的含量成正比(终点法)。己糖激酶法:葡萄糖-6-磷酸+NADG-6-PDH6-磷酸葡萄糖酸+NADH+H+葡萄糖+ATP己糖激酶葡萄糖-6-磷酸+ADPNADH的生成,引起340nm吸光度的增加,增加程度与Glu浓度成正比(终点法)。升高主要见于糖尿病,也可见于甲亢、垂体或肾上腺机能亢进;降低主要见于胰岛素过量、甲减、垂体机能减退、肾上腺机能减退、葡萄糖吸收障碍。TP总蛋白肽键+Cu2+碱性条件紫红色络合物紫红色络合物的生成,导致540nm吸光度的增加,增加的程度与TP的含量成正比(终点法)。升高见于各种原因失水、一种或多种球蛋白分泌增多;降低见于营养不良。Alb白蛋白白蛋白+溴甲酚绿pH4.2白蛋白溴甲酚绿复合物白蛋白溴甲酚绿复合物的生成,导致630nm吸光度的增加,增加的程度与Alb的含量成正比(终点法)。升高见于各种原因失水;降低见于肝脏疾病、肾病综合症、营养不良、蛋白丢失。T-Bil总胆红素总胆红素+2P-苯璜基重氮1,5-苯二璜酸盐pH1.42偶氮胆红素二甲亚砜重氮偶合法、比色法、终点法。冻干单剂型偶氮胆红素的生成,导致545nm吸光度的增加,增加的程度与T-Bil的含量成正比(终点法)。胆红素钒酸盐胆绿素pH3.0表面活性剂钒酸盐氧化法,比色法,终点法,液体双剂型胆红素的减少引起在波长450nm处吸光度的下降,吸光度的变化与总胆红素含量成正比。升高见于各类肝脏疾病,也可见于溶血性疾病。D-Bil直接胆红素直接胆红素+2P-苯璜基重氮1,5-苯二璜酸盐pH2.02偶氮胆红素重氮偶合法、比色法、终点法,冻干单剂型偶氮胆红素的生成,导致545nm吸光度的增加,增加的程度与D-Bil的含量成正比(终点法)。胆红素钒酸盐胆绿素pH3.0表面活性剂钒酸盐氧化法,比色法,终点法,液体双剂型胆红素的减少引起在波长450nm处吸光度的下降,吸光度的变化与直接胆红素浓度成正比。升高见于各类肝脏疾病和胆导阻塞。NH4+NH4++NADH+H++α-酮戊二酸GLDH谷氨酸+NAD++H2ONADH的减少,引起340nm吸光度的下降,下降程度与NH4+浓度成正比(终点法)。升高见于肝昏迷、肝性脑病。CO2二氧化碳磷酸稀醇式丙酮酸+HCO3-PEPC草酰乙酸+磷酸草酰乙酸+NADHMDH苹果酸+NAD+NADH的减少,引起340nm吸光度的下降,下降程度与CO2浓度成正比(终点法)。异常见于酸碱平衡失调。iPiP+钼酸+硫酸未还原磷酸钼酸络合物络合物的生成,引起340nm吸光度的上升,上升程度与iP浓度成正比(终点法)。升高见于慢性肾炎、甲状旁腺功能减退、VitD过多;降低见于佝偻病、骨软化等。Ca钙邻-甲酚肽络合酮(CPC)法Ca2++CPC碱性条件有色络合物有色络合物的生成,引起575nm吸光度的上升,上升程度与Ca浓度成正比(终点法),长征公司采用此法。甲基麝香草酚兰(MTB)法Ca2++MTB碱性条件有色络合物有色络合物的生成,引起612nm吸光度的上升,上升程度与Ca浓度成正比(终点法),科华公司采用此法。升高见于甲状旁腺功能亢进、肿瘤骨转移、VitD过多;降低见于甲状旁腺功能减退、佝偻病、肾病等。Mg镁Mg2++MTB碱性条件有色络合物EGTA有色络合物的生成,引起582nm吸光度的上升,上升程度与Mg浓度成正比(终点法)。升高见于尿毒症;降低见于吸收障碍、糖尿病性昏迷、急慢性酒精中毒、慢性肾病等。Cl氯Hg(SCN)2+Cl-HgCl2+SCN-SCN-+Fe3+Fe(SCN)3(红色络合物)红色络合物的生成,引起480nm吸光度的上升,上升程度与Cl浓度成正比(终点法)。升高见于柯兴综合症、酸中毒、尿毒症等;降低见于阿狄森氏病、碱中毒、腹泻、尿崩等。ApoA1/apoBapoA1/apoB+抗体缓冲环境抗原抗体复合物液相抗原抗体复合物的形成,导致340nm透射浊度的增加,增加的程