病原体及生物安全程度分级

1病原体及生物安全程度分级第一节概述对于操作一种特定的病原体或者为动物研究选择一个恰当的生物安全水平取决于许多因素，其中重要的是：病原体或毒素的毒力、致病性、生物稳定性、传播途径，病原体的传染性，实验室的性质或职能，涉及病原体的操作步骤和方法，病原体的地方流行性，有效的疫苗和治疗方法的可用性。本章为选择恰当的生物安全水平提供指导。其中包括有关实验室危害的特殊信息，以及推荐采取的实际操作的保护措施，它们能够明显降低实验室相关性疾病感染的危险性。本章包括符合下列一条或多条标准的病原体；已被证实对操作感染性物质的实验室人员具有危害(如乙肝病毒、M结核杆菌)；引起实验室相关性感染的可能性较高，包括没有文献证明的实验室相关性感染(如外来的虫媒病毒)；或者感染的后果严重。对能够得到的疫苗和类毒素，无论它们是已得到许可的产品还是研究性新药(In-vestigationalNewDrug，IND)，均推荐使用。这是以美国公共卫生署免疫技术顾问委员会(PublicHealthServiceAdvisoryCommitteeonImmumzationPractices，AClP)的建议为基础的，并且是特别针对那些处于危险中的实验室人员、以及其他必须进入或在实验室工作的人员。这些特殊的建议绝不应排除如白喉-破伤风类毒素、脊髓灰质炎病毒疫苗、流感疫苗等的常规使用。对于免疫力降低或处于特殊状况(如妊娠)的个体，在使用减毒活病毒疫苗时，应该采取适当的预防措施，因为在这些情况下，病毒感染可能会导致严重后果。本章中推荐的危险评估和生物安全水平，针对的是具有正常免疫功能的个体组成的群体。免疫力降低的人暴露在感染性病原体中，面临的危险可能会增加。免疫缺陷可能是遗传的、先天性的，或者是由肿瘤或感染性疾病因化疗或放疗造成的。感染危险或者感染后果也受年龄、性别、种族、妊娠和手术(如脾切除术、胃切除术)、易感染的疾病(如糖尿病、红斑狼疮)或生理功能改变等因素影响。将本章的一般危险评估应用于特定个体的特殊活动时，必须要考虑到这些因素。要确定一种病原体属于哪一级生物安全水平以实验操作为基础，对病原体的操作通常与进行鉴定或分型所需的病原体的生长状况，以及病原体的数量和浓度有关。如果操作临床样本比操作培养样本对工作人员造成的危险性小，就建议确定较低的生物安全水平级别。另一方面，如果实验操作涉及体积较大的样本和(或)浓度较高(“生产数量”)的病原体制备品，或可能产生气溶胶，或操作本身就有危险，则需要额外的预防措施，并提高初级和二级防扩散装置的水平。“生产数量”是指感染性病原体的体积或浓度，大大超过了通常进行鉴定和分型所需要的量。正如在大规模发酵、抗原和疫苗的生产以及各种商业和研究活动中，感染性病原体的增殖和浓缩需要处理大量“生产数量”级的感染性病2原体。大量的感染性病原体可能造成危险性增加，所以对于任何指定的病原体，不可能将“生产数量”限定为有限的体积或浓度。因此，实验室主管必须对要进行的实验操作进行评估，选择与危险性适合的操作技术、防扩散仪器和设施，而不需考虑涉及的病原体的体积和浓度。有时实验室主管选择的生物安全水平应该比建议的级别要高。例如，计划实验的独特性质可能需要较高的生物安全水平(如吸入研究，就需要对实验产生的气溶胶进行特殊的防扩散限制)；或者实验室接近需要特殊考虑的区域，也要求较高的生物安全水平(如位于患者护理区附近的诊断实验室)。同样，可以采用推荐的生物安全水平来补偿由于缺乏某些推荐的保护措施而引起的不足。例如，对于建议采取BSL-3级水平的微生物，在设施特征满足BSL-2级水平的实验室中进行常规或重复性操作(如为了鉴定、分型及敏感性检测而进行一种病原体增殖的诊断程序)时，只要严格按照建议的标准微生物学操作规程，适合BSL-3级水平的特殊操作规程和安全设备进行，也可达到可以接受的安全水平。在BSl-2级水平下，使用BSL-2级水平操作拄术和规程就能够安全地对临床样本进行常规的诊断工作。在BSL-2级设施中，使用BSL-3级操作技术和规程可以进行进一步的研究工作(包括共培养、病毒复制研究或涉及浓缩病毒的操作)。病毒的生产活动，包括病毒浓缩，需要BSL-3级设施，采用BSL-3级操作技术和规程。只有实验室主管才有权对BSL-3级的建议作出如上调整。但呈，对于增殖病原体的操作或者操作规程经常改变的实验并不建议作出这样的改动。实验室主管也应该考虑对可能含有可疑病原体的物质选择合适的保护措施。例如，人类来源的血清可能含有乙肝病毒，所以所有血液或者取自血液的液体都应该在有效地防止与实验室人员的皮肤、黏膜或者胃肠道接触的条件下被处理。实验室接收的用于结核杆菌实验的痰液则应该在培养或处理临床样本的过程中，有效地防止气溶胶的产生。本章对符合上述标准的感染性病原体以分类的方式作了总结。在应用总结时，首先在书中病原体种类下面找到相应的病原体，然后采用在本章中推荐的操作技术，安全设备和设施类型对临床样本和培养物进行处理，对感染性病原体或受感染动物进行操作。实验室主管还负责对未包括在奉章中的病原体作出恰当的危险评估，选择合适的操作技术、防扩散设备和设施。第二节细菌病原体一、炭疽杆菌已经有无数例的实验室相关性炭疽病报告，主要发生在研究炭疽的机构中。但从20世纪50年代末期引进了人类炭疽病疫苗以来，美国没有一例实验室相关性炭疽病的报道。任何操作炭疽杆菌的工作都要求特殊的安全考虑，因为它3可能会被用于生物恐怖主义活动。自然及实验感染的动物对实验室人员及动物饲养员会造成潜在的威胁。实验室危害这种病原体可以存在于血液，伤口渗出物、脑脊液、胸水和痰液中，极少存在于尿液和粪便中。完整或破损的皮肤直接和间接接触培养物及污染的实验室台面，意外的胃肠道外接种，以及在极少情况下接触有传染性的气溶胶，是对实验室人员的主要危害。推荐的预防措施建议在使用临床样本的实验操作及感染性培养物的定量诊断中，应用BSL-2级水平的操作技术、防扩散设备和设施。在使用实验性感染的啮齿类动物时，建议应用BSL-2级水平的操作技术、防扩散设备和设施。对于涉及“生产数量或浓度”的培养物的工作，以及产生气溶胶可能性较高的实验操作，建议采用BSL-3级水平的操作技术、防扩散设备和设施。注意事项已有获得许可的疫苗，但是，除了经常操作临床样本或培养物的人员，不推荐对所有实验室人员进行免疫。在动物疾病诊断实验室中，建议对所有操作病原体的人员，所有在培养物处理间工作的人员，以及所有对受感染的动物进行操作的人员进行免疫。二、百日咳博德特氏菌百日咳博德特氏菌是在世界范围内分布的一种人类呼吸道病原体，是引起百日咳的致病菌。百日咳是一种典型的儿童疾病，然而，该病原体己日益变得与成人疾病相关，文献已经报道过几次在卫生保健工作人员中的爆发。症状不典型或者未诊断出患有该疾病的青少年和成人可成为感染源，将该病原体传播给婴儿和儿童。有文献记录在一个大型研究机构中普发生8例成人感染百日咳博德特氏苗，他们每个人的工作都没有直接与这种病原体接触，但是都曾进入过操作这种病原体的普通实验室区域。其中还有一例二次传播给家庭成员。在美国一所较大的中西部大学也发生过一次类似的事件，引起两例实验室获得性感染，一例二次传播。除了在工作场所发生的成人与成人间的传播，其他实验室获得性百日咳博德特氏菌感染也曾有报道。但操作临床样本或分离物引起的获得性感染还未见报道。易感者接触感染源的亲密程度和频率可以影响这种空气传播传染病的侵袭率。实验室危害这种病原体主要存在于呼吸道分泌物中，但未见在血液和组织中存在。因为它们的自然传播方式是通过呼吸道途径，所以最大的潜在危害是在操作该病原体的培养物或浓缩悬浮液时产生的气溶胶。推荐的预防措施对于所有涉及使用或操作已知或可能具有感染性的临床样本或培养物的工作，建议应用BSL-2级水平的操作技术、防扩散设备和设施。感染动物的动物实验室，应采用ABSL-2级水平。对于可能产生具有潜在传染性气溶胶的实验操作，应使用基本的防扩散设备和仪器(如生物安全橱、安全离心杯或者特殊设计的安全离心机)。当进行大规模的生产操作时，建议采用BSL-3级水平的操作技术、防扩散设备和设施。4注意事项有商品化的百日咳疫苗，但目前并不推荐应用于成人。建议查阅刊登在《(CDC发病率和死亡率每周报告》(MorbidityandMortalityWeeklyReport，MM-WR)上的免疫技术顾问委员会最近的介绍，以获得有关成人使用百日咳疫苗的建议。三、布氏杆菌属(牛布氏杆菌、犬布氏杆菌、羊布氏杆菌、猪布氏杆菌)布鲁斯病一直是最常见的实验室相关性细菌感染病。牛布氏杆菌、犬布氏杆菌、羊布氏杆菌和猪布氏杆菌都曾在实验室人员中引起疾病，对布氏杆菌抗原的过敏症也是实验室人员遇到的一种危害。个别病例是因为接触实验性感染或自然感染的动物或其组织引起的。实验室危害这种病原体可以存在于血液、脑脊液和精液中，有时也可存在于尿液中。大部分实验室相关性感染发生在研究机构，主要是由于接触了大量生长的布氏杆菌。在临床实验室也出现过病例，是由于吸入了细菌培养物。在这些病例中，感染者的皮肤都曾与培养物或者来自动物的传染性临床样本(如血液、子宫分泌物)直接接触。在实验操作过程中产生的气溶胶曾引起过大爆发。口吸入，意外的胃肠道外接种，溅入眼、鼻和口中也曾导致感染。推荐的预防措施对于操作含有或可能含有致病性布氏杆菌的人类或动物的临床样本的工作，建议应用BSL-2级水平的操作技术。对于所有有关在本总结中列出以及用于实验性动物研究的致病性扣氏杆菌培养物的操作，建议分别采用BSL-3级水平和动物BSL-3级水平的操作技术、防扩散设备和设施。注意事项目前对人类布氏杆菌疫苗的研制和检测已经取得了一定的成功，但尚无可供人类使用的疫苗。四、Burkholderia马鼻疽杆菌(假单胞菌属马鼻疽杆菌)曾经报道过两个实验室相关性类鼻疽病例：—个与接触大量的气溶胶和皮肤接触有关；另一个推测在对盛有Pseudomonas.cepacia培养物的开口烧瓶进行超声灭菌过程中，吸入了传染性气溶胶而引起。实验室危害取决于感染部位的不同，这种病原体可以存在于痰液、血液、伤口渗出物和各种各样的组织中。对实验室人员的主要危害是与培养物和来自人类、动物或环境的感染性物质直接接触，摄入、自身接种以及暴露在传染性气溶胶和飞沫中。已经证明该病原体存在于血液、痰液和脓液中，并可见于取自疫区的土壤和水样中。推荐的预防措施对于所有已知或可能具有感染性的体液、组织和培养物的实验操作，建议应用BSL-2级水平的操作拄术、防扩散设备和设施。当处理受感染的动物，进行动物尸检以及有可能皮肤直接接触感染性物质时，应该戴上手套。对于极有可能产生气溶胶或飞沫以及涉及生产数量和浓度的感染性物质的实验操作，可以采用进一步的基本防扩散和人员预防措施，例如相当于BSL-3级水平的措施。注意事项目的还无可用于人类的疫苗。五、弯曲杆菌属(空肠弯曲杆菌／结肠弯曲杆菌．胎儿弯曲杆菌)5尽管有实验室获得性感染的病例记录，但空肠弯曲杆菌／结肠弯曲杆菌很少引起实验室相关性疾病。家养和野生动物包括家禽、宠物、农场牲畜、实验室动物和野生鸟类都是已知的传染源，对实验室人员和动物饲养员是潜在的传染源。实验性感染的动物也是感染时潜在来源。实验宣危害致病性弯曲杆菌可以大量存在于粪便样本中。胎儿弯曲杆菌也可存在于血液、脓液、组织和痰液中。摄入空肠弯曲杆菌或胃肠道外接种构成了主要的实验室危害。一个个体经口摄入500个细菌就可造成感染。暴露在气溶胶中能否引起感染还未知。推荐的预防措施操作培养物或可能具有感染性的临床样本的工作，建议应用BSL-2级水平的操作技术、防扩散设备和设施。处理自然或实验性感染的动物，建议采用ABSL-2级水平的操作技术，防扩散设备和设施。注意事项目前还无可用于人类的疫苗。六、鹦鹉热衣原体、肺炎衣原体、沙眼衣原体鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿(Lymphogranulomavenereum，LGV)和沙眼曾经是最常发生的实验室相关性细菌感染。1955年以前，绝大多数实验室获得性感染是鹦鹉热，且死亡率最高。实